张蕾
- 作品数：14 被引量：14H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划河南省高校青年骨干教师资助项目中国烟草总公司科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的克隆、序列分析及表达载体构建被引量：1
- 2010年
- 【目的】克隆鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pET/DuMHC-Ⅰ。【方法】依据GenBank/DDBJ/EMBL基因库中公布的鸭MHC-Ⅰ基因序列设计1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中扩增MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因cDNA,T-A克隆到pGEM-T Easy载体中,并进行测序。通过PCR和酶切的方法,将鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因亚克隆入pET-28a(+)载体,构建重组表达质粒pET/Du MHC-Ⅰ,并进行PCR、NcoⅠ和NotⅠ双酶切及测序鉴定。【结果】测序结果表明,获得了MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因,其长度为813 bp,编码271个氨基酸。MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因与GenBank中登录的鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因序列的同源性为89.4%~91.7%,氨基酸同源性为78.2%~83.7%;与鸡、鹅、鹌鹑、草鱼、狗、猪、鼠和人的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽氨基酸序列的同源性分别为64.6%,79.3%,59.4%,41.0%,26.6%,45.0%,12.5%和22.1%,这表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种属多样性,且...
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- 关键词：原核表达载体
- 烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenee）滞育激素基因的时空表达
- 在室内人工的滞育诱导条件下,从卵期开始诱导烟夜蛾滞育.以蜕皮次数为标准对烟夜蛾的幼虫进行龄次划分.取不同龄次烟夜蛾幼虫及滞育蛹的头胸部提取总RNA,以其为模板合成第一链cDNA.为了取得较好的实验结果,依照Geneban...
- 张蕾
- 关键词：烟夜蛾滞育
- 文献传递
- 鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因的克隆与分子进化分析
- 2009年
- 根据GenBank中登录（登录号：AB115244）的鸭MHC-Ⅰα链序列设计并合成1对引物,采用RT-PCR技术从鸳鸯鸭脾脏组织中克隆出鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因,并进行T-A克隆和序列测定。结果表明,所获得的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因长909bp,编码303个氨基酸的多肽,含一个完整的鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因。序列比较发现,鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链基因与GenBank登录的其它品种的鸭MHC-Ⅰα链核苷酸同源性为89.4%～91.0%,与人和其他动物的MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的氨基酸同源性为11.1%～79.3%,表明MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因存在着种的多样性,且亲缘关系越近,同源性越高。鸳鸯鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的成功克隆为进一步研究鸭MHC-Ⅰ基因表达、生物学活性和应用奠定基础。
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- 关键词：鸳鸯鸭克隆
- 甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)自然种群与抗拟除虫菊酯有关的L1014F突变的发现被引量：3
- 2002年
- 应用PCR扩增技术 ,克隆了甜菜夜蛾 (Spodopteraexigua)自然种群的部分钠离子通道基因片段 ,并对其进行了测序 .后将推断的氨基酸序列与其它敏感昆虫的相应序列进行了比较 ,发现在钠离子通道ⅡS6的 10 14同源位点上存在Leu(CTT)→Phe(TTT)点突变 ,表明该种群的抗药性可能与击倒抗性 (kdr)
- 纠敏安世恒张国彦张蕾郭线茹马继盛
- 关键词：甜菜夜蛾自然种群除虫菊酯钠离子通道抗药性
- 烟夜蛾(Helicoverpa assulta Guenée)滞育激素基因时空表达的研究被引量：7
- 2004年
- 利用RT PCR法,在转录水平上对烟夜蛾滞育激素(Diapausehormone,DH)基因的时空表达进行了研究.结果表明,该基因在滞育诱导条件下饲养的烟夜蛾3,4,5,6龄幼虫及滞育蛹中表达,在已解除滞育的蛹体内该基因同样表达.但在正常条件下饲养的烟夜蛾幼虫及非滞育蛹虫体中未见表达.对烟夜蛾滞育蛹脑部、胸部、腹部的RT PCR检测表明,脑部为DH基因的表达部位.
- 张蕾杨效文丁矛郭线茹马继盛
- 关键词：烟夜蛾滞育滞育激素
- 烟夜蛾（Helicoverpa assulta Guenée）滞育激素基因的时空表达
- 在室内人工的滞育诱导条件下，从卵期开始诱导烟夜蛾滞育。以蜕皮次数为标准对烟夜蛾的幼虫进行龄次划分。取不同龄次烟夜蛾幼虫及滞育蛹的头胸部提取总RNA，以其为模板合成第一链cDNA。为了取得较好的实验结果，依照Geneban...
- 张蕾
- 文献传递
- HLA-A胞外区成熟肽基因的克隆及其原核表达载体的构建
- 2009年
- 根据GenBank基因库中HLA-A胞外区成熟肽基因序列设计2对引物,用RT-PCR法从健康人血液中扩增HLA-A胞外区基因,扩增产物进行T-A克隆、测序.结果表明,获得的HLA-A胞外区基因大小为819bp,与模板序列的同源性为96%.利用基因重组技术,将HLA-A胞外区基因亚克隆入pET-21a(+)载体中.经PCR、酶切和测序鉴定,证实所获重组表达质粒pET–21/HLA-A中含有目的片段,且连接、构建正确,表明成功构建了重组表达质粒pET–21/HLA-A.
- 张蕾李新生崔保安陈红英孙凯宋亚鹏
- 关键词：成熟肽基因克隆原核表达
- 贵宾犬α-干扰素基因的扩增、克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 参照基因库中收录的犬α-干扰素基因序列设计1对引物,应用PCR技术直接从贵宾犬肝组织基因组DNA中扩增IFN-α基因,将回收得到的特异性片段克隆于pGEM-T Easy载体中,转化感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选,质粒PCR鉴定及酶切鉴定筛选阳性重组质粒,测定其核苷酸序列。测序结果表明,贵宾犬α-干扰素基因全长为564 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码187个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有3个潜在的N-糖基化位点,有10个与二硫键形成有关的半胱氨酸。用DNAStar软件将所得序列与人和其他种动物的IFN-α基因进行核苷酸及氨基酸同源性比较,并通过绘制系统进化树可知,IFN-α基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。
- 宋亚鹏陈红英崔保安贾艳艳郭显坡张蕾
- 关键词：IFN-Α扩增基因克隆
- 人β2微球蛋白成熟肽基因克隆及其原核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 根据GenBank基因库中人β2微球蛋白(β2m)成熟肽基因序列设计2对引物,使用RT-PCR法从健康人血液中扩增人β2m成熟肽基因,扩增产物进行T-A克隆和测序.结果表明,获得的人β2m成熟肽基因为297 bp,与模板序列的同源性为100%.利用基因重组技术,将β2m成熟肽基因亚克隆入pET-28 a(+)载体中,经PCR、酶切和测序鉴定,证实所获重组表达质粒pET-28/Humβ2m中含有目的片段,且连接、构建正确,表明成功构建了重组表达质粒pET-28/Humβ2m.
- 张蕾李新生崔保安陈红英魏战勇孙凯宋亚鹏阮武营
- 关键词：原核表达载体成熟肽重组表达质粒四聚体
- 白来航鸡MHC-Ⅰ重链基因克隆与序列分析
- 2010年
- 参照GenBank发表的鸡MHC-Ⅰ重链（BF2）基因序列,设计并合成1对引物,无菌采取纯系来航SPF鸡抗凝静脉血,直接提取总RNA,采用RT-PCR技术,PCR扩增BF2基因,并进行克隆和序列测定。测序结果表明,获得了来航鸡BF2基因,其大小为1 035 bp,包含一个完整阅读框,共编码345个氨基酸。与GenBank上鸡BF2基因序列进行比较,其核苷酸同源性在93.0%~97.6%之间,氨基酸同源性在83.2%~97.1%之间。来航鸡与人和其他种动物的MHC-Ⅰ重链基因核苷酸同源性在12.9%~83.6%之间。
- 宋亚鹏李新生崔保安陈红英魏战勇孙凯张蕾阮武营
- 关键词：白来航鸡克隆
