徐志伟
- 作品数：23 被引量：44H指数：4
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人趋化因子样因子-1的体内表达对BXSB狼疮鼠发病影响的研究被引量：9
- 2001年
- 目的 初步探讨人趋化因子样因子 1(humanchemokine likefactor 1,hCKLF 1)在系统性红斑狼疮BXSB小鼠发病中的作用。方法 利用肌肉介导的电脉冲转基因技术 ,便重组的真核表达质粒pCDI hCKLF 1在BXSB小鼠体内表达 ,并检测血清中IgM和IgG型抗DNA抗体的水平 ,尿蛋白浓度和血清尿素氮 (BUN)浓度。结果 hCKLF 1的体内表达对雌雄BXSB小鼠IgM和IgG型抗DNA抗体的产生无明显影响 ,但在短时间内显著地促进雄性BXSB小鼠尿蛋白浓度的异常升高 ,加重其肾脏炎症。结论 hCKLF 1可能是参与狼疮肾炎的介质之一 。
- 徐志伟邓鸿业马大龙
- 关键词：系统性红斑狼疮趋化因子狼疮肾炎
- 人胰岛素样生长因子-1的原核表达载体的构建
- 人胰岛素样生长因子—1(hIGF-1)为单链多肽,由70个氨基酸组成,链内有三对二硫键。与前胰岛素原在氨基酸序列上有48%的同源性。hIGF-1的生物学作用广泛。可部分介导生长激素的许多生理效应,有许多胰岛素样效应,有免...
- 徐海燕徐志伟
- 关键词：原核表达载体受体菌
- 文献传递
- 系统性红斑狼疮BXSB小鼠骨髓B细胞系细胞的分化发育被引量：3
- 2000年
- 目的 :研究Yaa基因与骨髓B细胞系细胞的分化发育是否有相互关系。方法 :用Whitlock Witte法从骨髓细胞中培养纯化出B细胞系细胞 ,继而检测B细胞系细胞对脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激后的表型、增殖反应和抗DNA抗体的产生以及对地塞米松诱导后的凋亡情况。结果 :用Whitlock Witte法成功地从骨髓细胞中培养分离出B细胞系细胞。经LPS刺激后 ,雌雄BXSB小鼠B细胞系细胞膜表面CD19抗原和膜表面Ig的分布相似 ,都出现较强的增殖反应和产生IgM类型的抗ssDNA和dsDNA抗体 ,但是对地塞米松诱导的凋亡作用不敏感。结论 :Yaa基因对BXSB小鼠骨髓中B细胞系细胞的分化发育无影响 ,提示Yaa基因仅在外周免疫器官的成熟B细胞中表达活性 ;并且BXSB小鼠骨髓中的自身反应性B细胞系细胞未被删除 ,可能是产生自身抗体的内在原因之一。
- 徐志伟邓鸿业邓玉兰丁桂凤
- 关键词：系统性红斑狼疮BXSB骨髓细胞B细胞发育
- 狼疮性BXSB小鼠脾脏淋巴细胞增殖与凋亡的初步分析被引量：6
- 2002年
- 为了比较全面准确地了解系统性红斑狼疮 (SLE )BXSB小鼠的发病过程中 ,淋巴细胞增殖与凋亡的动力学变化及其机制。采用细胞双色荧光染色的标记技术 ,检测了脾脏淋巴细胞中的增殖细胞和凋亡细胞的百分率 ,并且测定了巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力。结果发现 ,发病的雄性BXSB小鼠和雌性BXSB小鼠脾脏中增殖的CD4 + T淋巴细胞和B淋巴细胞百分率显著高于对照C5 7小鼠 ,而凋亡的B淋巴细胞的百分率显著低于对照C5 7小鼠 ;但是 ,雌雄BXSB小鼠和对照C5 7小鼠巨噬细胞吞噬凋亡细胞的吞噬指数相同。本研究结果表明 ,在BXSB小鼠的SLE发病过程中 ,淋巴细胞的增殖速度异常升高、而凋亡速度下降 ,可能与其脾脏肿大有关 ;而且淋巴细胞的增殖与凋亡的失衡与巨噬细胞的功能无关 ,可能与淋巴细胞内在的异常有关。
- 徐志伟吴国庆苗乃法魏兵邓鸿业
- 关键词：系统性红斑狼疮BXSB小鼠淋巴细胞增殖凋亡
- 单链DNA特异性单克隆抗体的制备及其在细胞凋亡检测中的初步应用
- 为了制备抗单链DNA单克隆抗体,建立检测细胞凋亡的新方法,采用杂交瘤细胞融合技术,筛选分泌抗单链DNA抗体的单克隆杂交瘤细胞株,用斑点印迹和竞争ELISA法鉴定单抗的特异性,进而结合免疫组织化学和免疫荧光方法用于检测凋亡...
- 徐志伟吴国庆李少华冯永堂苗乃法李在连
- 关键词：细胞凋亡检测单克隆抗体特异性DNA
- 文献传递
- 免疫调节的一些新机制被引量：11
- 1997年
- 在免疫应答过程中，受抗原刺激而活化的T，B细胞不仅增殖分化，发挥效应功能，同时表达的膜蛋白质CD95L，CTLA-4等或分泌的细胞因子TNF，LT，TGF-β等反而诱导活化的T，B细胞“凋亡”或功能的神创，进而对免疫应各进行负调节，以此维持机体的生理平衡和内环境的稳定。在这方面的研究丰富了人们对免疫调节机制的认识。
- 徐志伟
- 关键词：膜蛋白细胞因子免疫调节
- 人胰岛素样生长因子1的真核细胞表达及其鉴定被引量：2
- 2001年
- 目的构建人胰岛素样生长因子 1(IGF- 1)的真核细胞表达质粒。方法用 PCR方法从人的肝细胞 c DNA文库中克隆出 IGF- 1c DNA,然后定向插入真核细胞表达载体 pc DNA3中 ,并用脂质体方法转染 COS7细胞。用 EL ISA法和人胚肺纤维母细胞以及 NIH3T3纤维细胞增殖法分别测定转染细胞上清液中 IGF- 1的含量和生物活性。结果重组的真核细胞表达质粒 pc DNA 3- IGF- 1所含的 IGF- 1c DNA序列和插入方向均正确 ,其转染的 COS7细胞分泌较高浓度的 IGF- 1,并且具有明显促进纤维细胞增殖的能力。结论本实验所构建的重组真核细胞表达质粒 pc DNA3- IGF- 1能够高效表达有活性的 IGF- 1,对进一步研究 IGF-
- 徐志伟娄亚欣李莹邓鸿业邓玉兰
- 关键词：人胰岛素样生长因子1基因重组真核细胞表达活性鉴定
- 抗BrdU单克隆抗体在凋亡细胞检测中的应用研究被引量：1
- 2002年
- 目的探讨将自制的抗ＢｒｄＵ 单克隆抗体（ｍＡｂ）用于ＴＵＮＥＬ法检测凋亡细胞的可能性。方法分别用ＴＵＮＥＬ免疫荧光法和免疫组化技术，检测地塞米松诱导的凋亡胸腺细胞和射线照射的大鼠皮肤组织中的凋亡细胞。结果用ＴＵＮＥＬ免疫荧光法和ＴＵＮＥＬ免疫组化法法检测发现，凋亡细胞的细胞核分别呈明显的荧光或酶底物着色，而非凋亡细胞不显示荧光或无酶底物着色。结论该抗ＢｒｄＵ ｍＡｂ用于ＴＵＮＥＬ法，能够检测单个细胞标本或组织切片中的凋亡细胞，为国内开展凋亡细胞的检测，提供了一种新的方法。
- 徐志伟吴国庆李少华苗乃法魏兵冯永堂邓鸿业
- 关键词：MAB细胞凋亡单克隆抗体
- 小鼠Skint6基因突变对脾脏淋巴细胞亚群的影响
- 2022年
- 目的:制备Skint6基因突变小鼠模型,探究Skint6基因突变对小鼠脾脏各淋巴细胞亚群的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术定点突变小鼠Skint6基因,高分辨率熔解曲线(HRM)和DNA测序鉴定Skint6基因突变小鼠(B6-Skint6^(M));取6月龄B6-WT小鼠和B6-Skint6^(M)小鼠,qRT-PCR检测小鼠皮肤Skint6基因mRNA水平,考马斯亮蓝G-250法测定小鼠尿蛋白水平;计算小鼠体质量、脾脏指数和总细胞数并通过流式细胞术(FACS)检测其脾脏中各淋巴细胞亚群比例并计算细胞绝对数。结果:DNA测序结果显示B6-Skint6^(M)小鼠模型制备成功;qRT-PCR结果表明Skint6基因突变不影响皮肤Skint6 mRNA表达。B6-Skint6^(M)小鼠尿蛋白含量明显高于B6-WT小鼠(P<0.05)。Skint6基因突变对小鼠体质量、脾脏指数无显著影响(P>0.05)。FACS结果表明,与B6-WT组小鼠相比,B6-Skint6^(M)小鼠脾脏细胞数及淋巴细胞数明显增多(P<0.01);CD3^(+)T细胞比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05),CD19^(+)B细胞比例下降(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中CD8^(+)T细胞比例降低(P<0.01),双阴性T细胞(DNeg)比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05);CD4^(+)CD69^(+)活化T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05,P<0.01),CD4^(+)CD44^(hi)T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.01);Treg比例及细胞绝对数明显下降(P<0.001);Tfh细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05);Breg比例及细胞绝对数上升(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中非典型CD3^(+)B220^(+)T细胞比例及其细胞绝对数增高(P<0.001)。结论:Skint6基因突变不影响皮肤中Skint6 mRNA表达,但可影响小鼠脾脏淋巴细胞亚群比例、细胞绝对数和活化状态,从而引起小鼠免疫功能紊乱。
- 王惠战倩穆高航李秀峰王艺璇徐志伟鞠吉雨
- 关键词：系统性红斑狼疮淋巴细胞亚群
- 突变基因Nasp在狼疮性模型小鼠自身免疫病发病中的作用及机制
- 本发明公开了突变基因Nasp在狼疮性模型小鼠自身免疫病发病中的作用及机制，用基因重组技术来表达和纯化正常的Nasp蛋白质和突变的Nasp蛋白质。然后采用表面等离子共振技术(surface plasmon resonanc...
- 鞠吉雨徐志伟
- 文献传递
