李惠侠
- 作品数：74 被引量：245H指数：9
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b-RAD基因分型和分析方法
- 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b‑RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Lo...
- 蔡亚非杨帆李君陈芳慧李莲李惠侠王根林韩兆玉马腾月吕成龙
- 高通量测序分析热应激荷斯坦奶牛血清差异表达microRNAs
- MicroRNAs (miRNAs)是一种单链的非编码的RNA,在畜禽的生长、发育过程中发挥着重要的调节功能。然而mi RNAs的差异表达以及这些mi RNAs在荷斯坦奶牛机体中的作用尚不清楚。我们通过高通量测序和生物信...
- 陈坤琳郑月李惠侠王根林
- 关键词：热应激MICRORNAS靶基因奶牛
- 文献传递
- 奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs88640083及2b-RAD基因分型和分析方法
- 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs88640083及2b‑RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Lo...
- 蔡亚非杨帆李君陈芳慧江孝俊袁露马腾月吕成龙李莲李惠侠王根林韩兆玉
- 一种哺乳动物肌内脂肪细胞和骨骼肌细胞分层共培养方法
- 本发明公开了一种哺乳动物肌内脂肪细胞和骨骼肌细胞分层共培养方法。采取屠宰后动物背最长肌组织，冲洗剪碎后Ⅰ型胶原酶消化，消化后的混和液过筛；收集滤液，离心，分别收集上层成熟脂肪细胞液和下层肌细胞，分别加适量无血清培养基稀释...
- 李惠侠周光宏
- 文献传递
- Chemerin调控牛肌内成熟脂肪细胞脂解作用机制研究
- 本研究旨在分析脂肪自分泌因子Chemerin在牛肌内成熟脂肪细胞脂解中的作用及调控相关机制.体外培养牛肌内成熟脂肪细胞.采用油红O染色与抽提法检测成熟脂肪细胞脂解过程中脂肪含量变化;通过比色法测定细胞中甘油及游离脂肪酸的...
- 付园园陈坤琳王振云李惠侠
- 一种用于维持脂肪间充质干细胞功能的改良增殖培养基
- 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基，即脂肪间充质干细胞的体外扩大培养的改良培养基。改良后的培养基为添加bFGF的生长培养基，采用此改良培养基培养15天获得的细胞总数是对照生长培养基中获得的细胞总数的...
- 周光宏宋文娟李惠侠丁世杰刘裴裴
- 文献传递
- Wnt/β-catenin信号通路在猪脂肪组织发育及ADSCs成脂分化中的作用
- ＜正＞引言脂肪组织主要由脂肪细胞组成,而脂肪细胞过度分化是导致体脂过度沉积、肉质下降的直接原因,因此,探讨该过程的分子机理对明确肉用家畜脂肪沉积机制具有极为重要的意义。Wnt/β-catenin是新发现的调控脂肪
- 罗肖李惠侠杨映娟刘荣鑫杨公社
- 关键词：脂肪间充质干细胞WNT/Β-CATENIN信号通路分化
- 文献传递
- 利用胞嘧啶碱基编辑器高效制备奶牛BLG基因敲除胚胎的研究
- 2024年
- [目的]β-乳球蛋白是由BLG基因编码的蛋白质,是牛乳中主要的过敏原。本试验旨在使用优化后的单碱基编辑器(CBE)YE1-BE3-FNLS和YE1-AncBE4max对牛胚胎BLG基因进行单碱基编辑,同时对2种单碱基编辑器在牛胚胎BLG基因敲除效果进行评价。[方法]在奶牛的BLG基因的第一外显子上设计sgRNA序列,通过胞嘧啶碱基编辑器将BLG基因第21位密码子CAG突变为TAG,实现c^(*).61 C>T(p.Q21^(*))的转变,获得终止密码子,使蛋白质翻译提前终止,达到基因敲除的目的。通过体外转录获得sgRNA以及YE1-BE3-FNLS和YE1-AncBE4max的mRNA,显微注射到奶牛胚胎中,收集囊胚,分别检测20枚YE1-BE3-FNLS编辑囊胚和24枚YE1-AncBE4max编辑囊胚,进行胚胎基因组PCR扩增,扩增BLG基因目标序列并进行测序验证编辑效率。根据sgRNA的序列,全基因组选择错配碱基最少的5个潜在脱靶位点进行脱靶检测。[结果]囊胚靶向编辑效率检测结果表明,YE1-AncBE4max对牛胚胎BLG基因的靶向编辑效率为83.3%(20/24)高于YE1-BE3-FNLS的靶向编辑效率60%(12/20),而前者存在较大的编辑窗口(C1-C9),可对sgRNA序列上的多个胞嘧啶进行编辑,后者具有较小的编辑窗口C2-C4;另外,YE1-BE3-FNLS具有较高的靶位点双链编辑效率35%(7/20),而YE1-AncBE4max只有2枚编辑胚胎发生双链编辑,纯合编辑率较低;2种单碱基编辑器制备的编辑胚胎均未出现插入缺失和脱靶效应。[结论]本文使用的2种胞嘧啶碱基编辑器均能高效制备奶牛BLG基因编辑胚胎,为进一步获得BLG基因单碱基敲除奶牛储备技术方法。
- 丁修虎丁强王悦夏淑雯赵芳陈坤琳吴家顺何南仲跻峰王慧利李惠侠
- 关键词：奶牛胚胎
- 脂肪因子Chemerin对牛卵巢颗粒细胞凋亡与自噬的影响被引量：2
- 2019年
- [目的]本试验旨在探讨脂肪因子Chemerin在牛卵巢颗粒细胞凋亡与自噬中的作用。[方法]体外培养牛卵巢颗粒细胞并用重组Chemerin蛋白(0.2μg·mL^(-1))处理24 h,采用流式细胞术和CCK-8检测细胞凋亡,通过免疫荧光检测细胞中活性氧(ROS)含量变化,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;RT-qPCR分析凋亡与自噬相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、P62和Atg7 mRNA表达,Western blot技术检测凋亡与自噬相关蛋白表达情况。[结果]与对照组相比,Chemerin处理卵巢颗粒细胞后,细胞中ROS和MDA含量显著上升(P<0.05),SOD和GSH-px活性极显著降低(P<0.01)。凋亡相关基因Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著升高,P62和Atg7 mRNA等的表达也显著上调(P<0.05)。[结论]Chemerin可通过调控相关基因的表达诱导牛卵巢颗粒细胞凋亡并伴随自噬的发生。
- 段银平薛瑛周爽张敏张宾李惠侠
- 关键词：CHEMERIN自噬凋亡卵巢颗粒细胞
- 基因打靶制备乳腺生物反应器研究进展被引量：1
- 2003年
- 基因打靶技术是建立在胚胎干细胞和同源重组技术之上,可对基因组进行定点修饰的实验方法。用基因打靶技术制备乳腺生物反应器,克服了显微注射法的众多缺陷。本文简述了制备乳腺生物反应器过程中基因打靶的策略、靶细胞、打靶位点及国内外研究进展和展望等。
- 李惠侠杨公社曲鑫建
- 关键词：基因打靶乳腺生物反应器转基因动物显微注射法
