麦荣嘉
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 转基因番茄及其核酸检测技术研究进展被引量：10
- 2009年
- 番茄作为重要的GMCs/GMF(genetically modified crops/food,转基因作物/食品)之一,在我国已被列入第一批实施标识管理的农业GMOs(genetically modified organisms,转基因生物)目录。通过对全球转基因番茄及其核酸检测技术研究现状的分析,阐述了转基因番茄的主要研究方向是研发具有延熟、抗虫等优良性能的番茄新品系,应用于疫苗以及其他药用性蛋白的生物反应器研究;总结了全球已获准上市和在研的重要转基因番茄品系的基因表达盒信息及其核酸检测研究数据;剖析了在转基因番茄核酸检测技术研究中尚存在的如关键性技术标准化以及标准物质缺乏等问题,并提出研究展望。希望为建立与国际接轨的转基因番茄量值溯源传递关键技术体系提供参考。
- 顾晓敏黎事伦胡良勇麦荣嘉周伦彬周晓红
- 关键词：生物工程转基因番茄核酸检测技术
- 快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建被引量：3
- 2012年
- 目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达。
- 莫倩珍麦荣嘉杨志晓陈敏芳杨铁钊赖华芳杨培梁陈强周晓红
- 关键词：烟草无土栽培绿色荧光蛋白
- 一种转基因番茄特异性检测靶序列、质粒标准分子及其检测试剂盒
- 本发明公开了一种转基因番茄Zeneca B，Da，F品系的基因特异性和构建特异性的检测靶序列、质粒标准分子及其核酸检测试剂盒，该质粒标准分子为含有任一种具有碱基组成SEQ ID NO：1-3的检测靶序列。所述核酸检测试剂...
- 周伦彬胡良勇周晓红麦荣嘉
- 文献传递
- 日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位被引量：1
- 2015年
- 目的观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,Taqman探针q RT-PCR检测Sjp40 m RNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-Mc Ab 9G7和抗弓形虫t SAG1-Mc Ab Y3A8(对照抗体),western blot检测Sjp40蛋白的表达;制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿组织中的定位。结果日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 m RNA水平显著高于29 dpi尚未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵(P<0.05),westernb blot证实了Sjp40蛋白在29 dpi和45 dpi兔肝脏中的表达。免疫荧光显示:Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论 Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增加,在感染兔急性肉芽肿病变期(45dpi)呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过程中具有重要作用。
- 夏丹邓淦明滕萍英谢郁李耀民王春梅陈淑洁陈敏芳麦荣嘉廖海燕石玲玉欧丽妍陈启伟陈晓光周晓红
- 关键词：日本血吸虫虫卵肉芽肿免疫荧光定位
- 一种转基因番茄特异性检测靶序列、质粒标准分子及其检测试剂盒
- 本发明公开了一种转基因番茄Zeneca B，Da，F品系的基因特异性和构建特异性的检测靶序列、质粒标准分子及其核酸检测试剂盒，该质粒标准分子为含有任一种具有碱基组成SEQ ID NO：1-3的检测靶序列。所述核酸检测试剂...
- 周伦彬胡良勇周晓红麦荣嘉
- 类风湿关节炎伴发粪类圆线虫病1例被引量：1
- 2011年
- 粪类圆线虫是兼性寄生虫，多分布在热带、亚热带地区，全世界约有3000万到1亿人感。国内粪类圆线虫呈散在分布，具有地方性，广西、海南地区多见。1996年调查显示，我国有26省（市、区）查到粪类圆线虫感染者，全国平均感染率为0．12％，主要流行于南部地区，局部地区感染率可达11．0％～14．0％。姜进勇等采用Bearmann法对云南省勐海县居民粪类圆线虫感染情况进行调查，
- 沈素晶李娟王春梅周斌麦荣嘉姜荣龙周晓红
- 关键词：粪类圆线虫病类风湿关节炎亚热带地区伴发感染率
- 一种适用于番茄内标准基因的核酸检测靶序列及其应用
- 本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种适用于番茄内标准基因的核酸检测靶序列，该序列如SEQ ID NO：1所示。本发明所述的核酸检测靶序列的拷贝数是恒定的单拷贝，而且在种间高度特异，种内高度同源，适于作为番茄内标准基因。...
- 周晓红麦荣嘉陈晓光周伦彬胡良勇
- 文献传递
- 日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应被引量：3
- 2012年
- 目的研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平。方法以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰。体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7 d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物。提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达。结果转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80%左右;蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化。此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高。结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响。
- 陈敏芳麦荣嘉莫倩珍周晓红
- 关键词：日本血吸虫RNA干扰DSRNA
- 转基因番茄Zeneca B,Da,F实时荧光定量PCR检测体系的建立被引量：4
- 2011年
- 目的构建转基因番茄Zeneca B,Da,F品系的质粒标准分子及其实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系。方法基于反向遗传学原理构建分别含有番茄内标准基因apx检测序列(ERG-apx),转基因番茄B,Da,F品系pg基因的基因特异性序列(GS-pg)及其构建特异性序列(CS-16S、CS-16A)的番茄内参质粒标准分子pEasy-T3-APX,转基因番茄B,Da,F品系的构建特异性质粒标准分子pEasy-T3-16A、pEasy-T3-16S;以Beacon Designer 7.5设计用于定性PCR和qPCR检测的引物对和Taqman探针;基于质粒标准分子建立了定性PCR和qPCR检测体系,对方法的特异性、敏感性、重复性、检测下限等指标进行评估;使用PicoGreen试剂盒对质粒标准分子进行定量,以质粒pEasy-T3-APX为背景DNA定量混有pEasy-T3-16A或pEasy-T3-16S制备成含量为1%和0.1%(w/w)的两组核酸标准物质,进行所构建qPCR检测体系的定量性能评价。结果锚定qPCR检测靶序列:ERG-apx 108 bp,GS-pg 108 bp,CS-16S 109 bp、CS-16A 102 bp;酶切鉴定所构建的质粒标准分子均可得到预期大小的插入子片段;所建立的实时荧光定量PCR(qPCR)检测体系,重复性的相对标准差(RSD)0.2%～1.5%,检测下限25 copies,标准曲线方程线性关系R2值在0.994～0.998,效率在93.3%～102.4%。经换算系数Cf换算,对PicoGreen定量的样品进行验证,其实测值与真值的偏差是-9.7%～17.3%。结论成功构建了转基因番茄Zene-ca B,Da,F品系的质粒标准分子及其qPCR检测体系,为转基因番茄Zeneca B,Da,F品系转基因成分的监测建立了可行的可供使用的定性与定量检测体系。
- 麦荣嘉陈敏芳莫倩珍胡良勇黎事伦唐敏然顾晓敏蔡永洪周伦彬周晓红
- 关键词：转基因番茄核酸检测技术荧光定量PCR
- 番茄转基因成分研究进展
- 顾晓敏黎事伦胡良勇麦荣嘉周伦彬周晓红
