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猪诱导多能性干细胞无饲养层及无血清培养获取体系: 本研究以猪的脂肪干细胞(ADSCs)为源头细胞开展重编程，并建立无饲养层、无血清培养猪iPSCs诱导获取体系，从源头细胞类型上进一步优化猪的体细胞重编程方案，以获得安全、可靠的iPSCs系，为今后进行iPSCs克隆猪生产...; 张宇魏超张鹏飞李侠李运生张远亮张运海; 关键词：脂肪干细胞无血清培养转录因子; 文献传递

Vc和CHIR-99021对猪体细胞重编程的作用以及转录因子真核表达载体构建: 诱导多能性干细胞(induced pluripotent stemcells，iPSCs)与胚胎干细胞（embryonic stemcells，ESCs）极为相似，不仅可以自我更新（self-renewal），也具有分化...; 张鹏飞; 关键词：家猪诱导多能干细胞转录因子真核表达

小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法: 本发明公开了小鼠脂肪干细胞自发转化的鉴定方法，将小鼠脂肪干细胞在体外连续传代，然后包括形态学的变化、增殖速度的激增、异常染色体的出现和比例的增加、DNA含量的降低以及表面分子的变化五个步骤。其中形态学和增殖速度的观察与检...; 张运海魏超李运生章孝荣方富贵张鹏飞李侠姜少帅韩菲宋丹丹刘通; 文献传递

肿瘤中RIG-Ⅰ依赖性信号通路影响溶瘤性水泡口炎病毒肿瘤治疗效果: 溶瘤病毒疗法是具有广泛应用前景的肿瘤治疗方法之一。当前,多种溶瘤病毒疗法处于实验室研究阶段或发展到临床治疗阶段。溶瘤病毒通过多种途径抑制肿瘤增殖并促进肿瘤细胞死亡,包括溶瘤病毒特异性地在肿瘤细胞中快速扩增并引起肿瘤细胞溶...; 张鹏飞; 关键词：溶瘤病毒水泡性口炎病毒天然免疫

茶叶总黄酮的提取工艺研究被引量：9: 2009年; 黄酮类物质是茶叶的重要组成成分。本试验采用乙醇热提法提取茶叶中黄酮,结合正交试验设计研究时间、温度、乙醇浓度以及固液比4个因素对茶叶黄酮提取得率的影响。结果表明:各个因素对茶叶黄酮提取得率影响的主次顺序为乙醇浓度>固液比>温度>时间,茶叶黄酮的最佳提取条件为提取时间1h、提取温度80℃、乙醇浓度70%、固液比(g/ml)1:20。; 王在贵王磊高丽萍刘朝良方杨武陈睿张鹏飞李四平; 关键词：茶叶黄酮

可溶性Sox2-11R重组蛋白的制备与鉴定: 2014年; 旨在通过原核表达制备可溶性Sox2-11R重组蛋白,并验证其穿膜能力。首先,采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与蛋白转导域11聚精氨酸(11 arginine,11R)的融合表达和与成纤维细胞的共孵育验证11R的穿膜能力。其次,将目的基因Sox2-11R在原核表达载体pET30a中表达,通过优化表达条件获取可溶性Sox2-11R重组蛋白。最后,利用Ni柱纯化重组蛋白,SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定;并用免疫荧光染色验证重组蛋白是否具有进入细胞核的能力。结果表明,成功构建了pET30a-Sox2-11R原核表达载体,纯化的Sox2-11R重组蛋白具有穿膜能力,且在细胞培养基中具有较高溶解度,这为制备其他重编程因子的重组蛋白提供了参考,也为外源蛋白诱导iPSCs奠定了基础。; 李侠姜少帅韩菲张鹏飞张运海; 关键词：SOX2 重组蛋白可溶性

鸡源大肠埃希菌质粒介导的喹诺酮耐药基因的检测与分析被引量：1: 2011年; 为了解安徽省合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)的耐药性及质粒介导的喹诺酮耐药基因(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)的流行情况,对从合肥地区多个规模化养鸡场病鸡病料中分离保存的37株疑似大肠埃希菌进行细菌分离培养、生化编码鉴定和致病性测定。利用K-B纸片琼脂扩散法检测鸡源致病性大肠埃希菌对4种FQs的耐药性,设计并合成4对特异性引物通过菌液PCR法对所分离细菌进行PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA)扩增。结果显示,所检测的37份疑似病料均为致病性大肠埃希菌;37株大肠埃希菌中对FQs呈3耐以上(包括3耐)菌株占67.57%(25/37);37株大肠埃希菌中检测到qnrA基因,检出率为56.77%(21/37),而qnrB、qnrS、qepA基因均未检出。提示合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对FQs耐药性严重,PMQR基因以qnrA基因为主,且qnrA基因的流行与FQs耐药性具有相关性。; 李琳刘星刘松松张鹏飞吴畏杨欢; 关键词：鸡源致病性大肠埃希菌

家蚕肠道枯草杆菌产蛋白酶的发酵条件与酶学性质: 2010年; 肠道微生物分泌的蛋白酶可促进家蚕对桑叶养分的消化吸收,枯草芽孢杆菌是家蚕肠道内一种重要的产蛋白酶菌株。为提高枯草芽孢杆菌蛋白酶的高效利用,对该菌株适宜发酵条件及酶学性质进行了研究。结果表明:各因素对枯草芽孢杆菌产酶活性影响的大小顺序依次为:pH值>培养温度>培养时间>装液量;最适的产酶条件为:pH=7,培养温度:30℃,培养时间:36 h;对枯草芽孢杆菌产蛋白酶进行初步提纯后并研究得出该酶反应的最适pH 10.0,最适反应温度为:60℃;该酶为碱性蛋白酶、不耐高温、不耐酸,但在35℃条件下热稳定性较好。; 王在贵刘朝良杨文静朱保建魏国清方杨武张鹏飞陈睿; 关键词：家蚕肠道枯草杆菌蛋白酶酶学性质

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张鹏飞