目的研究三叶因子3(TFF3)基因在宫颈癌组织和正常组织中的表达情况,同时探讨微小RNA-7-5p(miR-7-5p)调控TFF3对人宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法实时聚合酶链反应检测TFF3在30例宫颈癌及其邻近正常组织中的表达;采用脂质体转染法将TFF3-siRNA、miR-7-5p转染入宫颈癌HeLa及SiHa细胞中。采用CCK-8、Transwell实验和平板克隆实验检测瞬时转染TFF3-siRNA及miR-7-5p mimics对宫颈癌细胞增殖、迁移及克隆形成能力的影响;并利用双荧光素酶报告实验检测miR-7-5p与TFF3的相互关系。结果 TFF3在73.33%(22/30)宫颈癌组织中表达量明显高于其邻近正常组织( P <0.001)。与阴性对照组比较,TFF3 siRNA转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 3~5 d后,细胞增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞分别为(170±15)个/高倍镜视野和(155±10)个/高倍镜视野,TFF3干扰组迁移细胞分别为(70±20)个/高倍镜视野和(54±8)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数分别为(160±34)个和(183±17)个,TFF3干扰组细胞克隆数分别为(45±15)个和(33±12)个,形成能力明显减弱( P < 0.05)。荧光素报告系统表明miR-7-5p可抑制含野生型TFF3 3′UTR序列的荧光素酶活性( P <0.01),但对含突变型TFF3 3′UTR的荧光素酶活性影响不显著( P >0.05)。与阴性对照组比较,miR-7-5p mimics转染宫颈癌细胞株HeLa和SiHa 4~5 d后,增殖明显受到抑制( P <0.05)。Transwell细胞迁移实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组迁移细胞为(364±48)个/高倍镜视野和(411±27)个/高倍镜视野,miR-7-5p mimics转染组迁移细胞为(165±15)个/高倍镜视野和(100±208)个/高倍镜视野,迁移能力被显著抑制( P <0.05)。克隆形成实验表明: HeLa和SiHa阴性对照组克隆形成数为(83±11)个和(129±21)个,miR-7-5p mimics转染组细胞克隆数为(25±7)个和(14�
