刘剑
- 作品数:7 被引量:13H指数:3
- 供职机构:郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 三氧化二砷对人乳腺癌雌激素受体蛋白表达的影响被引量:4
- 2011年
- 目的本实验通过三氧化二砷(As2O3)对人雌激素受体-α(estrogen receptor alpha,Erα)阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行药物诱导,使其重新表达ERα的可能性及机制。方法用含As2O3终浓度分别为0.5、2.0、4.0μmol/L的1640培养液连续培养MDA-MB-231细胞72 h。以不加药同期培养的231细胞作为阴性对照,以MCF-7为阳性对照。分别用Western blot和免疫组化法检测ERα蛋白的重新表达情况。结果①Western blot检测结果证实经2.0、4.0μmol/LAs2O3处理的MDA-MB-231细胞组在相对分子质量66 000处显示出ERα蛋白带。②免疫组织化学结果显示:0.5μmol/L组阳性染色细胞<10%,与阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.064);2.0μmol/L组阳性染色细胞>70%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P=0.001);4.0μmol/L组阳性染色细胞>40%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P=0.03)。结论适当浓度As2O3能诱导ERα蛋白表达,可以使雌激素受体阴性的乳腺癌细胞重新表达雌激素受体。
- 杨建华饶石磊王冰刘剑王留兴
- 关键词:三氧化二砷乳腺肿瘤雌激素受体
- S100A4在食管鳞癌上皮间质转化过程中的作用及其分子机制被引量:3
- 2015年
- 目的探讨钙结合蛋白S100A4在食管鳞癌上皮间质转化(EMT)过程中的作用及其可能的分子机制。方法化学合成靶向S100A4的3对siRNA序列瞬时转染EC9706细胞,同时以转染阴性对照siRNA、脂质体和空白EC9706细胞作为对照,荧光定量RT—PCR和Westernblot法检测其抑制效率。将抑制效果最佳的S100A4siRNA2以相同条件转染食管癌EC9706细胞,同时以转染阴性对照siRNA、脂质体和空白EC9706细胞作为对照;然后在转染S100A4siRNA2的EC9706细胞中转染snarl真核表达载体,并以S100A4siRNA2组、snail真核表达载体组和空白组为对照,分别采用荧光定量RT—PCR和Westernblot法检测E—cadherin、vimentin和snail的表达,倒置显微镜观察各组EC9706细胞形态变化,Boydenchamber和划痕实验检测各组EC9706细胞侵袭迁移能力的变化,CCK-8法检测各组EC9706细胞增殖能力的变化。结果S100A4siRNA2组S100A4mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.417±0.041和0.337±0.039,穿膜细胞数为(61.608±8.937)个,划痕愈合距离为(0.216±0.064)mm,A值为0.623±0.084,E—cadherinmRNA和蛋白的相对表达量分别为0.619±0.032和0.495±0.034,vimentin mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.514±0.032和0.427±0.028,snailmRNA和蛋白的相对表达量分别为0.573±0.029和0.429±0.041,与脂质体组、阴性对照组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。S100A4siRNA2作用于EC9706细胞24h后,细胞形态向上皮细胞形态转变,呈去梭形化趋势。S100A4siRNA2+snail真核表达载体组的穿膜细胞数和划痕愈合距离分别为(69.382±9.666)个和(0.274±0.029)mm,A值为0.823±0.101,snailmRNA和蛋白的相对表达量分别为0.704±0.037和0.625±0.031,vimentinmRNA和蛋白的相对表达量分别为0.712±0.046和0.609±0.038,高于S100A4siRNA2组(均P〈0.05);S100A4siRNA2+snail真核�
- 刘剑王志红王留兴樊青霞
- 关键词:食管肿瘤S100A4上皮间质转化
- 应用艾恒亚叶酸钙5-氟脲嘧啶方案(FOLFOX4)治疗晚期大肠癌35例疗效观察
- 2007年
- 目的评价改良的FOLFOX4方案治疗晚期大肠癌的疗效和毒性。方法艾恒(国产奥沙利铂)85mg/m^2静滴2hd1;亚叶酸钙(CF)200mg/m^2静滴2hd1-2,5-氟脲嘧啶(5-Fu)400mg/m^2静脉推注d1-2(或快速静脉滴入),5-Fu600mg/m^2持续静脉滴注(CIV)22hd1-2,每14d为1周期(2周期后进行疗效评价)。结果全组35例患者,总有效率(CR+PR)为57.14%,中位肿瘤进展时间(TTP)为8.1个月。主要不良反应为随累积剂量增加外周神经感觉异常、口腔黏膜炎、骨髓抑制、恶心呕吐和腹泻,但多为Ⅰ-Ⅱ度。结论改良的FOLFOX4方案治疗晚期大肠癌疗效较高,毒副反应可耐受。
- 刘剑王留兴樊青霞王瑞林赵培荣
- 关键词:晚期大肠癌化疗FOLFOX4方案
- 食管癌根治术后纵隔淋巴结转移的立体定向三维适形放射治疗
- 目的:探讨食管癌综合治疗后纵隔淋巴结转移立体定向三维适形放射治疗的价值。方法:46例食管癌患者治疗后2~55个月发生纵隔淋巴结转移,手术前放疗16例,手术后放疗31例,配合化疗35例,其中手术前后接受过放疗的33例患者纵...
- 丁广成刘剑秦德华陈家富魏丽远赵普学
- 关键词:食管肿瘤纵隔淋巴结转移临床疗效
- 恶性肿瘤患者化疗过程中的全面护理
- 2005年6月—2006年4月,我科对接受化疗的250例恶性肿瘤患者进行了全面的护理,现总结如下: 1 材料与方法 1.1 临床资料选取 2005年6月—2006年4月肿瘤科患者250例,进行全面护理(均已确诊,有病理依...
- 任梅香刘剑
- 文献传递
- 钠氢交换蛋白1基因在体外对食管癌KYSE-70细胞增殖和侵袭作用的影响被引量:6
- 2013年
- 目的:观察钠氢交换蛋白1(Na^+/H^+ exchanger 1,NHE-1)基因对食管癌KYSE-70细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测NHE-1mRNA及其蛋白在人食管癌EC-9706、KYSE-450、EC-1和KYSE-70细胞中的表达情况。将化学合成的靶向NHE-1的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)体外转染入KYSE-70细胞,实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测转染24、48和72h后KYSE-70细胞中NHE-1mRNA及其蛋白的表达,MTT和Boyden小室法检测KYSE-70细胞的增殖及侵袭能力。结果:NHE-1mRNA及其蛋白在KYSE-70细胞中高表达。与阴性对照(转染阴性对照siRNA)及空白对照(未转染的KYSE-70细胞)组相比,靶向NHE-1的siRNA可抑制KYSE-70细胞中NHE-1 mRNA及其蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组、空白对照组及NHE-1siRNA转染24h组比较,NHE-1siRNA转染48和72h后的KYSE-70细胞体外增殖能力和侵袭能力明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰NHE-1基因的表达可以抑制食管癌KYSE-70细胞的体外增殖和侵袭能力,NHE-1基因有望成为食管癌基因治疗的重要靶点。
- 刘剑王峰何炜王留兴樊青霞
- 关键词:食管肿瘤肿瘤细胞增殖细胞
- 沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC-9706细胞中MMP-9基因表达的影响
- 2011年
- 目的:探讨在食管鳞癌EC-9706细胞中沉默CXCR4基因对MMP-9基因表达的影响,为阐明CXCR4基因在食管鳞癌侵袭转移中的作用提供实验依据.方法:化学合成2条靶向CXCR4基因的siRNA1和siRNA2,同时设立荧光标记阴性对照和空白对照.脂质体法转染入EC-9706细胞,荧光显微镜下观察转染效率.转染48h后,半定量RT-PCR检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因mRNA表达的变化,Western blot检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因蛋白表达的变化,侵袭小室检测各组细胞穿膜细胞数的变化,MTT检测各组细胞的A值.结果:与阴性对照和空白对照相比,转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞CXCR4mRNA和蛋白的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);同时与阴性对照和空白对照相比,转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞MMP-9mRNA和蛋白的表达同样明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞穿膜细胞数与阴性对照和空白对照相比明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);MTT结果显示转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞增殖能力下降,与阴性对照和空白对照相比差异具有统计学意义(P<0.05).结论:在食管鳞癌EC9706中存在CXCR4基因对MMP-9基因的调控作用,CXCR4基因有可能通过调控MMP-9基因的表达参与食管鳞癌细胞的浸润转移,CXCR4有可能成为食管鳞癌基因治疗的有效靶点.
- 刘剑王峰朱利楠何炜王留兴樊青霞
- 关键词:食管鳞癌CXC趋化因子受体4基质金属蛋白酶-9基因调控