王应雄
- 作品数：265 被引量：688H指数：12
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- Annexin A1在小鼠胚泡植入不同时期子宫内膜组织中的表达及意义被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨Annexin A1在小鼠胚泡植入期的作用。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析孕d3、d5、d7小鼠子宫内膜蛋白质组,用差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约38kD的蛋白点在d3、d5上调,且在d5更明显。经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)和数据库搜索对此蛋白点进行鉴定;再用RT-PCR、原位杂交、Western blot和免疫组织化学技术进行验证分析。结果:该蛋白点鉴定为鼠源性Annexin A1;d5小鼠子宫内膜组织中Annexin A1的mRNA和蛋白质水平均增加。结论:Annexin A1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。
- 张群刘学庆陈雪梅王应雄赖雪梅何俊琳
- 关键词：ANNEXIN胚泡植入蛋白质组小鼠子宫内膜
- 非妊娠小鼠子宫内膜白血病抑制因子基因表达研究被引量：1
- 1999年
- 白血病抑制因子（LIF）能抑制胚胎干细胞的分化和保持其增殖能力，并与胚泡着床及胚胎早期发育有着密切的关系。经实验证实，LIF基因在子宫内膜中的表达具有高度的时间限制性。采用反转录聚合酶链式反应技术（RT－RCR）对小鼠子宫内膜LIF基因表达进行了研究，结果显示：妊娠第4天小鼠的子宫内膜组织的样本在电泳图的538bp处出现清晰的电泳带，表明该组织有LIF基因的强表达；而在所检测的13只非妊娠小鼠子宫内膜的组织样本中均未发现LIF基因表达讨论了小鼠动情周期中各阶段的孕激素水平对子宫内膜LIF基因表达产生的影响。
- 刘学庆王应雄翁亚光何俊琳陈雪梅
- 关键词：白血病抑制因子基因表达子宫内膜
- HEP-2细胞染色体不稳定性与kinetochore变异被引量：2
- 2011年
- 染色体非整倍性畸变是恶性肿瘤细胞的显著细胞遗传学特征,但其诱发染色体数目不稳定的机制一直尚未阐明。本研究从与染色体分离直接相关的动粒(kinetochore)角度,采用kine-tochore-NOR同步银染技术对HEP-2细胞染色体kinetochore变异进行分析,以探讨恶性肿瘤细胞染色体数目变异的形成机制。实验共分析HEP-2细胞分裂相308个,计染色体16 962条,正常对照个体外周血细胞分裂相300个,计染色体13 800条。结果表明:与正常人外周血细胞相比,HEP-2细胞染色体kinetochore缺失和kinetochore迟滞复制频率显著升高(P<0.01),而kinetochore-NOR融合频率二者没有显著差异(P>0.05),这些结果提示kinetochore缺失和kinetochore迟滞复制可能是HEP-2细胞染色体非整倍性变异起源的诱因之一。此外,我们还在某些HEP-2细胞染色体上观察到多重kinetochore现象,并认为染色体多重kinetochore可能是恶性肿瘤细胞染色体结构畸变产生的一个新的途径。
- 龙春兰谭彬刘学庆丁裕斌陈雪梅余秋波高茹菲王应雄何俊琳
- 关键词：染色体不稳定HEP-2细胞
- 小鼠胚泡黏附时子宫内膜Galectin-1的变化被引量：5
- 2004年
- 目的:探讨小鼠胚胎黏附时子宫内膜Galectin-1的变化。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析妊娠d 5小鼠胚泡黏附时着床点、着床旁子宫内膜总蛋白,以同龄未交配鼠子宫内膜为对照,差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约15 ku的蛋白点在着床点、着床旁子宫内膜表达上调,且在着床点更明显。对此蛋白点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)。结果:Mascot: PMF在SWISS-PROT数据库查询为鼠源性Galectin-1。RT-PCR结果显示d 5孕小鼠子宫内膜Galectin-1 mRNA水平也明显增加。结论:Galectin-1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。
- 潘卫王应雄黎刚翁亚光刘孝云
- 关键词：GALECTIN-1着床蛋白质组肽质量指纹谱
- 基于“Click”反应耦合酶的高灵敏葡萄糖生物传感器的研究被引量：2
- 2012年
- 采用葡萄糖氧化酶(GOD)为模板,利用"Click"反应固定,构建了新型葡萄糖生物传感器。首先,将碳纳米管叠氮化,并将GOD炔基化;在Cu^+的催化作用下,两者发生"Click"反应;在Nafion的作用下固定在玻碳电极表面,制得葡萄糖生物传感器。采用傅里叶红外光谱(FTIR)法对碳纳米管"Click"反应前后的性质进行了表征。采用循环伏安法和计时电流法考察了电极的电化学行为,并对传感器的性能进行了详细研究。结果表明:在优化的实验条件下,此电极对葡萄糖有明显的催化作用,电流与葡萄糖的浓度在6.0×10-7～1.4×10-3 mol/L范围内呈现良好的线性关系,检出限达2.0×10^(-7)mol/L。此传感器具有良好的灵敏度、稳定性和重现性。对血清样品中的葡萄糖进行检测,结果令人满意。
- 李文娟于超王应雄杨竹
- 关键词：生物传感器
- 优体必及其衍生物的新用途
- 本发明公开了一种优体必及其衍生物的新用途，优体必及其衍生物在制备利尿药物中的应用。运用红细胞尿素通道抑制剂筛选模型，通过高通量筛选系统从小分子化合物库中筛选出具有抑制尿素通道UT-B活性的线索化合物。从线索化合物540个...
- 冉建华杨宝学王应雄孙善全钟东汪克建
- 文献传递
- 分化抑制因子3在胚胎植入中的作用
- 2018年
- 目的:检测分化抑制因子3(inhibitors of differentiation 3,Id3)基因在小鼠早期妊娠模型和人工诱导蜕膜化模型中子宫内膜中的表达规律;探究Id3基因在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化过程的作用。方法:应用Western blot及q RT-PCR检测Id3在早期妊娠和人工诱导蜕膜化模型小鼠子宫中的表达;利用分离的原代小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化、过表达Id3基因,分析Id3对基质细胞蜕膜化的影响。结果:Id3在小鼠早期妊娠模型中高表达于子宫内膜容受期形成阶段(孕第4天)(P蛋白质=0.001,Pm RNA=0.001),胚胎着床后基质细胞发生分化的蜕膜化子宫中表达较低(PD5蛋白质=0.026,PD5m RNA=0.038);体内人工诱导蜕膜化小鼠子宫内膜Id3的表达明显低于未发生蜕膜化的对照子宫(P蛋白质=0.005,Pm RNA=0.000);体外人工诱导蜕膜化可抑制Id3基因的表达(P蛋白质=0.000,Pm RNA=0.001);过表达Id3可以明显降低体外子宫内膜基质细胞蜕膜化过程;Stat3信号参与调控Id3的表达调控子宫内膜基质细胞蜕膜化过程。结论:Id3参与小鼠胚胎植入并调控子宫内膜基质细胞蜕膜化过程。
- 叶亮张雪王倩刘学庆张爽陈雪梅何俊琳高茹菲王应雄丁裕斌
- 关键词：子宫内膜蜕膜化STAT3
- 米非司酮对小鼠着床期子宫内膜活化的β-连环蛋白(active β-catenin)表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨活化的β-连环蛋白(active β-catenin)在胚胎着床过程中的作用。方法:将孕第2日(d2)昆明小鼠随机分成3组,每组30只,A组:孕d2单次背部皮下注射0.1ml米非司酮(1.2mg/ml);B组(溶剂对照):以等量1,3-丙二醇代替米非司酮;C组:不作任何处理。用免疫组织化学、间接免疫荧光、Western blotting方法定性、定量、定位检测3组小鼠在妊娠d3￣7活化的β-连环蛋白的动态表达。结果:B、C组小鼠子宫内膜中活化的β-连环蛋白于孕d3在腺上皮和腔上皮、基质细胞质和细胞膜表达;妊娠d4在腔上皮细胞质和细胞膜强表达,并达高峰;妊娠d5￣7在腺上皮、血管内皮、腔上皮下基质细胞膜和细胞质表达,且B、C组间在妊娠d3￣7各时间点的表达无显著性差异(P>0.05);A组小鼠妊娠d3￣7活化的β-连环蛋白的表达较B、C组显著降低(P<0.01),在妊娠d4表达量未见高峰,且表达部位局限于基质细胞,腔上皮无表达。结论:米非司酮可能通过抑制孕激素与其受体结合而下调活化的β-连环蛋白表达,进而抑制子宫内膜黏附性,影响子宫内膜容受性的建立而阻碍胚胎顺利着床。
- 陈世知何俊琳刘学庆丁裕斌黄静陈雪梅王应雄
- 关键词：米非司酮子宫内膜
- 抗rmNDPK-B抗体的制备、纯化、鉴定及应用
- 2007年
- 为制备抗rmNDPK-B多克隆抗体,以纯化后的rmNDPK-B为抗原,改良法免疫新西兰兔,琼脂双向扩散法分析抗体滴度,SDS-PAGE和Western-blot鉴定纯化后的抗体,结果发现,已获得高效价、高纯度的抗rmNDPK-B多克隆抗体;再分别以此抗体和抗rhNDPK-B抗体为一抗,Western-blot和免疫组织化学法检测小鼠子宫内膜组织中的NDPK-B的表达和分布.结果提示,在检测妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达时,抗rmNDPK-B抗体的特异性明显高于抗rhNDPK-B抗体.妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达显著高于非妊娠鼠.这表明用改良法制备的抗rmNDPK-B多克隆抗体具有高特异性、高效价和较高的灵敏性.nm23-M2/NDPK-B可能参与了胚泡着床过程.
- 李茂萍何俊琳王应雄刘学庆陈雪梅翁亚光
- 关键词：多克隆抗体
- 白细胞介素1β通过β1整合素糖基化修饰诱导EA.hy926细胞凋亡被引量：2
- 2012年
- 目的探讨IL-1β对血管内皮细胞损伤机制。方法以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,利用不同浓度IL-1β刺激24 h,采用Western blot方法检测IL-1β对β1整合素、Bcl-2、Bax、Caspase-3及N-乙酞氨基葡萄糖转移-V(GnT-V)表达的影响;通过Lectin blot方法显示IL-1β对GnT-V所修饰的所有糖蛋白量的影响;免疫共沉淀方法检测IL-1β对β1整合素糖基化修饰量的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果 IL-1β可从蛋白翻译水平抑制β1整合素的表达,同时可以下调Bcl-2/Bax的比例,上调Caspase-3的表达。初步揭示IL-1β诱导血管内皮细胞凋亡可能是通过β1整合素N-连接糖基化作用来完成的。结论 IL-1β可通过调控EA.hy926细胞β1整合素的糖基化修饰,增加细胞凋亡率,损伤血管内皮细胞。
- 李佳佳杨竹王应雄于超
- 关键词：IL-1ΒGNT-VΒ1整合素糖基化凋亡
