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PAM14缺失突变体在哺乳动物细胞中的表达和定位: 2011年; 目的构建带HA标签(标签序列YPYDVPDYA,源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇)的PAM14缺失突变体PAM14-N和PAM14-C的真核表达载体,将其分别转染至COS7细胞中观察PAM14-N和PAM14-C蛋白在细胞内的定位,并转染至HEK293T细胞检测其是否表达。方法以含人PAM14全长cDNA序列的质粒pACT2-PAM14为模板,PCR法扩增PAM14-N-HA,BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入真核表达载体pCDNA3.1中,同理构建pCDNA3.1-HA-PAM14-C,将重组表达质粒pCDNA3.1-PAM14-N-HA和pCDNA3.1-HA-PAM14-C分别转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位。转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测。结果经测序鉴定,成功构建了真核表达载体pCDNA3.1-PAM14-N-HA和pCDNA3.1-HA-PAM14-C,转染后荧光显微镜观察PAM14-N在COS7细胞中主要定位于细胞核,PAM14-C定位不明显;经Western blot检测PAM14-N在HEK293T细胞中能够有效表达,PAM14-C无表达。结论实验结果确定了PAM14功能最小区域及PAM14-N的定位和表达,为进一步了解PAM14的功能奠定了基础。; 杨军陈应炉汪云飞朱恒锐刘晓颖范礼斌; 关键词：基因表达转染核蛋白类

人cystatinB基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达被引量：2: 2012年; 目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人cystatinB真核表达载体,用其转染COS-7和HEK 293 T细胞观察cystatin B在增殖细胞内的定位;转染HEK 293 T细胞检测其表达。方法设计带FLAG-tag的引物,以人cystatin B全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增cystatin B全长序列,然后插入pCDNA 3中构建pCDNA 3-cystatin B-FLAG(CSTBF)质粒;脂质体法转染至COS-7、HEK 293 T细胞,荧光显微镜下观察其在细胞内定位;转染至HEK 293 T细胞,提取细胞总蛋白进行Western blot。结果正确构建了pCD-NA 3-cystatin B-FLAG质粒;定位实验表明在COS-7和HEK293 T细胞中,cystatin B主要分布在细胞核内,核膜处更集中,胞浆内也有广泛分布;Western blot结果表明该质粒能在细胞中有效表达。结论该研究结果为了解cystatin B在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。; 耿慧武刘君陈应炉杨军刘晓颖范礼斌; 关键词：细胞定位转染免疫荧光

孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp在哺乳细胞株的转染表达与定位被引量：2: 2011年; 目的将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pC-DGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况。方法用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的质粒转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位;转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,利用GFP抗体进行Western blot检测。结果荧光显微镜观察表明,Depp蛋白主要分布在COS7细胞的胞质内,在细胞核周呈斑块状分布,在细胞核未见到明显表达,在HEK293T细胞中能有效表达。结论成功构建pCDGFP-Depp表达载体并确定Depp蛋白在哺乳细胞株中能有效表达。; 陈应炉朱恒锐杨军耿慧武刘君刘晓颖范礼斌; 关键词：转染蜕膜孕酮蛋白质类

PAM14与Sedlin相互作用的进一步研究: 目的:运用酵母双杂交技术研究Sedlin蛋白与PAM14蛋白的相互作用区域;构建PAM14蛋白及PAM14蛋白N端C端缺失突变体和Sedlin蛋白的真核表达载体,共同转染至COS7细胞,分别观察在哺乳动物细胞中的共定位情...; 杨军; 关键词：基因工程酵母双杂交系统转录调控; 文献传递

人源化抗Her2单抗对BT474人乳腺癌细胞的抗癌效应研究被引量：1: 2017年; 目的评价人源化抗Her2单抗(MIL41)注射液体内外对人乳腺癌细胞BT474的抗癌效应。方法流式细胞仪分析人乳腺癌BT474细胞的Her2表达量;采用CCK-8法测定MIL41体外对BT474细胞的增殖抑制效应;用裸鼠皮下移植瘤模型法,评价MIL41的体内抗癌作用。结果流式细胞仪显示BT474细胞为Her2高表达的细胞系;体外实验显示,MIL41对受试细胞的增殖具有良好的抑制作用;体内实验表明,MIL41对裸鼠皮下移植瘤生长具有较强的抑制作用,呈现良好的量效关系,在给药剂量为12mg·kg-1时,瘤重抑制率达到56.3%(P<0.05)。结论人源化抗Her2单抗体内外对人乳腺癌细胞BT474具有良好的抑制作用。; 杨军王珊珊王珊珊杨德宣李琳娜袁守军; 关键词：抗肿瘤

CT-1042抗肿瘤药效学及与姜黄素联合的评价研究: CT-1042（4-乙基-8-氟-4-羟基-9-甲氧基-11-甲基-1,12-二氢-4H-2-氧杂-6,12a-二氮杂-二苯并[b,H]芴-3,13-二酮）是一种小分子化合物，在体外实验中表现出对许多组织来源的肿瘤细胞都...; 杨军; 关键词：姜黄素细胞凋亡线粒体通路; 文献传递

侧卧位直接前入路全髋置换近期临床疗效随访结果: 背景人工全髋置换术(THA)是髋关节疾患终末期有效的治疗手段，传统手术入路有后外侧入路、外侧入路、前外侧入路、大粗隆截骨入路以及Super-path入路，髋关节置换经过经过一百多年来的发展，技术日趋成熟和手术操作的微创化...; 杨军; 关键词：人工全髋置换术

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杨军