周凯松
- 作品数：14 被引量：31H指数：4
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 火茹素的分离纯化及其cDNA免疫学筛选方法的研究
- 金针菇是著名的药食兼用的真菌,近年来从其子实体中分离出多种生物活性物质,火菇素便是其中之一.火菇素是一种具有抗癌活性的典型的食用菌蛋白类药物,由日本人Komatsu N.等(1963)首先从金针菇中分离出来.该文介绍了一...
- 周凯松
- 关键词：火菇素金针菇CDNA表达文库免疫筛选
- 文献传递
- 一种简单高效的食用真菌总RNA提取方法被引量：6
- 2003年
- 以金针菇为材料,建立了一种适合于富含RNase、多酚、多糖和糖蛋白的食用真菌RNA的提取方法,此方法在高浓度变性剂存在的条件下2次用苯酚 氯仿 异戊醇进行抽提去除DNA、蛋白质,并用异丙醇和乙酸钠选择性沉淀RNA、去除多糖,得到完整、均一的RNA样品。
- 周凯松薛久刚常宁陈畅张晗星张长铠
- 关键词：食用菌RNA提取金针菇
- 火菇素cDNA的初步免疫学筛选被引量：1
- 2004年
- 火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白 ,从金针菇中分离纯化火菇素的方法如下 :金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后 ,通过DEAE SephadexA 5 0除去色素和部分杂蛋白 ,最后经CM SephadexC 5 0离子交换柱层析分离 ,得到了电泳均一的纯化蛋白 .以火菇素为抗原制备的抗血清为探针对构建的金针菇cDNA表达文库进行免疫印记筛选 ,对获得的阳性克隆进行PCR、酶切以及在大肠杆菌中诱导表达等初步鉴定 ,为进一步确证、克隆火菇素基因打下了基础 .
- 周凯松薛久刚黄芳张晗星张长铠
- 关键词：火菇素金针菇CDNA免疫筛选
- 金针菇中具抑瘤活性的碱性蛋白火菇素的分离纯化和性质研究(英文)被引量：10
- 2003年
- 目的 对一种具有抑瘤活性的碱性蛋白火菇素进行分离纯化和性质研究。方法 应用硫酸铵、乙醇分级沉淀 ,柱色谱等方法进行分离纯化。电泳分析、氨基酸组成分析、质谱分析等方法被用于火菇素的理化性质研究。结果 火菇素被提纯至电泳纯并结晶。经性质研究确定火菇素的分子量为 19891.13Da ,pI=8.9,λmax=2 76～ 2 78nm ,λmin=2 5 0nm ,并缺少甲硫氨酸。通过基质辅助激光解吸离子化质谱 (MALDI—MS)分析 ,测得了火菇素的指纹图谱 ,表明它为一种新蛋白。结论 火菇素被首次提纯至电泳纯 。
- 陈畅薛久刚周凯松李彦张晗星张长铠
- 关键词：金针菇抑瘤活性纯化
- 用λZAPExpress作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库被引量：4
- 2003年
- 采用QuickPrepmicromRNAPurification试剂盒从新鲜金针菇子实体中快速提取、纯化mRNA,TimeSavercDNASynthesis试剂盒逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加上EcoRⅠ/NotⅠ接头,在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAPExpressPredigestedVector连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coliXL1-BlueMRF捁菇ǔ杀泶颿DNA文库。经检测:文库滴度为4.0×106pfu/ml,文库扩增后,滴度达2.0×1010pfu/ml,重组率为90%,cDNA分子长度在0.3-3.5Kb范围。应用原位免疫杂交,初步筛选出火菇素相关基因的阳性克隆。
- 周凯松常宁彭俊峰张晗星张长铠
- 关键词：滴度重组率免疫筛选金针菇子实体火菇素
- 火菇素提取新工艺及其生物活性测定
- 火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白，从金针菇中分离纯化火菇素的改进工艺为：金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后，通过DEAE-Sephadex A-50除去色素和部分杂蛋白，最后经CM-Sephadex C-...
- 周凯松彭俊峰常宁张晗星官峰张长铠
- 关键词：火菇素离子交换层析生物活性
- 文献传递
- D-核糖提取工艺的研究被引量：5
- 1999年
- 核糖发酵液用饱和醋酸铅除去菌体、杂蛋白，然后通过ＡＢ－８ 树脂进行脱色，脱色液分别经过００１×７，２０１×７ 树脂脱盐后，经过浓缩，于２０１×４ 硼酸型阴离子交换树脂进行分离。以０．０２ ｍ ｏｌ／Ｌ四硼酸钠缓冲液为洗脱液，将其中核糖流分浓缩、加甲醇除去硼酸根后，加乙醇减压浓缩得到白色核糖固体。
- 张燕周凯松王福荣
- 关键词：D-核糖发酵脱色脱盐
- 细胞膜系统的稳定性与植物抗寒性及酵母抗冻性的关系被引量：1
- 2002年
- 研究了细胞膜系统在低温条件下的稳定性对于提高植物的抗寒能力的重要意义,阐明了膜系统的稳定性与植物抗寒性、酵母抗冻性的密切关系,为抗寒剂的研制或相关方面的应用提供了理论基础。
- 常宁周凯松张长铠
- 关键词：植物抗寒性酵母抗冻性
- 真核生物中分离目的基因的方法及研究进展被引量：2
- 2002年
- 介绍了有关在真核生物中分离所要研究的目的基因的主要策略和进展,这些方法包括:物理方法、化学合成法、构建基因cDNA文库、基因扩增技术(PCR、NASBA)和计算机辅助技术等。
- 周凯松常宁彭俊峰张长铠
- 关键词：真核生物目的基因化学合成法基因文库计算机辅助技术
- 火菇素蛋白的免疫印迹检测被引量：3
- 2004年
- 从金针菇子实体浸提液中提取了抗癌活性物质火菇素 ,将纯化的火菇素用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内 ,经数次加强免疫后采血并分离了抗血清 ,并以抗血清为探针建立了火菇素蛋白的免疫印迹法定性检测方法。应用免疫学方法检测金针菇菌丝体和子实体 ,结果显示 ,只在金针菇子实体中发现与火菇素抗体相结合的抗原信号。
- 周凯松吕鹏薛久刚张晗星陈畅张长铠
- 关键词：火菇素金针菇免疫检测
