翟春燕
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院生命医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区的克隆、表达及生物活性分析
- 2010年
- 核因子κB受体活化因子配基是诱导破骨细胞分化、成熟的关键因子,在生物医学研究中应用广泛。本实验以小鼠的骨髓细胞cDNA为模板,采用PCR技术获得小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区基因,并将该基因克隆至His标签的融合蛋白表达载体pET28a(+),经鉴定正确的质粒转化至BL21表达菌株中。通过调节诱导目的蛋白表达的培养温度、IPTG浓度及诱导时间,筛选出重组融合蛋白表达的最佳条件。将纯化后的重组蛋白稀释成不同浓度,刺激小鼠破骨前体细胞Raw264.7细胞分化,经抗酒石酸酸性磷酸酶染色后可见破骨细胞的形成,表明该重组蛋白具有较好的生物活性,可替代商品化的鼠源核因子κB受体活化因子配基。
- 翟春燕刘明耀罗剑
- 关键词：基因克隆原核表达破骨细胞分化
- 小鼠核因子κB受体活化因子配基（mRANKL）活性区的克隆、表达及生物活性分析
- 核因子κB受体活化因子配基/(RANKL/)是诱导破骨细胞分化,成熟的重要因子,在生物学及医学研究中具有广泛的应用。RANKL主要结合到破骨前体细胞的核因子κB活化因子受体/(RANK/)上,启动下游NF-κB,P38,...
- 翟春燕
- 关键词：基因克隆原核表达破骨细胞分化
- 文献传递
