史晓燕
- 作品数：6 被引量：27H指数：1
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- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 小分子化合物AICAR维持胚胎干细胞多能性的机制研究
- 胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）是从早期囊胚内细胞团分离而出的多能性细胞。这些细胞能够体外培养无限增殖，维持自我更新，并且在特定条件下可以分化成为机体几乎所有类型的细胞。因此，ES细胞被认为...
- 史晓燕
- 关键词：AICARES细胞MIRNA多能性
- 文献传递
- AICAR通过激活Foxc1信号抑制小鼠F9细胞增殖
- 2013年
- 为了探索5-氨基咪唑-4-氨甲酰核糖核苷(AICAR)抑制小鼠F9细胞(F9 embryonal carcinoma cells)增殖的作用机制,本文构建了Foxc1的慢病毒真核表达载体,通过实时定量PCR、免疫荧光染色、双荧光素酶报告基因检测系统以及细胞增殖检测试验,探索AICAR抑制小鼠F9细胞的增殖作用机制.结果发现,AICAR可以在RNA和蛋白水平促进Foxc1的基因表达,并可以作用于核转录因子κB通路.另外在培养液中添加AICAR或过表达Foxc1都能抑制F9细胞的增殖.信号通路报告载体检测发现Foxc1可以激活核转录因子κB通路以及细胞周期相关的通路.总之,本研究证明,AICAR通过激活Foxc1通路及其下游多条信号通路来抑制F9细胞增殖.
- 艾志营杨丽萍邵婧婧吴勇延史晓燕杜娟郭泽坤
- 关键词：FOXC1增殖
- HBx调控EZH2启动子活性的机制研究
- 乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染细胞后编码的一种具有反式激活作用的多功能蛋白,可调控多种肿瘤相关基因的表...
- 史晓燕
- 关键词：乙型肝炎病毒HBXEZH2启动子E2F1
- 文献传递
- HBx-EGFP-TLM融合蛋白表达载体的构建、蛋白表达纯化及活性检测
- 2011年
- 乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)具有广泛的转录激活作用,但是由于细胞类型和实验条件的差异,外源启动子介导的HBx瞬时表达水平常表现出不均一性,为其功能的研究带来困难。为了解决HBx研究过程中遇到的这些难题,利用PCR扩增获得HBx及含转导肽TLM的EGFP编码序列,经酶切后插入pGEX-4T-1原核表达载体,成功构建重组质粒pGEX-HBx-EGFP-TLM和pGEX-EGFP-TLM。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白经IPTG诱导表达,采用?KTATM Purifier蛋白纯化系统纯化并进行SDS-PAGE和Western blotting分析,确定为目的蛋白。将纯化后的融合蛋白分别与AML12和SMMC-7721细胞共孵育,Western blotting和激光共聚焦显微镜检测证实TLM转导肽能够介导HBx-EGFP和EGFP进入细胞,同时进入细胞的HBx-EGFP-TLM能够发挥转录激活活性,为HBx功能的深入研究奠定了基础。
- 史晓燕张莹莹周晓巍陆健昇郭泽坤黄培堂
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒X蛋白
- 雷公藤组培产物中雷公藤甲素和总生物碱含量的测定被引量：26
- 2009年
- 建立了同一提取物中高效液相色谱法测定雷公藤甲素和紫外分光光度法测定雷公藤总生物碱含量的方法,样品用乙酸乙酯超声提取、过中性氧化铝柱,净化后用45%甲醇溶解,测定雷公藤的根皮、叶、雷公藤组培产物及培养液中雷公藤甲素和雷公藤总生物碱的含量。结果表明,雷公藤甲素的检测范围为1～100μg/mL(R2=0.9999);雷公藤总生物碱在5～100μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.9998);在同一提取液中,雷公藤甲素和雷公藤总生物碱的添加回收率分别为100.5%(RSD=0.63%)和99.8%(RSD=1.22%)。研究结果表明,根愈伤组织中雷公藤甲素含量为根皮粉中的1.25倍,培养液中雷公藤甲素产量占56%,总生物碱产量占65%。每生产1g不定根培养物,雷公藤甲素产量为根皮粉中的10倍,雷公藤总生物碱产量为根皮粉中的2倍。
- 李琰冯俊涛史晓燕吴勇延张兴
- 关键词：雷公藤雷公藤甲素高效液相色谱
- 不同基因型HBx对乙型肝炎病毒复制的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨A、B、C和D四个基因型乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis Bvirus Xprotein,HBx)对乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)复制的影响。方法构建含A、B、C和D四种基因型HBx的真核表达载体和提前终止HBx表达的突变型单倍体HBV表达系统,共转染至人肝肿瘤细胞系HepG2细胞,利用荧光素酶报告系统检测不同基因型HBx对HBV核心启动子的激活作用,利用酶联免疫法(ELISA)检测培养上清中HBV表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的表达情况,利用特异性引物PCR方法检测细胞中HBV前基因组RNA(pgRNA)和总RNA(pgRNA,2.2kb和0.8kbRNA)的转录情况。结果 A、B、C和D四种基因型HBx的表达均可显著激活HBV核心启动子活性,但不同基因型HBx的激活作用不同。除C基因型外,A、B和D三种基因型HBx均可显著增强HBsAg和HBeAg的胞外分泌水平。检测HBV复制中间产物发现,C基因型HBx对HBVpgRNA和总RNA转录水平的影响显著低于A、B和D基因型。结论不同基因型HBx对HBV复制的影响不同,为进一步研究HBV基因型与HBV复制能力以及临床病理表现的关系打下基础。
- 张莹莹史晓燕陆健昇周晓巍黄培堂
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白病毒复制基因型
