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林芳

作品数：47 被引量：114H指数：7
供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 46篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 42篇医药卫生
  • 4篇生物学
  • 3篇文化科学

主题

  • 22篇细胞
  • 13篇基因
  • 12篇病毒
  • 11篇肝炎
  • 11篇肝炎病毒
  • 9篇凋亡
  • 9篇丙型
  • 9篇丙型肝炎
  • 9篇丙型肝炎病毒
  • 8篇癌细胞
  • 8篇表位
  • 7篇真核
  • 7篇抗原
  • 7篇STATHM...
  • 7篇HCV
  • 6篇肿瘤
  • 6篇STATHM...
  • 6篇S抗原
  • 5篇凋亡抑制
  • 5篇病毒样颗粒

机构

  • 45篇第四军医大学...
  • 8篇第四军医大学
  • 1篇西安交通大学...

作者

  • 47篇林芳
  • 43篇张惠中
  • 15篇王希
  • 14篇高萍
  • 12篇董轲
  • 11篇韦三华
  • 10篇李斌
  • 8篇刘丽
  • 7篇沈建军
  • 6篇雷迎峰
  • 6篇龙敏
  • 6篇张利朝
  • 6篇舒放
  • 6篇崔颖
  • 5篇邹爱民
  • 5篇张利军
  • 5篇任继鸿
  • 5篇王晓岩
  • 4篇卫军霞
  • 4篇刘昕阳

传媒

  • 10篇现代肿瘤医学
  • 9篇第四军医大学...
  • 3篇中国生物制品...
  • 2篇中国免疫学杂...
  • 2篇西南国防医药
  • 2篇现代检验医学...
  • 2篇中国科教创新...
  • 1篇临床肝胆病杂...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中国生化药物...
  • 1篇新乡医学院学...
  • 1篇肿瘤防治研究
  • 1篇肿瘤
  • 1篇癌症
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇胃肠病学和肝...
  • 1篇中国药业
  • 1篇现代免疫学
  • 1篇国际病理科学...

年份

  • 2篇2017
  • 6篇2016
  • 4篇2015
  • 2篇2014
  • 3篇2013
  • 3篇2012
  • 3篇2011
  • 2篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 5篇2007
  • 4篇2006
  • 7篇2005
  • 4篇2004
共 47 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
Her2/ECD-sf162/TM融合杆状病毒表达及鉴定被引量：2
2015年
目的:获得融合表达的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒,为后续基于SIV Gag蛋白的Her2病毒样颗粒疫苗的制备奠定实验基础。方法:将Her2胞外段基因与猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)包膜蛋白sf162跨膜区基因融合的Her2/ECD-sf162/TM p Fast Bac重组表达载体,转座大肠杆菌E.coli DH10Bac菌株,获得重组杆粒,在昆虫细胞中表达获得重组杆状病毒,Western blot方法对该病毒进行鉴定。结果:构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒表达载体经PCR鉴定正确,转染昆虫细胞后获得了重组杆状病毒,该融合杆状病毒蛋白可与抗Her2抗体发生免疫反应。结论:成功构建的Her2/ECD-sf162/TM杆状病毒可用于Her2病毒样颗粒疫苗的制备。
李谨革龙敏王希董柯林芳刘冲张惠中
关键词：HER2/NEU胞外区SIV杆状病毒
诱骗寡核苷酸下调MKN-45细胞OP18基因表达及对细胞增殖的影响
2007年
目的:探讨转录因子E2F哑铃形诱骗寡核苷酸(Decoy ODNs)对MKN-45细胞中op18基因转录调控的影响及对细胞增殖的抑制作用.方法:设计合成针对op18启动子上E2F的结合位点序列的哑铃形Decoy ODNs,然后将合成的序列进行退火、连接,使其形成哑铃形的结构,再应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将哑铃形Decoy ODNs转染MKN-45细胞中.TRIzol法提取细胞总RNA,用RT-PCR方法检测细胞中op18 mRNA表达水平的变化.通过MTT实验监测细胞的生长增殖状况并绘制生长曲线,最后用TUNEL法观察细胞的凋亡的情况.结果:哑铃形Decoy ODNs被成功转染MKN-45细胞,并成功提取了细胞总RNA.RT-PCR检测发现哑铃形Decoy ODNs转染后的MKN-45细胞中op18 mRNA表达水平明显低于空白对照组,MTT实验所作的生长曲线显示转染细胞增殖速度与空白对照组相比较明显减慢,TUNEL凋亡染色可见凋亡细胞.结论:哑铃形Decoy ODNs能特异性抑制E2F转录因子对op18基因的转录调控,进而抑制op18基因表达及MKN-45细胞增殖.
林芳王锐高萍刘丽王希张惠中
关键词：圈套寡核苷酸细胞增殖基因疗法
嵌合HCV中和抗原表位的HBVS抗原病毒样颗粒制备及鉴定
目的 制备嵌合丙型肝炎病毒(HCV)中和表位的HBV 小S 抗原病毒样颗粒,并进行鉴定和纯化.方法 选择HCV E1和E2区保守的线性中和抗原表位,扩增HBV S 抗原基因,在HBV S 疏水区127 和128 位氨基酸...
韦三华舒放雷迎峰林芳崔颖李斌张利军刘昕阳张惠中
关键词：中和表位病毒样颗粒
靶向微管解聚蛋白stathmin siRNA对Aβ1-42诱发PC12细胞损伤的保护作用
2012年
目的:探讨微管解聚蛋白stathmin siRNA对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法:构建靶向stathmin基因的shRNA真核表达载体;然后用脂质体转染的方法将重组质粒转染至大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,用G418筛选得到稳定转染的细胞;通过RT-PCR和Western印迹方法分析stathmin基因mRNA及蛋白表达水平,筛选表达最低的稳定细胞株。用不同质量浓度的Aβ1-42诱导稳定细胞株,用MTT试验观察筛选稳定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,转染了重组载体pSilencer4.1-s的细胞中stathmin核酸和蛋白水平的表达均显著下调。与Aβ1-42处理的PC12细胞(63.88±2.36)和PC12-parental细胞(65.78±5.74)比较,Aβ1-42处理的PC12-s细胞(78.57±5.22)的存活率明显增加。用Aβ1-42处理过的PC12细胞(28.31±1.65)和PC12-parental细胞(26.65±3.64)的凋亡比用Aβ1-42处理过的PC12-s细胞(17.77±2.37)的凋亡明显增加。结论:Stathmin基因的下调对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤具有保护作用,为阿尔茨海默病的治疗探索了一条新策略。
林芳高萍刘昕阳和婷张惠中
关键词：STATHMINPC12细胞Β淀粉样蛋白
肝硬化合并大动脉炎1例
2004年
黄德东谢玉梅黄长形王高翔林芳
关键词：肝硬化大动脉炎
大鼠补体调节因子DAF功能区的表达纯化及功能鉴定
2006年
目的:重组表达促衰变因子(DAF)功能区的4个短的保守重复序列(SCR1-4)。方法:通过克隆大鼠DAF的SCR1-4并插入到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导共表达,根据表达结果选择纯化方式。结果:诱导后表达产物为不溶蛋白,通过纯化包涵体并复性,得到了具有抑制致敏绵羊红细胞发生溶血的可溶性蛋白成分。结论:原核表达SCR1-4易于形成包涵体,稀释复性法适用于DAFSCR1-4包涵体的复性。
徐江张惠中林芳刘丽王燕任继鸿李柱一
关键词：DAF包涵体蛋白复性
凋亡抑制蛋白Livin两种异构体原核表达载体的构建及融合表达
2007年
目的构建凋亡抑制蛋白Livin两种异构体(Livinα和β)的原核细胞表达载体pET32a(+)-livinα和pET32a(+)-livinβ。方法设计合成扩增Livin基因异构体全长cDNA序列的特异性PCR引物,以Hela细胞总RNA为模板,RT-PCR获得Livin基因异构体全长cDNA序列,用限制性内切酶BamHⅠ和HandⅢ双酶切取所需目的片段,并插入原核表达载体pET32a(+)的多克隆位点,经酶切、PCR鉴定,并经过测序证实后,构建成为Livin基因异构体表达载体(pET32a(+)-livinα、β)。将重组质粒转入表达菌株BL21,诱导表达收集菌液,超声碎菌,取其上清和沉淀分别进行SDS-PAGE电泳。结果成功获得Livinα和β全长cDNA序列,并克隆到原核表达载体pET32a(+)上;成功获得大小为55kd左右的融合蛋白。结论Livin基因两种异构体原核表达载体的构建及其融合蛋白的制备,为进一步研究Livin异构体功能及在肿瘤细胞中的抗凋亡效应奠定了基础。此蛋白也可用于进一步抗体制备、免疫鉴定和诊断等研究。
邹爱民沈建军高萍林芳张惠中
关键词：凋亡抑制蛋白LIVIN凋亡原核表达
兔VX2肿瘤的离体培养及有关生物学特性被引量：21
2006年
目的:在体外分离纯化VX2肿瘤细胞,观察其生物学特性.方法:采用组织块法和消化法结合对兔VX2肿瘤进行原代培养,体外传代观察,传代40次并对培养细胞进行形态学观察、细胞周期检查、核型分析、兔及裸鼠移植.结果:纯化的兔VX2肿瘤细胞形态一致,呈圆形、多角形的上皮细胞,体积小,核浆比倒置,体外连续培养8mo,传代50次以上,细胞倍增时间为26.4h,细胞周期测定G1期为74.61%,G2期为7.78%,S期为17.6%.染色体为亚三倍体核型,众数为60条.高细胞浓度可保证同种移植成瘤率,裸鼠移植可成瘤,无支原体污染.结论:兔VX2肿瘤细胞系来源于Shope病毒致乳头瘤恶变形成的鳞状上皮细胞恶性肿瘤,目前已经纯化,可应用于进一步肿瘤实验研究.
苏畅张惠中李文海林芳梁晓华江吕泉程庆书
关键词：肿瘤细胞肿瘤标记生物学
恶性肿瘤细胞及组织中凋亡抑制蛋白livin的表达及其临床意义被引量：8
2007年
目的:探讨凋亡抑制蛋白livin的两种异构体livinα、和livinβ在多种肿瘤细胞系及肿瘤组织中的表达及其与各类肿瘤临床病理的关系。方法:采用RT-PCR法检测HeLa、SBC-2等12种肿瘤细胞和50例不同肿瘤组织及20例癌旁组织中livinα和livinβ的mRNA的表达水平。结果:12个细胞系中8个细胞系的livin mRNA表达为阳性,分别为HeLa、SPCA-1、SBC-2、PC14、MKN45、LOVO、HHCC、A549,其中A549为弱表达,且livinα的表达强于livinβ;HL-7702、Hep-2、7721、K562四种细胞中livin表达为阴性;50例肿瘤组织中livin mRNA表达阳性率为64.0%,而在癌旁组织中为2%。Livin mRNA的表达与肿瘤患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关性。结论:Livin在肿瘤细胞系及肿瘤组织中表达的研究,为进一步研究livin与肿瘤的发生、发展的关系,及其以livin为靶位的肿瘤基因治疗研究提供了有力依据。
邹爱民沈建军高萍林芳张惠中
关键词：凋亡抑制蛋白类LIVIN基因表达
Stathmin基因毕赤酵母表达体系的构建及鉴定
2016年
目的构建Stathmin基因毕赤酵母表达体系,并对表达产物进行纯化和鉴定,为Stathmin相互作用蛋白的进一步研究提供实验基础。方法通过PCR方法从SKBR3乳腺癌细胞中扩增出人Stathmin基因片段,克隆入毕赤酵母表达载体pPIC3.5K,构建重组载体pPIC3.5K-Stathmin,转化GS115工程菌,经含基因素(G418)的酵母膏胨葡萄糖琼脂(YPD)培养基筛选出阳性克隆。用0.5%甲醇诱导表达,并用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western Blotting鉴定表达产物。结果 DNA测序结果表明,所获基因片段与Stathmin基因序列一致。在含有G418 600μg/mL的YPD培养基上筛选出的pPIC3.5K-Stathmin转化子,经PCR鉴定为阳性克隆。SDS-PAGE可见约37×103处有目的条带表达,经Western Blotting鉴定,此条带为Stathmin蛋白。结论成功构建了Stathmin酵母表达载体,并在毕赤酵母中表达成功,为Stathmin相互作用蛋白研究以及生物治疗药物的制备奠定了基础。
杨铭林芳和婷董轲张惠中
关键词：基因
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