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王印: 作品数：239 被引量：964H指数：14; 供职机构：四川农业大学更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>

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《动物检疫技术》课程教学改革的探索与体会被引量：1: 2013年; 注重学思结合,知行统一与因材施教,进行改革创新推动教育发展。本文从修订教学大纲、充实教学内容、改革教学方法手段和完善成绩考核体系几个方面分析总结了《动物检疫技术》课程教学改革探索的实践以及取得的教学效果,并对如何成功进行高等教育教学改革提出思考,认为教师的主导作用和无私奉献是进行教学改革、提高教学质量的重要因素。; 杨泽晓王印姚学萍汪开毓徐志文朱玲; 关键词：教学改革

靶序列富集多重PCR技术的发展及其应用被引量：7: 2016年; 靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem–PCR)作为一种新型的分子生物学高通量检测技术,通过靶序列富集、靶序列加标签以及超级引物扩增3个阶段实现对靶标序列的大量扩增。靶序列富集多重PCR具有独特的反应过程,克服了常规多重PCR扩增条件不兼容、扩增具有偏爱性等缺点,实现了对同一反应体系多种病原的同步检测,为临床病原鉴别诊断、基因分型、耐药基因等领域的研究提供了新思路,具有较大的发展前景。笔者对Tem–PCR的研究背景、反应原理、技术应用及试剂盒开发等进行综述,旨在为Tem–PCR的研究和发展提供参考依据,为中国应对公共卫生危机提供新思路。; 邬旭龙肖璐姜睿姣王印杨泽晓姚学萍张鹏飞张博; 关键词：高通量生物技术公共卫生

猪细小病毒SC1株非结构蛋白NS1基因的原核表达及PPA-NS1-ELISA的初步建立被引量：4: 2007年; 含有猪细小病毒SC1株非结构蛋白NS1基因的重组质粒pPNS1通过EcoR+Hind双酶切后,回收NS1基因,将其亚克隆进原核表达载体pET30a(+)中,构建了重组表达质粒pET-NS1,转入表达宿主菌BL21中,通过IPTG的诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组NS1蛋白高效表达,以包涵体形式存在,占细菌总蛋白的26.7%。并确定了NS1蛋白的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L,诱导时间为3h。Westernblotting检测表明,表达产物具有良好的免疫原性。重组蛋白经纯化后作为抗原,包被酶标板,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白作为二抗,建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA-NS1-ELISA)。结果表明,抗原最佳包被质量浓度为31.3mg/L,血清最佳稀释度为1∶40。阳性标准初步定为:待检血清D490>0.32,且待检血清D490/阴性血清D490>2.0。; 陈进会郭万柱殷华平颜其贵徐志文王印罗燕王小玉; 关键词：猪细小病毒 NS1基因

两株GI.1型和GI.2型兔出血症病毒RdRp基因的克隆与分析: 2023年; 为了解兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)RdRp基因的遗传稳定性和变异规律,本研究分别克隆了RHDV SCH04株和RHDV2 SCCN03株的RdRp基因,然后对基因序列进行比对和系统发育分析,并通过编码蛋白质的理化性质、信号肽、跨膜区域、二级结构、三级结构、磷酸化和糖基化修饰位点的预测,对RdRp进行生物信息学分析。结果显示,两株RdRp基因序列全长均为1548 bp,编码516个氨基酸。GI.1型RHDV毒株间序列相似性为86.9%~99.9%,GI.2型RHDV毒株间为91.3%~99.9%。GI.1型和GI.2型RHDV毒株间序列相似性为84.3%~88.3%。SCH04株和SCCN03株分别属于GI.1a型和GI.2型RHDV,且SCH04株和SCCN03株的RdRp基因核苷酸序列相似性为84.95%,其编码蛋白存在17个氨基酸差异位点,氨基酸序列相似性为96.71%;二者均属于稳定蛋白,不存在信号肽和跨膜区域;其分子量、等电点、脂溶系数、平均亲水系数和不稳定系数等指标无显著差异。SCH04株RdRp的α螺旋和β转角比例比SCCN03株略高,分别为41.86%和4.26%,而SCCN03株RdRp的延伸链和无规则卷曲比例比SCH04株略高,分别为12.79%和43.41%;SCCN03株RdRp比SCH04株多4个磷酸化位点和1个N-糖基化位点。分析结果表明不同型间RHDV RdRp基因核苷酸变异率较高,GI.1 RHDV毒株间的变异范围大于GI.2 RHDV毒株。SCH04株和SCCN03株RHDV RdRp的氨基酸序列相似性高于核苷酸序列相似性,其二级结构和高级结构差异较小,遗传相对稳定。本研究为RHDV的遗传演变和生物合成等分子病原学研究提供了科学参考。; 庞雪晴唐诗曾红梅赵位王印罗燕姚学萍任梅渗任永军杨泽晓; 关键词：兔出血症病毒 RDRP 生物信息学分析

乙型脑炎病毒的分离与鉴定被引量：14: 2004年; 通过收集母猪流产死胎和蚊子为病料 ,用乳鼠脑内接毒和细胞接毒相结合的方法盲传并分离出病毒 ,进而采用血凝 (HA)实验、荧光抗体染色技术 (间接法 )、电镜实验、血清学实验及RT -PCR方法对所分离的病毒进行鉴定 ,结果表明所分离的病毒SC株为乙脑病毒 ,其PrM/E的同源性与JEV强毒株SA14相比达 98%。; 汤德元郭万柱徐志文颜其贵王印王晓玉; 关键词：乙型脑炎病毒

鸭源鸡杆菌的分离鉴定及其全基因组序列分析被引量：2: 2022年; 【背景】鸭源鸡杆菌作为一种条件致病菌能引起家禽卵巢炎、输卵管炎和腹膜炎等疾病,严重威胁养殖业的发展。【目的】四川某养鸡场送检了一批疑似感染鸭源鸡杆菌的病死鸡,为探究其感染机制与防治方法,对该菌进行分离鉴定及全基因组测序分析。【方法】从病料中分离并纯化细菌,再依次进行生化试验、16S rRNA基因序列分析和药敏试验,同时通过全基因组测序对其进行物种分型与毒力、耐药等基因功能注释及遗传进化分析。【结果】该分离菌被鉴定为鸭源鸡杆菌,菌株命名为TS0001,药敏试验显示其仅对硝基呋喃类和少数β-内酰胺类药物敏感,对部分β-内酰胺类、氯霉素、部分氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类和磺胺类药物具有耐药性。全基因组序列长度为2626722 bp,蛋白质编码基因功能注释显示其有较强的自我加工修饰能力,全基因组注释到83个与毒力因子和耐药性相关的基因,包含4个前噬菌体区域。序列类型分析结果显示,该菌株为ST69型,而且管家基因联合建树表明其与墨西哥普通家鸡分离株7990一致性最高。【结论】本研究为鸭源鸡杆菌的感染机制与防治研究提供了参考,丰富了后续研究的分子生物学背景。; 唐诗庞雪晴曾红梅王印罗燕姚学萍任梅渗杨泽晓; 关键词：鸭源鸡杆菌全基因组序列分析耐药性

兔出血症病毒2型检测技术的研究进展: 2022年; 本文针对近年来国内外兔出血症病毒2型(RHDV2)检测方法和诊断技术的研究进展进行综述,旨在为RHDV2的早诊、监测和预防提供技术参考。; 肖璐邬旭龙王印江地科张鹏飞杨蓉

联合表达PCV2 ORF2和PPV VP2基因病毒样颗粒获得及免疫原性被引量：4: 2009年; 将包含有完整闼读框架，长1740、705bp的PPVVP2基因、PCV2ORF2基因分别插入真核表达载体pPI-2．EGFP，构建了重组质粒pPi-Z．EGFP．VP2．ORF2。观察由脂质体介导转染重组质粒后的Vero细胞，结果最早在转染后20h左右出现荧光，36h达到高峰；对转染细胞进行电镜检测，结果观察到病毒样颗粒存在。为证实所获病毒样颗粒是否为重组颗粒，将纯化后的病毒样颗粒免疫仔猪，检测其血中T淋巴细胞的动态变化以及血清抗体水平。结果免疫仔猪的CD3＋、CD4＋T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高；CD8＋T淋巴细胞在免疫后7～14d有所下降，之后再升高。抗体检测结果表明，免疫动物血清中有较高水平的PPV、PCV2特异性抗体。结果表明重组质粒pPI-2．EGFP．VP2．ORF2获得成功表达并形成重组病毒样颗粒，且该颗粒具有良好的免疫原性。; 徐志文郭万柱陈杨朱玲陈燕凌王印; 关键词：病毒样颗粒猪细小病毒免疫原性

副猪嗜血杆菌的分离鉴定和药敏试验被引量：5: 2011年; 采用细菌学检测方法和PCR技术对来自四川省遂宁市某规模化养猪场疑似副猪嗜血杆菌(HPS)感染的发病猪只肺脏等病料进行了HPS分离鉴定,结果分离出1株疑似HPS的细菌,经形态学、染色及培养特性检测、生化试验、血清型试验16 S rDNA序列分析,鉴定为4型HPS。动物致病性试验显示HPS分离株均具有较强致病性,药敏试验表明HPS分离株具有较强的耐药性,仅对阿米卡星、氨苄舒巴坦、复达欣、痢特灵敏感。; 李俐睿王印宋勇钟霏黄海燕; 关键词：副猪嗜血杆菌生化 PCR 血清学试验药敏试验

集约化养鲤细菌性败血症及穿孔病的研究: 汪开毓宋光宏熊焰张国宁王印方静钟妮娜; 对集约化养鲤细菌性败血症及穿孔病进行了全面、系统、深入地研究。分离鉴定了病原，确定该病的病原为嗜水气单胞菌，证实二者为同一病原的不同病程和病型的表现。弄清了该病的流行病学规律，揭示了病理学的特征，建立了特异、快速、准确的...; 关键词：; 关键词：集约化养殖嗜水气单胞菌免疫学诊断

王印

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