程君生
- 作品数:64 被引量:450H指数:12
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项科技基础性工作专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 布氏杆菌病疫苗的应用和研究现状被引量:62
- 2006年
- 布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种重要的人兽共患病。布氏杆菌具有宿主广泛、传染性强以及感染后根治困难等特点,对畜牧业和人类健康均构成严重威胁,疫苗免疫是预防和控制布氏杆菌病的主要措施。迄今国内外已有多个弱毒活疫苗在使用,但均存在一定的缺陷,因此研究更理想的疫苗一直是控制布氏杆菌病的重点。目前除了常规诱变筛选新的弱毒株外,人们正通过基因工程技术构建重组弱毒疫苗、DNA疫苗以及亚单位疫苗。本文简述了布氏杆菌病疫苗的应用及新型疫苗的研究现状。
- 丁家波毛开荣程君生戴志红蒋玉文
- 关键词:布氏杆菌布氏杆菌病疫苗
- 布鲁氏菌病CF-ELISA抗体检测试剂盒
- 本发明涉及一种布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验(CF‑ELISA)诊断试剂盒,本试剂盒将补体结合试验(CFT)中的反应系统与酶联免疫吸附试验(ELISA)中的酶标记放大系统相结合。本试剂盒较传统补体结合试验诊断试剂而言...
- 毛开荣张金亚王楠徐磊王苗苗丁家波蒋玉文朱良全程君生蒋卉蒋菲
- 文献传递
- 微量Bradford法测定提纯禽结核菌素蛋白含量被引量:13
- 2007年
- 研究用96孔微量板Bradford法测定提纯禽结核菌素蛋白含量。通过不同浓度的待测禽结核菌素与考马斯亮蓝G-250溶液混合后,在595nm光波下测定各孔样品的OD值。微量Bradford法检测禽结核菌素的线性范围是50—1000μg/mL,相关系数为0.999,最低定量限为50μg/mL。试验用3支禽结核菌素国际参照品,分别配制成125、250、500μg/mL三种不同浓度,每支每种浓度测定4次,计算实际测得的蛋白质浓度。结果显示,批内相对标准偏差为1.6%~4.4%;批间相对标准偏差0.7%-2.2%。研究结果表明微量Bradford法可作为测定禽结核菌素蛋白含量的一种方法。
- 程君生毛开荣丁家波蒋玉文
- 布鲁氏菌病荧光偏振抗体检测方法的建立被引量:16
- 2017年
- 【目的】布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病,是由布鲁氏菌引起的以感染家畜为主的人畜共患传染病,造成严重的公共卫生问题。目前全世界范围内消除该病的主要方法是扑杀与免疫相结合,所以建立快速准确的诊断方法对防治和清除布病非常必要。本文建立布鲁氏菌病荧光偏振(FPA)抗体检测方法,为布鲁氏菌病(布病)的快速高效诊断提供技术手段。【方法】提纯猪种布鲁氏菌S2株脂多糖O链(OPS),经异硫氰酸荧光素(FITC)标记后作为诊断抗原。通过对样品稀释液、抗原稀释度、反应时间等条件的优化,初步建立了布鲁氏菌荧光偏振诊断方法。用该方法对148份布病阳性血清(其中牛血清70份,羊血清78份)和155份布病阴性血清(其中牛血清82份,羊血清73份)进行检测,确定其敏感性和特异性。按确定的技术参数,制备3批布鲁氏菌FPA抗体检测试剂盒,使用质控阴、阳性血清分别评价试剂盒的批内和批间重复性。用400份临床样本比较本研究开发试剂盒与商品化进口FPA试剂盒的符合率。【结果】使用0.5%蔗糖磷酸缓冲液作为血清样品稀释液;标记抗原的使用浓度为90μg/m L;最佳反应时间为3-5 min。本检测方法的判定标准为:δm P值<20时为阴性,δm P值≥20时为阳性。按上述条件建立的FPA检测148份布病阳性血清和155份布病阴性血清,结果敏感性为98.6%,特异性为98.7%。对400份临床样本的比对检测显示,研究建立的FPA方法与进口商品化试剂盒的总符合率为94.0%。【结论】研究建立的布鲁氏菌PFA抗体检测方法具有良好的特异性和敏感性,可作为一种重要的布病诊断快速诊断方法。
- 孙翠丽程汝佳张阁程君生朱良全蒋卉丁家波
- 关键词:布鲁氏菌特异性敏感性
- 小鼠品系、性别及体重对猪丹毒活疫苗(G4T10株)安全性评价的影响
- 2021年
- 猪丹毒活疫苗(G4T10株)用小鼠进行安全性检验时存在结果不稳定的问题,通过对小鼠品系(C57BL/6N、ICR、KM、Balb/c)、性别及体重等因素的系统比较,研究其对商品化疫苗安全性检验结果的影响。结果发现,不同品系小鼠对猪丹毒活疫苗(G4T10株)的安全性检验结果产生影响,使用C57BL/6N小鼠相比其他品系小鼠结果稳定且符合质量标准要求;性别因素对其安全性检验结果无显著影响;ICR小鼠随着体重增加,安全性检验中死亡率降低,但是仍然不符合质量标准要求。研究结果推荐使用C57BL/6N小鼠进行猪丹毒活疫苗(G4T10株)安全性检验,为下一步质量标准修订提供参考了依据。
- 任小侠赵俊杰彭国瑞程君生吴思捷姚文生王团结
- 关键词:猪丹毒小鼠品系性别体重
- 布鲁氏菌A、M因子血清的研制
- 2014年
- 研制牛种布鲁氏菌A因子血清和羊种布鲁氏菌M因子血清,用于光滑型布鲁氏菌特异性种属鉴定。将灭活牛种布鲁氏菌2308株及羊种布鲁氏菌16M株免疫1.5~2 kg家兔各5只制备高免血清。对高免血清采用抗原交叉吸附的方法,制得A、M因子血清,分装冻干后置-20℃保存。微量试管凝集试验结果显示:研制的A因子血清对16M抗原在1∶2.5时无凝集现象,对2308抗原凝集价为1∶320;研制的M因子血清对2308抗原在1∶2.5时无凝集现象,对16M抗原凝集价为1∶160。玻片凝集试验结果显示:研制的A、M因子血清对异种抗原无凝集现象。试验表明,研制的A、M因子血清具有特异性强、效价高的特点,可辅助光滑型布鲁氏菌特异性种属鉴定。
- 张金亚程君生冯宇丁家波王楠皮向成吴竞张东东朱良全毛开荣
- 关键词:布鲁氏菌
- 北京地区犬布氏杆菌病血清学调查被引量:13
- 2009年
- 何丹韦海涛赵景义周桂兰毛开荣程君生施振声
- 关键词:布氏杆菌病血清学调查人畜共患传染病世界卫生组织流产胎儿组织器官
- 布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒敏感性和特异性评价被引量:2
- 2014年
- 为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒(CF-ELISA试剂盒)的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验(iELISA)试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著(P>0.05),Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100%。
- 王楠姚学军马立峰王秀丽程君生蒋玉文赵心力毛开荣
- 关键词:布鲁氏菌病间接酶联免疫吸附试验检测试剂盒
- 布鲁氏菌脂多糖抗原纯化效果的比较
- 2013年
- 在纯度、产率、活性等方面比较了硫酸铵沉淀法、冷甲醇二次沉淀法、酶消化处理法纯化脂多糖(LPS)的效果。考马斯亮蓝染色和琼脂糖凝胶电泳定性分析结果证明酶消化处理和冷甲醇二次沉淀纯化的LPS纯度相近;酶消化处理LPS的产率较高;iELISA活性检测结果比较显示酶消化处理纯化的LPS活性较高,且纯化的全过程活性没有下降。重复性试验结果显示酶消化处理提纯方法的可重复性良好。
- 王秀丽程君生毛开荣丁家波蒋玉文
- 关键词:布鲁氏菌脂多糖纯化
- 多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株被引量:17
- 2010年
- 用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。
- 彭小兵程君生夏业才毛开荣蒋玉文丁家波
- 关键词:布鲁氏菌多重PCR