朱柏芳
- 作品数:4 被引量:32H指数:2
- 供职机构:江西师范大学生命科学学院江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室更多>>
- 发文基金:江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 穗花杉ISSR引物反应条件的优化与筛选被引量:25
- 2006年
- 在研究穗花杉(Amentotaxus aragotaenia)的遗传多样性过程中,为了获得清晰、重复性好ISSR扩增结果,对影响ISSR-PCR的多个因素包括模板浓度、Taq酶的选择和用量、Mg^2+和dNTPs浓度及退火温度等指标等进行了筛选和优化,确定了穗花杉ISSRPCR分析的最适扩增条件:20μL PCR反应体系中,2μL 10×Taq酶配套缓冲液,1.8UTaq聚合酶(上海生工公司),0.2μmol·L^-1引物,0.18mmol·L^-1 dNTP,1.5~2.5mmol·L^-1 MgCl2,10ng·μL^-1模板DNA。用来自不同居群7个个体,以100个ISSR引物进行PCR扩增,筛选出扩增效果较好的10个引物。得到了92个位点,其中45个多态性位点,多态性位点比例为49%。
- 朱柏芳朱笃邓荣根李思光
- 关键词:ISSR引物筛选穗花杉
- 江西穗花杉自然居群遗传多样性的ISSR分析被引量:5
- 2008年
- 采用ISSR分子标记技术对江西5个自然穗花杉居群的遗传多样性水平和居群遗传结构进行了研究。用10个引物对5个居群58个样品进行扩增,共得到61条清晰的扩增带。在物种水平上,多态性百分率(PPB)83.61%,Nei’s基因多样性指数(H)为0.3146,Shannon’s信息多样性指数(HO)为0.4654。在居群水平上,多态性位点百分率在54.10%~72.13%之间,Nei’s基因多样性指数为0.1561~0.2809,Shannon’s信息多样性指数为0.2276~0.4105。大西坑(DK)和小西坑(XK)两个居群的遗传多样性水平较高,西平(XP)和明月山(MY)居群遗传多样性水平较低。居群间产生了较大的遗传分化(Gst=0.2710,Фst=26.62%)。由UPGMA聚类分析可知,大西坑和小西坑两个居群优先聚类,西平和遂川聚为一支,居群的亲缘关系与地理距离有一定相关性。鉴于穗花杉对生境改变适应性差和对人为干扰敏感,群落稳定性在穗花杉居群遗传多样性保护中的特殊地位,建议把大西坑(DK)和小西坑(XK)居群划入官山自然保护区核心保护范围,对其生存空间进行长期、有效的保护。另一方面,在居群间进行植株和幼苗的相互移栽,以提高居群间基因交流,以最大限度保护穗花杉的遗传多样性。
- 李艳朱柏芳江玉梅鲁顺保朱笃
- 关键词:穗花杉ISSR
- 中国特有濒危植物穗花杉的遗传多样性分析及其保育
- 从7个天然居群(井冈山西平、井冈山和遂川交界处、铜鼓龙门、宜丰官山大西坑、小西坑、宜春明月山和军峰山)和一个栽培居群(庐山居群)采集穗花杉样本,以改良CTAB法从穗花杉叶片中制备模板DNA,优化了PCR循环参数,建立了R...
- 朱柏芳
- 关键词:穗花杉濒危植物
- 文献传递
- RAPD法研究穗花杉遗传多样性的反应条件优化被引量:1
- 2005年
- 以改进CTAB法抽提的中国特有濒危植物穗花杉嫩叶总DNA为模板,进行随机扩增多态性DNA(RAPD)最佳条件优化,结果表明:RAPD分析最佳反应体系为10×Buffer缓冲液2μL,模板70ng,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.2mmol/L,引物0.60μmol/L,Taq酶1.5U,PCR反应体积为20μL.最佳扩增程序为94℃5min,1个循环;94℃1min、37℃1min、72℃2min,40个循环;72℃10min,1个循环.
- 朱柏芳朱笃李思光刘如龙邓荣根
- 关键词:穗花杉随机扩增多态性最佳反应体系MG^2+总DNAMOL