张开玉
- 作品数:3 被引量:19H指数:2
- 供职机构:南京农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家科技支撑计划国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水稻条纹病毒编码蛋白在灰飞虱体内的检测及其与CP体外结合研究被引量:11
- 2008年
- 【目的】检测灰飞虱体内由水稻条纹病毒(RSV)编码的外壳蛋白(CP)、病害特异性蛋白(SP),以及非结构蛋白NS2、NS3和NSvc4等5种蛋白以及病毒粒子CP与SP、NS2、NS3、NSvc4的体外结合,为进一步研究水稻条纹病毒与其介体昆虫互作提供有用信息。【方法】提取高带毒灰飞虱(Q家系)总蛋白,用免疫方法检测昆虫体内CP、SP、NS2、NS3和NSvc4等5种重要蛋白的表达以及病毒粒子CP与SP、NS2、NS3、NSvc4的体外结合情况。【结果】结果表明在带毒灰飞虱体内以上5种蛋白都能检测到,而且CP含量最高,NSvc4、SP、NS3、NS2含量依次降低;用体外原核表达后纯化的蛋白进行了RSV粒子CP与SP、NS2、NS3、NSvc4的体外结合实验,实验结果表明病毒粒子CP与SP、NSvc4之间存在体外结合关系。【结论】检测结果为灰飞虱作为RSV的昆虫寄主并且可以在其体内增殖的结论提供了支持,表达差异表明病毒编码蛋白在介体灰飞虱体内可能存在着一定的协调关系;病毒粒子与SP的结合为前人关于CP与SP可能共同作用于叶绿体进而影响症状的严重度的报道又提供了一个新的证据,病毒粒子与NSvc4之间存在体外结合关系,也为NSvc4可能作为运动蛋白通过与CP的互作以及诱导病毒在胞间运动需要CP的辅助提供了佐证。
- 张开玉熊如意吴建祥周雪平周益军
- 关键词:灰飞虱水稻条纹病毒体外结合
- 灰飞虱体内水稻条纹病毒的检测被引量:7
- 2008年
- 为评价灰飞虱体内水稻条纹病毒检测方法的适用范围,利用已经制备的水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)的多克隆抗体SV21和单克隆抗体3B9,采用多孔板间接ELISA、DIBA和Western blotting等三种方法进行单头灰飞虱Laodelphax striatellus Fallén(SBPH)体内RSV检测。结果表明,检测灵敏度以多孔板间接ELISA最高,其次为DIBA,Western blotting最低;用单克隆抗体3B9检测灵敏度高于多克隆抗体SV21。RT-PCR、IC-RT-PCR和DB-RT-PCR三种方法中,RT-PCR对单头灰飞虱稀释到400倍可检测到病毒;IC-RT-PCR在多克隆抗体SV21稀释浓度大于500倍时检测不出RSV,单克隆抗体3B9稀释浓度大于800倍时检测不到RSV;DB-RT-PCR检测结果显示,单头灰飞虱在稀释400倍后均无阳性反应。
- 张开玉熊如意周益军
- 关键词:灰飞虱水稻条纹病毒免疫检测RT-PCR检测
- 灰飞虱体内水稻条纹病毒的检测及传毒相关蛋白的研究
- 水稻条纹病毒(Rice stripe vies,RSV)是纤细病毒属(Tenuivirus)的典型成员,由灰飞虱以持久方式传播(Laodelphax striatell Fallen,),曾分布于我国16个省市,至今仍在...
- 张开玉
- 关键词:灰飞虱水稻条纹病毒
- 文献传递