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王敬章
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3
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供职机构:
四川大学生命科学学院
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相关领域:
生物学
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合作作者
杜林方
四川大学生命科学学院生物资源与...
惠心娣
四川大学生命科学学院生物资源与...
黄瑜
四川大学生命科学学院生物资源与...
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四川大学生命科学学院
谢思思
四川大学生命科学学院
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去折叠过程
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王敬章
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2012
2篇
2007
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hPin1原核表达纯化、热稳定性及与Al~(3+)相互作用研究
hPinl是一种肽基脯氨酰顺反异构酶,能特异催化蛋白质分子中pSer//Thr-Pro肽键的顺反构型转变,与多种人类疾病相关,尤其是癌症和阿尔茨海默氏病/(Alzheimer's disease,AD/)。我们利用Eco...
王敬章
关键词:
原核表达
热稳定性
荧光光谱
圆二色谱
酶活测定
铝离子
文献传递
hPin1原核表达、纯化及热稳定性研究
2007年
利用E.coli BL21原核表达,纯化得到了His-hPin1融合蛋白,并研究了它的热稳定性.在中性条件下进行不同温度处理,SDS-PAGE分析表明,低于40℃处理不会影响His-hPin1的溶解性,50~100℃处理会使其部分变性而沉淀.荧光发射光谱研究表明,未处理的His-hPin1具有339nm的荧光发射峰;热处理使荧光发射峰的位置变化,低于40℃处理对His—hPin1的荧光强度影响较小,50~100℃热处理使HiS-hPin1的荧光强度明显降低.圆二色谱研究表明,热处理对His-hPin1的二级结构有影响,引起α-螺旋含量的明显减少,而无规卷曲增加.以上数据表明hPin1是一个相对热稳定的蛋白.
王敬章
刘鑫
惠心娣
黄瑜
黄新河
杜林方
关键词:
原核表达
热稳定性
荧光光谱
圆二色谱
盐酸胍诱导的apo-CP43去折叠过程
2012年
膜蛋白生物合成与色素组装中蛋白的稳定性可以通过去折叠条件与过程分析得到.利用色氨酸荧光光谱和ANS荧光光谱研究了apo-CP43在盐酸胍条件下的稳定性.色氨酸荧光光谱观测到apo-CP43在盐酸胍作用下去折叠进程的主要特征:荧光强度先是逐渐降低,之后再逐渐升高,而最大荧光发射峰位置则一直持续红移.盐酸胍处理后apo-CP43的F360 nm/F335 nm比值逐渐增大,表明荧光最大发射峰逐步红移.当盐酸胍浓度约为5.5 mol/L时,去折叠比例趋于相对稳定状态,说明此时apo-CP43已经基本完成去折叠.荧光相图法结果显示盐酸胍诱导apo-CP43变性的过程符合三态模型.ANS荧光测定数据显示盐酸胍处理之后最大ANS荧光发射峰位置红移,并且荧光强度逐渐降低.以上数据表明在盐酸胍条件下apo-CP43是一个相对比较稳定的蛋白.
谢思思
刘骥
王敬章
朱国飞
杜林方
关键词:
盐酸胍
去折叠过程
荧光光谱
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