胡瑞 作品数:7 被引量:32 H指数:3 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 经济管理 更多>>
S市农村商业银行政府监管研究 农村商业银行在我国特有的金融体系中一直占据着重要且特殊的位置,自2001年首家农村商业银行改制成立以来,农村商业银行作为国内农村金融机构的代表,已经历经了20多年的发展,根据相关机构数据统计,截至到6月,我国共有银行业金... 胡瑞关键词:农村商业银行 政府监管 应用xMAP液态芯片多重快速检测四种病原微生物的研究 被引量:11 2008年 目的:建立一种多重、快速、特异性好、灵敏度高的病原微生物检测方法。方法:根据GenBank数据库中的小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生性李斯特菌、产气荚膜梭菌、鼠疫耶尔森氏菌基因序列,分别针对ail、hly、cpe、3a基因设计4对引物和4条探针。通过重叠PCR扩增各目的基因并构建重组质粒,以该重组质粒DNA为模板,通过多重PCR同时扩增上述4个基因,建立xMAP液态芯片检测技术,在此基础上对标准菌株基因组DNA进行检测并验证该方法的特异性和敏感性。结果:xMAP液态芯片对质粒DNA和标准菌株基因组DNA的检测结果与多重PCR结果一致。该方法能在3.5 h内同时完成对4种病原菌的检测,特异性好,且敏感性要高于PCR方法,灵敏度最高可达200CFU/ml。结论:xMAP液态芯片技术是病原微生物的多重快速检测的新方法,具有很好的应用价值和前景。 胡瑞 赵金银 陈德坤 刘艳华 高姗 康琳 高艳丽 王景林关键词:病原微生物 小分子GnRH-luffinS重组嵌合毒素的制备及其细胞毒性检测 2008年 目的:制备以小分子丝瓜素(luffin)S2为毒性部分,以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH)为导向部分的重组嵌合毒素GnRH-luffinS,体外检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:重叠PCR方法扩增GnRH-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化。纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒性。结果:成功构建了GnRH-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为93%。GnRH-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为67.19,70.42,84.44和106.25μg/ml,而对CEF无作用。结论:重组毒素GnRH-luffinS对肿瘤细胞有一定的杀伤作用。 刘艳华 康琳 高姗 王俊红 赵金银 高艳丽 胡瑞 王景林关键词:细胞毒性 GnRH-PE Ⅱ-luffinS重组嵌合毒素的制备与细胞毒性检测 被引量:1 2008年 目的:制备以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRH Ⅰ)为导向部分,以绿脓杆菌外毒素的结构域Ⅱ(PEⅡ)为转膜区,以丝瓜毒素luffinS2为毒性部分的重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS,体外实验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:重叠PCR法扩增GnRH-PEⅡ-luffinS的基因,克隆至表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆诱导表达,产物用Ni-NTA亲和层析柱纯化。纯化蛋白经重组肠激酶(rEK)切割去除Trx融合蛋白,XTT法检测重组毒素对HeLa,A549,HepG-2,SP2/0和鸡胚成纤维细胞(CEF)的体外细胞毒作用。结果:成功构建了GnRH-PEⅡ-luffinS的表达质粒,并在大肠杆菌中获得表达,纯化后的纯度为94%。GnRH-PEⅡ-luffinS对HeLa,A549,HepG-2和SP2/0的IC50分别为13.50μg/ml,13.74μg/ml,16.79μg/ml和26.07μg/ml,而对CEF无作用。结论:重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS对肿瘤细胞有较强的杀伤作用。 刘艳华 高姗 康琳 王俊红 赵金银 高艳丽 胡瑞 王景林关键词:细胞毒性 四种病原菌的xMAP液态芯片多重快速检测技术的研究 小肠结肠炎耶尔森氏菌/(Yersinia enterocolitica/)、产气荚膜梭菌/(Clostridium perfringens/)、单核细胞增生李斯特菌/(Listeria monocytogenes/)是三... 胡瑞关键词:小肠结肠炎耶尔森氏菌 产气荚膜梭菌 单增李斯特菌 鼠疫耶尔森氏菌 文献传递 猪转移因子对犬外周血中性粒细胞数量和杀菌活性的影响 被引量:3 2007年 无菌采犬外周血,肝素抗凝,制备不同浓度的粒细胞悬液,分别与不同浓度的大肠杆菌悬液共同培养,采用MTT法测定粒细胞的杀菌效果,确定粒细胞体外培养时杀伤细菌的最优化条件;把不同浓度的猪转移因子(Swine transfer factor,sTF)加入注射sTF前后不同时期分离的犬外周血中粒细胞与E.coli的培养系统中,测定粒细胞的杀菌能力。结果表明,当粒细胞浓度为1.3×106个/mL,E.coli浓度为6×105个/mL时,试验最能反映粒细胞的杀菌效果。当sTF浓度为1.56mg/mL时,对PMN杀菌活性的影响最大;在犬注射sTF后的第2d,中性粒细胞单独杀菌活性最好,并且此时外周血中性粒细胞的数量达到峰值。本研究结果表明,sTF不仅能够增强犬中性粒细胞的杀菌活性,还能增加犬外周血中性粒细胞的数量。 张佩君 胡瑞 陈德坤关键词:中性粒细胞 杀菌活性 多重快速鉴别病原微生物的新技术:xMAP液态芯片 被引量:12 2007年 多指标同步分析(Flexible Multi-Analyte Profiling,xMAP)液态芯片技术是美国Luminex公司近年来开发的一种新型生物芯片技术。这种基于微球的芯片技术能够对单孔内多达100种不同的反应同时进行检测,与固相芯片或片膜芯片相比,具有多重、快速、灵敏度高(可达0.01pg)、重复性好(CV〈5%)以及检测动态范围宽(可达0.2~32000pg/ml)等优点。目前,该技术已被广泛应用于各研究领域,尤其在核酸、蛋白质和其他生物分子的大规模分析中。 胡瑞 王景林关键词:液态芯片 微球 病原微生物