屈超义 作品数:11 被引量:41 H指数:4 供职机构: 西安市第四医院 更多>> 发文基金: 河南省医学科技创新人才工程项目 河南省杰出人才创新基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
CD105特异性shRNA表达质粒的构建和筛选 被引量:1 2008年 目的:使用Pgenesil-1质粒构建CD105RNA干扰重组体,在激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管模型中,筛选高效抑制CD105基因表达的shRNA。方法:根据CD105基因序列信息设计了3条shRNA以及1条非特异阴性序列,利用含U6启动子的表达质粒Pgene-sil-1构建其RNA干扰重组体。采用视网膜下注射的方法使shRNA表达质粒转染大鼠视网膜和脉络膜,观察质粒所携带绿色荧光蛋白基因表达情况。根据不同的表达质粒对BN大鼠CNV模型2wk时CD105基因mRNA表达的抑制效果与空白对照及仅加转染试剂组比较分析,筛选有效的抑制序列。结果:转染后1d,在荧光显微镜下可见有明显的绿色荧光分布于实验眼视网膜全层,包括RPE层。2~3wk荧光强度比1wk增强,并持续表达4wk。空白对照眼无绿色荧光表达。构建了3条CD105shRNA和阳性对照Pgenesil—HK,基因测序证实目的序列成功插入质粒Pgenesil-1中。研究发现不同的质粒转染后对CD105在CNV高峰期的表达干预效果不同。Pgenesil-eng2和Pgenesil-eng3可明显抑制CNV模型在2wk时CD105mRNA的表达,抑制效率分别为(78±5)%(P〈0.01);(52±3)%(P〈0.01)。转染Pgenesil-engl,Pgenesil-HK组及仅加转染试剂组与空白对照组相比CD105mRNA表达水平无明显变化。结论:在阳离子脂质体辅助下,Pgenesil-1质粒可以成功地将目的基因转染至大鼠视网膜各层次,且表达强度高,时间长于4wk。Pgenesil-eng2能明显抑制BN大鼠视网膜组织CD105mRNA的表达。 屈超义 唐罗生 曾杰西 陈百华 罗静 魏为 王文军关键词:CD105 质粒 短发夹RNA RNA干扰 脉络膜新生血管 多重PCR对真菌性角膜炎主要致病菌的菌属鉴定 被引量:7 2007年 目的:建立多重PCR体系对真菌性角膜炎主要致病真菌进行快速诊断并同时进行菌属鉴定的方法。方法:建立两个多重PCR体系(体系1和体系2),对真菌性角膜炎九种主要致病真菌DNA进行检测,观察该体系对真菌临床菌株、人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的检测结果。结果:体系1对镰孢菌属扩增均产生约360bp的特异产物,对曲霉菌属、牵连青霉菌和新月弯孢菌扩增均产生约470bp的特异产物。体系2对镰孢菌属、曲霉菌属均无特异产物,而对牵连青霉菌产生了360bp的特异产物,对新月弯孢霉产生了300bp的特异产物。根据DNA模板在两个多重PCR体系中扩增出的不同特异条带可将九种真菌分为四个菌属。57株真菌临床菌株中55株的鉴定结果与常规鉴定结果一致。两体系对人类基因组及其他眼部常见致病微生物DNA的扩增结果均为阴性。结论:通过两个多重PCR体系检测可将真菌性角膜炎在菌属水平进行诊断及鉴定。该方法具有快速、简便、特异、灵敏的特点,具有较好的临床应用前景。 屈超义 闫元奎 王丽娅 孙声桃 杨潇远 李振勇 唐罗生关键词:眼感染 角膜 多重聚合酶链反应 卵磷脂络合碘合并视网膜光凝治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效观察 被引量:2 2008年 目的:观察卵磷脂络合碘对糖尿病视网膜病变引起的玻璃体积血、混浊的治疗效果。方法:本研究选用的病例为2005年1~8月到中南大学湘雅二医院门诊就诊的37名(51眼)糖尿病视网膜病变的患者,使用卵磷脂络合碘(1.5mg/片)的片剂,3次/日,2片/次,对病情严重者行全视网膜光凝配合药物进行治疗。服用时间最长3个月,最短2周。观察时间为2周~3个月。结果;治疗2周后视力提高2行及其以上者5眼,占9.8%(5/51);1月后玻璃体积血明显减少或眼底能见度明显提高并能行荧光素限底血管造影(FFA)检查以及激光治疗的有27眼,占52.9%(27/51);2月后玻璃体积血明显减少或眼底能见度明显提高并能行FFA检查以及激光治疗的达到42眼,占82.3%(42/51);51眼内玻璃体混浊等级下降Ⅰ级以上45眼,总有效率为88.2%(45/51),无明显效果有6眼,占11.8%(6/ 51)。结论:卵磷脂络合碘是一种有效的治疗由糖尿病视网膜病变引起玻璃体积血、混浊的药物。 符敏 唐罗生 陆晓和 杨艳芳 屈超义关键词:卵磷脂络合碘 视网膜光凝 糖尿病视网膜病变 真菌性角膜病常见致病菌属种快速鉴定体系的构建 王丽娅 张英朗 李振勇 李智涛 杨潇远 杨子建 屈超义 王云龙 孙声桃 在本课题的实验研究中,根据角膜真菌感染常见致病菌种的调查,筛选出镰刀、曲霉、青霉、弯孢4种菌属的特异性引物,利用4对引物建立了两个多重 PCR扩增体系,根据DNA模板在两个多重PCR体系中扩增出的不同特异条带进行菌属鉴定...关键词:关键词:真菌性角膜病 CD105 shRNA对激光诱导的脉络膜新生血管的干预作用及其机制 被引量:2 2011年 目的:观察CD105shRNA对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:40只BN大鼠单眼采用半导体激光建立CNV模型。随机取20只大鼠于建模后1天使用Pgenesil-eng2转染大鼠视网膜和脉络膜作为实验组。在建模后第14天行FFA检查,观察实验组与对照组视网膜激光斑的渗漏情况。各取5只实验组和5只对照组大鼠,行脉络膜铺片,检测并比较脉络膜新生血管渗漏面积。另32只BN大鼠任取一眼建立CNV模型,其中任取20只大鼠于建模后次日进行Pgen-esil-eng2转染,作为实验组。12只建模眼作为对照组,未建模眼作为空白对照组。于基因转染后1w,2w,3w和4w各取5只实验组大鼠和3只对照组大鼠眼球,获取每个时间点实验组、对照组和空白对照组的脉络膜组织。检测各组每个时间点CD105和VEGF在mRNA水平的表达。结果:FFA显示光凝后第14天时,对照组的渗漏率为63.2%,实验组为24.6%。实验组的BN大鼠眼底渗漏点数较对照组少,渗漏强度较弱。两组间比较有显著性差异。脉络膜铺片结果显示:2周时对照组大鼠的CNV面积为(31.22±1.46)×103μm2,实验组大鼠的CNV渗漏面积为(14.46±0.82)×103μm2,两组间比较有显著性差异。RT-PCR结果显示:实验组VEGF mRNA及CD105 mRNA的表达变化规律与对照组相似,但各个时间点的表达量较对照组均明显下降,其中实验组VEGFmRNA于2w时的表达约为对照组的36.7%;实验组CD105 mRNA在第2w时约为对照组的21.68%。结论:通过沉默CD105基因的表达可以抑制大鼠CNV的生成,下调VEGF的表达可能是其作用机制之一。CD105基因有望成为CNV的基础研究热点和临床治疗的新靶点。 屈超义 屈超义 唐罗生 曾杰西 罗静 陈百华关键词:脉络膜新生血管 CD105 RNAI CD105基因沉默对BN大鼠脉络膜新生血管形成的影响 研究背景
脉络膜新生血管/(Choroidal Neovascularization,CNV/)也称视网膜下新生血管,是由多种病因所致的脉络膜新生血管芽穿越bruch膜并在视网膜色素上皮下和//或上增殖形成的纤... 屈超义关键词:脉络膜新生血管 SIRNA CD105 文献传递 角膜炎常见致病真菌DNA快速提取方法的探索 被引量:12 2005年 杨潇远 王丽娅 李振勇 李智涛 屈超义 孙声桃关键词:真菌性角膜炎 DNA提取 致病真菌 病原体检测 真菌细胞壁 雷珠单抗与阿柏西普玻璃体腔注射治疗渗出性年龄相关性黄斑变性的疗效观察 被引量:6 2019年 目的:探究雷珠单抗与阿柏西普玻璃体腔注射治疗渗出性年龄相关性黄斑变性的临床疗效与安全性。方法:选取2015年5月~2018年5月我院收治的渗出性年龄相关性黄斑变性患者98例(98眼),采用随机数字表法将患者分为两组,A组玻璃体腔内缓慢注射0.05 m L(0.5 mg)雷珠单抗注射液,B组玻璃体腔内缓慢注射0.05 m L(2 mg)阿柏西普注射液。比较两组患者的视力改善情况、眼动脉血流动力学、黄斑中心凹视网膜厚度及不良反应的发生情况。结果:治疗前两组患者的视力比较无统计学差异(P>0.05),治疗后,B组视力显著高于A组(P<0.05);。两组患者治疗前后眼动脉血流动力学相关指标比较均无统计学差异(P>0.05)。;两组患者治疗后的黄斑中心凹视网膜厚度均显著降低,且治疗3个月B组治疗3个月显著低于A组(P<0.05);B组患者注射药物后结膜下大出血发生率显著低于A组(P<0.05)。结论:阿柏西普可显著改善渗出性年龄相关性黄斑变性患者的视力,且安全性高,可能与其可显著改善患者的黄斑中心凹视网膜厚度有关,且不良反应发生率低,安全性好。 龚珂 张妍春 孙文涛 屈超义 雷春灵关键词:玻璃体腔注射 渗出性年龄相关性黄斑变性 平均血小板容积与糖尿病视网膜病变严重程度的横断面研究 被引量:3 2014年 目的评估平均血小板容积(mean platelet volume,MPV)与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)严重程度的关系。方法横断面研究。选取所有于2012年1月至2013年12月在我院眼科中心住院的DR患者137例(非增殖期67例,增殖期70例),同时选取72例无DR糖尿病患者和70例无糖尿病健康人群进行对照。收集人口学资料及疾病史,抽空腹血行MPV和血小板计数等检查。结果健康对照组人群MPV水平[7.2(5.6-9.9)fL]显著低于糖尿病各组(均为P<0.05),且随DR病变分级的增加,MPV水平显著增加,分别为7.8(5.7-10.1)fL、8.3(5.5-11.0)fL和8.9(5.9-12.5)fL,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Logistic回归分析显示,随着MPV水平升高,非增殖期(OR:1.382;95%CI:1.280-1.484)和增殖期DR(OR:1.481;95%CI:1.370-1.592)的患病风险显著增加(均为P<0.001)。结论 MPV水平随DR严重程度增加而升高;随着MPV水平升高,非增殖期和增殖期DR患病风险增加。 李海燕 毕春潮 屈超义关键词:糖尿病视网膜病变 平均血小板容积 眼轴与糖尿病性视网膜病变的关系 目的:评价眼轴与糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy,DR)程度的关系,并探讨其临床意义.方法:按照屈光不正程度将2型糖尿病病人的160只眼分为3组:眼轴<24mm(87只眼),24.1mm~... 屈超义 王建洲