冷鑫
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省医学重点学科基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鞘内注射miR-212反义锁核酸对骨癌小鼠痛行为的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究骨癌痛发展和维持过程中小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律及连续鞘内注射miR-212反义锁核酸LNA．anti—miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法本实验分为两个部分：（一）骨癌痛小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律：C3H／HeJ雄性小鼠36只，随机分为假手术组（sham组，n=18）和肿瘤组（T组，n=18）。sham组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM，T组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射纤维肉瘤细胞NCTC2472，建立骨癌痛模型。在术前1d，术后4d、7d、10d、14d、21d，sham组和T组各随机取三只小鼠处死，取脊髓腰膨大标本，用Real-timePCR的方法检测脊髓水平miR一212的表达情况。（二）连续鞘内注射LNA—anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响：C3H／HeJ雄性小鼠24只，随机分为四组：L组（鞘内注射LNA-anti—miR一212，n=6）、L’组（鞘内注射LNA＇-negativecontrol，n=6）、C组（鞘内注射溶媒无核酸酶水，n=6）和S组（假手术处理，n=6）。L组、L’组和C组小鼠在右侧股骨远端注射纤维肉瘤细胞NCTC2472，S组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM。所有小鼠于术前1d、术后4d、7d、10d、14d测小鼠痛行为指标，包括自发抬足次数和机械缩足阈值（PWMT），术后14d，L组、L’组、C组小鼠分别鞘内注射LNA—anti—miR-21212pmol／5山、LNA＇-negativecontrol12pmol／5I＊1和无核酸酶水5I＊1，连续鞘内注射7d，1次／d，每天测小鼠痛行为指标，至术后第21天。结果miR-212的表达变化表现为：与基础值相比，sham组和T组小鼠在术后第4天，脊髓水平miR一212明显升高（P〈0．05）；与基础值和sham组相比，T组小鼠脊髓水平miR-212在术后7d、10d、14d、21d均明显升高（P〈0．05）。连续鞘内注射LNA—anti—miR-212改善骨癌痛小鼠痛行为：术后19d至21d，与L’组和c组相比，L组小鼠PWMT[1
- 侯百灵刘玥夏天娇张羽孙蓓冷鑫周瑜倪坤顾小萍马正良
- 关键词：骨癌痛
- 脊髓多巴胺D2受体在大鼠神经病理性痛中的作用被引量：2
- 2015年
- 目的评价脊髓多巴胺D：受体在大鼠神经病理性痛中的作用。方法健康雄性SD大鼠30只，6—8周龄，体重180—200g，采用随机数字表法，将其分为5组（／2=6）：正常对照组（c组）、假手术组（s组）、神经病理性痛组（NP组）、生理盐水组（N组）和多巴胺D，受体激动剂喹吡罗组（Q组）。采用坐骨神经慢性压迫性损伤法建立大鼠神经病理性痛模型。于术后7d时，N组经30s鞘内注射生理盐水10μl，Q组经30s鞘内注射多巴胺D：受体激动剂喹吡罗10μg（溶于10μl生理盐水中）。于术前1d、术后3和7d、给药后30min、1、2、4、8和16h（T。）时，测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TwL）。结果C组和S组各时点MWT和TwL比较差异无统计学意义（P〉0．05）；与C组和S组比较，NP组、N组和Q组T1-8时MWT降低，TWL缩短（P〈0．05）；与NP组比较，N组各时点各指标差异无统计学意义（P〉0．05），Q组T4-6时MWT升高，TWL延长（P〈0．05）。结论脊髓多巴胺D2受体功能抑制参与了大鼠神经病理性痛的维持。
- 冷鑫隽立芹马正良夏小萍
- 关键词：受体多巴胺D2脊髓神经痛
- 脊髓神经元CREB转录共激活因子1在小鼠骨癌痛维持中的作用
- 2014年
- 目的 评价脊髓神经元环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）转录共激活因子1（CRTC1）在小鼠骨癌痛维持中的作用.方法 C3H/HeJ雄性小鼠32只,4～6周龄,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将其分为4组（n=8）：假手术＋生理盐水组（S组）、骨癌痛＋生理盐水组（BCP组）、骨癌痛＋空白腺病毒载体（Ad-EGFP）组（Ad-EGFP组）和骨癌痛＋CRTC1基因RNA干扰腺病毒（Ad-CRTC1）组（Ad-CRTC1组）.BCP组、Ad-EGFP组和Ad-CRTC1组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型,S组小鼠接种不含肿瘤细胞的α-MEM.于接种肿瘤细胞后第14天开始,每天定时分别鞘内注射溶剂生理盐水5μl（BCP组）、溶于生理盐水的Ad-EGFP 5 μl（Ad-EGFP组）和Ad-CRTC1 5μl（Ad-CRTC1组）,连续给药3d,1次/d.于接种前1d、接种后4、7、10、14 d以及鞘内给药结束后1、3、5、7 d（T0-8）时测定机械缩足反应阈和自发抬足次数.结果 与T0时比较,各组T1时机械缩足反应阈降低和自发抬足次数增加（P＜0.05）,S组T2时机械缩足反应阈和自发抬足次数差异无统计学意义（P＞0.05）,BCP组、Ad-EGFP组和Ad-CRTC1组随时间延长机械缩足反应阈降低,自发抬足次数增加（P＜0.05）;与S组比较,其余各组机械缩足反应阈降低,自发抬足次数增加（P＜0.05）;与BCP组和Ad-EGFP组比较,Ad-CRTC1组T5-8时机械缩足反应阈升高,自发抬足次数减少（P＜0.05）.结论 脊髓神经元CRTC1参与了小鼠骨癌痛的维持.
- 刘玥刘明侯百灵孙蓓张羽冷鑫石林玉顾小萍马正良
- 关键词：骨肿瘤神经元脊髓
- 脊髓神经元微小RNA-132在小鼠骨癌痛中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的评价脊髓神经元微小RNA-132（miR-132）在小鼠骨癌痛中的作用。方法雄性C3H／HeJ小鼠，4～6周龄，体重20～25g。第一部分实验C3H／HeJ雄性小鼠52只，采用随机数字表法，将其分为2组（n=26）：假手术组（S组）和骨癌痛组（BCP组）；第二部分实验C3H／HeJ雄性小鼠32只，采用随机数字表法，将其分为4组（n=8）：假手术＋鞘内注射无核酸酶水组（S＋Veh组）、骨癌痛＋鞘内注射无核酸酶水组（BCP＋Veh组）、骨癌痛＋鞘内注射阴性对照锁核酸组（BCP＋c组）和骨癌痛＋鞘内注射miR-132反义锁核酸组（BCP＋AS组）。采用右侧股骨远端骨髓腔注射2×10＾5个NCTC2472细胞的方法制备骨癌痛模型。BCP＋c组及BCP＋AS组于接种后14d，分别鞘内注射阴性对照锁核酸和miR-132反义锁核酸12pmol／5μl，S＋Veh组及BCP＋Veh组给予等容量无核酸酶水，连续7d，1次／d。S组和BCP组分别于接种前、接种后4、7、10、14、21d时测定机械缩足反应阈（MWT）和自发抬足次数（NSF），并测定脊髓水平miR-132表达；S＋Veh组、BCP＋Veh组、BCP＋C组和BCP＋AS组于接种后14d鞘内给药前、接种后15、16、17、18、19、20、21d时测定上述痛行为学指标。结果与s组比较，BCP组接种后7-21d时MWT降低，NSF增加，脊髓水平miR-132表达上调（P〈0．05）；与s＋Veh组比较，其他3组各时点MWT降低，NSF增加（P〈0．05）；与BCP＋Veh组比较，BCP＋AS组接种后16．21d时MWT升高，NSF减少（P〈0．05）。结论脊髓神经元miR-132参与了小鼠骨癌痛的形成和维持。
- 刘玥侯百灵刘明夏天娇孙蓓张羽冷鑫石林玉顾小萍马正良
- 关键词：微RNAS脊髓骨肿瘤
- 大麻素受体2激动剂JWH-015对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨腹腔注射大麻素受体（cannabinoid receptor，CB）2激动剂对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cyclic AMP respons eclement binding protein，pCREB）表达的影响。方法运用随机数字表法将63只雌性SD大鼠分为3组：肿瘤给药组（J组，15只）、肿瘤对照组（D组，24只）和假手术对照组（S组，24只）。J组、D组的大鼠左侧胫骨上端骨髓腔被注入5μl Walker256大鼠乳腺癌细胞制备骨癌痛模型；S组则注入等量的生理盐水。在造模后第10天，J组腹腔注射JWH-015（100μg/500μ1），D组、s组注射等量JWH-015溶剂二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）。每组大鼠于造模前1d，造模后4、7、10d，腹腔注射后2、6、24、48、72h，检测手术侧机械刺激缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold，pwMT）和行走痛行为学评分。D组和S组大鼠于造模后4、7d，J组、D组和S组大鼠于造模后10d及腹腔注射后6、24、72h，取脊髓腰膨大进行免疫印迹分析。结果与S组比较，J组和D组大鼠造模后7d PWMT开始降低（P〈0.05），造模后10d行走痛行为学评分增加（P〈0.05），脊髓背角pCREB表达水平于7、10d上调（P〈0.05）.与D组比较，腹腔注射JWH-015后24h，J组PWMT（8.7±1.6）g显著上升（P〈0.05），行走痛行为学评分（1.0±0.6）分和pCREB的表达（0.56±0.10）明显下降（P〈0.05）。结论腹腔注射JWH-015可能通过下调脊髓背角pCREB的表达改善骨癌痛大鼠的痛行为。
- 孙蓓张羽冷鑫顾小萍马正良
- 关键词：大麻素受体骨癌痛
- 骨癌痛小鼠痛行为及脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白和脑源性神经营养因子表达的改变被引量：1
- 2014年
- 目的 通过观察骨癌痛小鼠痛行为学的变化,磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP response element binding protein,pCREB）和脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）在脊髓背角中表达的变化,探讨pCREB和BDNF在骨癌痛产生和维持中的作用. 方法 52只雄性C3H/HeJ小鼠,采用随机数字表法分为骨癌痛组（T组）和假手术组（S组）,每组26例.T组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射含2×10^5个纤维肉瘤细胞的20μl最小必须培养基（α-minimal essence medium,α-MEM）,而S组注入不含肿瘤细胞的20μ1α-MEM,分别于接种肿瘤细胞前1d、接种后第4、7、10、14、21天测定自发抬足次数（spontaneous lifting times,SLTs）和机械缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）.按照分组在相应时间点处死小鼠,用免疫印迹法测定小鼠L3～5脊髓背角pCREB和BDNF的蛋白表达水平. 结果 与术前基础值和S组比较：接种后7、10、14、21d,T组小鼠SLTs[（4.43±0.91）,（7.10±1.03）,（11.27±1.35）,（13.03±0.58）次]显著增加（P＜0.05）;接种后10、14、21 d,T组小鼠PWMT[（0.63±0.20）、（0.32±0.12）、（0.24±0.12）g]明显下降（P＜0.05）,脊髓背角pCREB[（3.78±0.58）、（3.92±0.46）、（4.92±0.37）]和BDNF[（2.13±0.31）、（2.88±0.15）、（2.58±0.41）]的表达显著增加（P＜0.05）. 结论 骨癌痛小鼠脊髓背角pCREB和BDNF表达增加,并且与痛行为学的改变具有相关性,提示其可能参与了骨癌痛的产生和维持.
- 张羽孙蓓刘玥侯百灵冷鑫马正良
- 关键词：骨癌痛小鼠脊髓背角
- 骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1表达的变化
- 2014年
- 目的 探讨骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1（CRTC1）表达的变化.方法 采用随机数字表法,46只C3H/HeJ雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组,n=23）和肿瘤组（Tumor组,n=23）,Tumor组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型,Sham组小鼠接种不含肿瘤细胞的α-MEM.两组在术前1d、术后4d、7d、10 d、14 d、21 d检测痛行为学,并于相应时间点痛行为学检测后,分别随机选取3只小鼠处死,取脊髓L3-L5节段,采用Western Blot法检测CRTC1的蛋白表达水平.结果 与Sham组比较,Tumor组接种后各时间点机械缩足阈值[（1.35±0.14）g,（1.10±0.28）g,（0.78±0.25）g,（0.47±0.16）g,（0.34±0.16）g]明显降低（P＜0.05）,自发抬足次数[（3.12±0.74）次,（6.02±0.67）次,（7.42±1.22）次,（10.82±0.98）次,（12.48±1.06）次]明显增加（P＜0.05）.与基础值相比,Sham组和Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后4d升高（P＜0.05）;与基础值和Sham组相比,Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后7d、10d、14d、21 d均升高（P＜0.05）.结论 骨癌痛小鼠脊髓水平CRTC1的蛋白表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的发生和维持.
- 杨许丽刘玥侯百灵刘明夏天娇孙蓓张羽冷鑫石林玉孙玉娥顾小萍马正良
- 关键词：骨肿瘤疼痛脊髓
- 神经痛大鼠脊髓胶质细胞源性神经营养因子参与多巴胺D2受体激动剂对痛觉过敏的调制作用被引量：1
- 2014年
- 目的 研究鞘内注射多巴胺D2受体激动剂喹吡罗对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓水平胶质细胞源性神经营养因子表达的影响,探讨其介导抗伤害作用的可能机制. 方法 实验1：采用完全随机分组方法将30只成年雄性SD大鼠制作坐骨神经慢性压迫损伤（chronic constriction injury of sciatic nerve,CCI）模型分为5组（每组6只）：CCI＋生理盐水（NS组）、CCI＋喹吡罗0.1 μg（Q0.1组）、CCI＋喹吡罗1μg（Q1组）、CCI＋喹吡罗5 μg（Q5组）、CCI＋喹吡罗10 μg（Q10组）,分别在建模后第7天鞘内注射0.1、1、5、10 μg喹吡罗,NS组单次鞘内注射生理盐水10μl.于给药前及给药后0.5、1、2、4、8、16h测定大鼠术侧后足机械缩足反射阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）和热缩足反射潜伏期（paw withdrawal thermal latency,PWTL）.实验2：将54只成年雄性SD大鼠制作CCI模型,并采用完全随机分组方法分为3组（Q5组、Q10组、NS组,每组18只）：Q5组、Q10组分别在建模后第7天鞘内注射5、10μg喹吡罗后0.5、1、2、4、8、16h处死取材,NS组单次鞘内注射生理盐水10μl;另取6只正常大鼠作为模型对照组（M组）,另取6只正常大鼠作为对照组（C组）.采用免疫印迹法测定脊髓背角胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic fact,GDNF）蛋白表达的变化. 结果 实验1：与NS组比较,Q0.1组注药后各时间点PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）,Q1组注药后2 h PWMT[（4.3±1.5）g]及PWTL[（13.2±1.6）s],Q5组注药后1,2、4 h PWMT[（4.7±1.6）、（5.3±1.6）、（4.7±2.1）g]和PWTL[（14.0±1.7）、（15.2±1.5）、（13.4±1.6）s],Q10组注药后1、2、4 h PWMT[（6.0±1.3）、（7.3±1.0）、（5.3±2.1）g]和PWTL [（15.3±1.8）、（17.5±1.2）、（14.9±1.7）s]明显升高（P＜0.05）.实验2：与C组比较,M组GDNF表达（0.95±0.09）明显升高（P＜0.05）.与M组和NS组比较,GDNF的表达Q
- 冷鑫隽立芹马正良夏小萍
- 关键词：多巴胺激动剂脊髓胶质细胞源性神经营养因子鞘内注射
