沈武玲
- 作品数：13 被引量：45H指数：4
- 供职机构：西北民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科技资源平台项目中央高校基本科研业务费专项资金甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 欧拉羊胎儿皮肤细胞的培养、保存与鉴定被引量：1
- 2012年
- 用胰蛋白酶对欧拉羊胎儿皮肤组织进行热消化分离并培养原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞,扩大培养至第3代时用液氮保存,复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染检测和连续传代培养试验。结果显示,欧拉羊胎儿皮肤细胞呈成纤维型,复苏活力93.5%以上,生长良好,细胞生长曲线呈"S"型,最大增殖量为3.31×105 mL-1,倍增时间为26.2h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性,连续传代培养在10代内生长正常。表明欧拉羊胎儿皮肤细胞分离培养成功,使这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。
- 乔自林冯若飞李明生令世鑫王家敏沈武玲冯玉萍柏家林马忠仁
- 关键词：欧拉羊皮肤细胞
- 青海大通马耳缘组织成纤维细胞系的建立及生物学特性研究被引量：3
- 2012年
- 为了建立青海大通马耳缘组织成纤维细胞系,使青海大通马这一重要种质资源在细胞水平上得以保存,试验采集青海大通马耳缘组织用组织块法制备原代细胞,通过差速消化法和差速贴壁法纯化细胞,扩大培养至第3代用液氮保存,细胞复苏后进行了活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型及荧光蛋白质粒转染表达等特性研究。结果表明:大通马耳缘组织原代和传代细胞呈成纤维型,生长良好,最大增殖浓度为4.27×105/mL,倍增时间为31.02 h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性;染色体2n=64,二倍体率为80%,占主体;红色荧光蛋白质粒在该细胞中能进行复制和表达。
- 王家敏乔自林冯若飞李明生冯玉萍令世鑫柏家林沈武玲马忠仁
- 关键词：成纤维细胞生物学特性
- 婴儿皮肤组织成纤维细胞系的建立及生物学特性
- 2014年
- 采集婴儿皮肤组织,用组织块法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化细胞,扩大培养至第3代液氮冻存,复苏细胞后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型、乳酸脱氢同工酶谱及荧光蛋白质粒转染表达等特性研究.结果显示,婴儿皮肤组织细胞呈成纤维型,生长状态良好;生长曲线呈"S"型,最大增值浓度为1.64×105/mL,倍增时间为63.12 h;细菌、真菌、支原体检测均为阴性;染色体2n=46,二倍体为86%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱显示有5条谱带;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达.表明已成功建立了婴儿皮肤组织成纤维细胞系,这为复合人工皮肤的组织工程学研究奠定了前期工作基础,也为皮肤相关疾病的研究提供了实验条件,因而具有重要的理论和实践意义.
- 王家敏沈武玲平玲徐水林赵彬马忠仁乔自林
- 关键词：婴儿皮肤成纤维细胞系生物学特性
- 滩羊肾和耳缘组织细胞的分离培养与鉴定被引量：1
- 2012年
- 用胰蛋白酶热消化分离并培养肾组织原代细胞,组织块法培养耳缘组织原代细胞,并通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞并用液氮保存,细胞复苏后进行了活力、形态、生长特性、微生物污染和染色体等检查。结果发现,滩羊肾和耳缘细胞呈成纤维形,平均复苏活力94.5%和97.7%,生长均良好,生长曲线均呈"S",最大增殖浓度和倍增时间分别为2.8×105/mL、25.5 h和3.2×105/mL、24.2 h,保存的细胞经细菌、真菌、病毒和支原体检查为阴性,染色体为2n=54,二倍体占主体。本研究,滩羊肾和耳缘组织细胞成功分离培养并保存,使滩羊这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。
- 乔自林令世鑫冯若飞李明生王家敏沈武玲冯玉萍柏家林马忠仁
- 关键词：滩羊肾细胞
- 河曲马睾丸组织成纤维细胞系的建立及生物学特性研究被引量：13
- 2012年
- 采集河曲马睾丸组织,用热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化细胞,扩大培养至第3代用液氮保存,细胞复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型、乳酸脱氢同工酶谱及荧光蛋白质粒转染表达等特性研究。结果显示,河曲马睾丸组织原代和传代细胞呈成纤维型,生长良好,最大增殖数量为4.32×105 mL-1,倍增时间为34.58h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性;染色体2 N=64,二倍体为85%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,共有4条谱带,其中LDH3浓度较高,活性较强;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达。表明已成功建立河曲马睾丸组织成纤维细胞系,使河曲马这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。
- 令世鑫关伟军冯玉萍乔自林冯若飞李明生王家敏沈武玲马忠仁
- 关键词：生物学特性
- MDCK细胞库的建立及其生物学特性研究被引量：7
- 2012年
- 分别从美国典型培养物保藏中心(ATCC)、中国典型培养物保藏中心(CCTCC)、北京协和细胞资源中心及某企业引进4株MDCK细胞系,扩大培养后液氮冻存,分别建立种子细胞库和工作细胞库。细胞复苏后分别对每株细胞进行了活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型及荧光蛋白质粒转染表达等特性研究。结果表明,4个来源的MDCK细胞均呈上皮型,生长状态良好;生长曲线呈S型;细菌、真菌、支原体检测都为阴性;染色体2n=78;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达。建立的细胞库为开展MDCK细胞及流感细胞基质疫苗的研究提供了基础理论依据和细胞资源。
- 王家敏平玲沈武玲徐水林魏园园马忠仁乔自林
- 关键词：细胞库生物学特性
- 静置培养BHK-21细胞生长及代谢动力学研究被引量：1
- 2014年
- 为研究BHK-21细胞的生长及代谢动力学特征,试验采用低密度静置培养方法,每天测定细胞生长密度和活力,并利用多参数生化分析仪测定培养液中Gluc、Lac、Gln和NH4+的含量,计算细胞指数生长期的比代谢速率。结果表明:BHK-21细胞生长曲线呈S型,最大增殖密度为50.3×104 upf·mL-1,倍增时间为21.1h;对数生长期Gluc和Gln的比消耗速率为-3.79mg·(106 cells)-1·d-1和-9.95μmol·(106 cells)-1·d-1,Lac和NH4+的比生成速率为2.81mg·(106 cells)-1·d-1和6.30μmol·(106 cells)-1·d-1。
- 付智财王家敏沈武玲令世鑫马忠仁乔自林
- 关键词：BHK-21细胞代谢动力学
- 欧拉羊胚肾细胞的分离培养和鉴定被引量：2
- 2012年
- [目的]分离培养并鉴定欧拉羊胚肾细胞,为该品种基因组文库构建和遗传多样性研究提供生物学材料。[方法]用胰蛋白酶热消化法分离并培养欧拉羊胚肾原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞,扩大培养至第3代用液氮保存,细胞复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染检测和连续传代培养试验。[结果]欧拉羊胚肾细胞呈成纤维型,复苏活力90%以上,生长良好,生长曲线呈"S",最大增殖浓度为4.61×105/ml,倍增时间26 h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性,连续传代培养在10代内生长正常。[结论]欧拉羊胚肾细胞分离培养成功,使这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。
- 乔自林李明生冯若飞令世鑫王家敏沈武玲冯玉萍柏家林马忠仁
- 关键词：欧拉羊
- 猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究现状被引量：17
- 2012年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种对养猪业危害严重的传染病,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为有囊膜的单股正链RNA病毒,且具有高度的变异性,有美洲型和欧洲型两个血清型。猪肺泡巨噬细胞(PAM)、恒河猴胎肾细胞系MA-104及源于MA-104的传代细胞系(如Marc-145、CL-2621、HS.2H和CRL-1171)对PRRSV敏感。预防该病的常规疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗两种。通常以特定种毒在适当细胞系中培养增殖,经灭活或致弱,加入佐剂制得相应疫苗。灭活疫苗交叉保护性差,但使用安全;弱毒疫苗抗体产生快、持续时间长、保护力强,但源毒能在猪群中持续存在而有安全隐患。
- 沈武玲乔自林令世鑫冯玉萍冯若飞李明生林学仕柏家林王家敏马忠仁
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征PRRSV灭活疫苗弱毒疫苗
- 兔抗鸡免疫血清的制备及效价测定被引量：1
- 2010年
- 目的：制备高效价兔抗鸡免疫血清．方法：将抗原鸡血清经弗氏佐剂乳化，采用一定的免疫程序免疫家兔．末次加强免疫后7～9d取兔血清，应用双向免疫扩散法测定其效价；采用沉降与离心方法分离血清．结果：免疫家兔在全程免疫后都产生了高效价抗体，效价达到1：32．结论：用抗原鸡血清免疫家兔，可成功制备高效价的免疫血清，为今后的实验教学和实验研究奠定了基础．
- 王冬梅沈武玲
- 关键词：免疫血清效价测定
