范清堂
- 作品数：98 被引量：300H指数：8
- 供职机构：郑州大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技创新人才工程项目国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 幽门螺杆菌黏附素HpaA蛋白在大肠杆菌中表达及其免疫保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的表达和纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)黏附素HpaA蛋白,研究其免疫活性和对小鼠的免疫保护作用。方法诱导TB1(pMAL-c2X-hpaA)表达H.pylori黏附素HpaA蛋白,Amyloss树脂预装柱进行分离、纯化,Western blot鉴定其免疫学活性;纯化蛋白免疫小鼠后,H.pylori国际标准菌株NCTC11637攻击感染,观察H.pylori定植情况及免疫保护效果。结果获得了高纯度且免疫活性良好的目的蛋白;HpaA蛋白免疫小鼠的保护率为53.33%(8/15),与对照组统计学差异显著(P=0.002)。结论纯化HpaA蛋白对小鼠有免疫保护作用,可作为H.pylori基因工程疫苗的候选组分。
- 黄学勇许汴利段广才范清堂郗园林
- 关键词：幽门螺杆菌小鼠模型免疫保护
- 幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆测序及生物信息学分析被引量：3
- 2007年
- [目的]克隆幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)外膜蛋白omp22基因,并对其进行测序及生物信息学分析,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据。[方法]利用PCR技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增出omp22基因,将其定向插入克隆载体pBluescriptbⅡ,并进行序列测定和生物信息学软件分析其生物学特性。[结果]用PCR方法扩增的omp22基因长度为540bp,编码179个氨基酸,DNAstar和Omiga软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为20kDa,并显示出良好的抗原性和疏水性。[结论]本研究获得了序列正确的幽门螺杆菌omp22基因,为其重组蛋白表达及其相关研究奠定了基础。
- 黄学勇段广才范清堂郗园林黄志刚宋春花
- 关键词：幽门螺杆菌克隆生物信息学分析
- 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测幽门螺杆菌的分子流行病学研究被引量：3
- 2003年
- 代敏段广才范清堂郗园林代丽萍李倩施侣元
- 关键词：幽门螺杆菌分子流行病学
- 肺癌蛋白标志物的筛选、克隆及生物学效应研究
- 张慧珍郭红祥吉顺利杨纪峰杨继要许东范清堂郝艳红金蕾赵向锋吴逸明
- 肺癌是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤，已经成为癌症死亡的主要病因。近年来通过采用控制吸烟及大气污染等措施，发达国家的肺癌发病率有所下降。随着我国社会的进步和工业现代化的进程，对环境造成的污染加重以及吸烟人群的增加，我...
- 关键词：
- 关键词：肺癌蛋白标志物克隆生物学效应
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对小鼠肺细胞DNA的损伤作用被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对小鼠肺细胞DNA的损伤作用。方法:以生理盐水作为阴性对照组,用不同浓度DEHP(5、25、125、625μmol/L)对小鼠肺细胞进行体外染毒,应用单细胞凝胶电泳技术检测肺细胞DNA的断裂程度。结果:当DEHP的浓度为125和625μmol/L时,肺细胞尾部DNA百分含量、尾矩和Olive尾矩与阴性对照组相比均升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:DEHP在体外可造成小鼠肺细胞的DNA断裂损伤。
- 王海雪冯斐斐高留闯巴月范清堂段丽菊
- 关键词：单细胞凝胶电泳肺细胞DNA损伤
- pMAL-C2融合表达幽门螺杆菌HspA-UreB重组蛋白被引量：2
- 2003年
- 代丽萍段广才范清堂
- 关键词：幽门螺杆菌HSPAUREB重组蛋白
- 重症手足口病患儿实验室指标的判别分析被引量：55
- 2014年
- 目的探讨实验室指标在手足口病重症病例诊断中的意义,从检验医学角度分析重症手足口病的发病实质。方法选择50例重症手足口病患儿为病例组,另选同期50例轻症手足口病患儿为对照组,于入院次日晨采集空腹全血样本同时检测白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、中性细胞比率(NEUT%)、淋巴细胞比率(LYMPH%)、单核细胞比率(MONO%)、C反应蛋白(CRP)、T细胞(CD3+)、Ts细胞(CD3+CD8+)、Th细胞(CD3+CD4+)、Th/Ts(CD4/CD8)、NK细胞(CD16+CD56+)、B细胞(CD19+)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3(C3)、补体C4(C4)、红细胞沉降率(ESR)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、降钙素原(PCT)、S100蛋白(S100)、高敏肌钙蛋白T检测(TNT-HS)、总血胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、腺苷脱氨酶(ADA)、前白蛋白(PA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸(HBDH)、肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB),采用Fisher逐步判别分析法对证型与检验指标的相关性进行分析。结果①与轻症组相比,重症手足口病患儿WBC、CD19+、NSE、DBIL和ALB水平较高(P<0.05),而MONO%、CD3+细胞和CD3+CD4+细胞、LDH及HBDH水平较低(P<0.05);②对重症手足口病判别能力较强的7个指标依次为CD19+、NSE、NEUT%、MONO%、DBIL、LDH、ALB,其对判别函数的贡献达100.0%;③重症手足口病的判别方程为:Y1=-190.462-0.102×NEUT%+2.926×MONO%+1.212×NSE+0.622×CD19++8.845×DBIL+6.181×ALB+0.104×LDH。结论①重症手足口病患儿的免疫功能、神经功能及肝脏、心脏功能等均有所改变;②CD19+可能对手足口病重症的诊断具有一定的敏感性;③临床上有可能运用判别方程进行手足口病重症进展的初步判断。
- 隋美丽马晓梅段广才陈帅印张荣光申远方范清堂郗园林
- 关键词：重症手足口病免疫功能肝功淋巴细胞
- 幽门螺杆菌ureB在乳酸菌中的表达和抗原活性鉴定被引量：1
- 2010年
- 在幽门螺杆菌疫苗研究中，尿素酶（Ure）是研究最多、最理想的疫苗候选抗原。目前研究常以减毒沙门菌作为活菌载体，但活的减毒沙门菌在人体及动物体内仍有一定的毒性，而不能用于体质弱的群体如婴幼儿、年老者及免疫缺陷者。以乳酸乳球菌（Lactococcus lactis，L．lactis）作为活菌疫苗载体，可以避免上述问题。
- 陈帅印张荣光段广才范清堂
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗疫苗候选抗原活性鉴定UREB乳酸菌免疫缺陷者
- 卫氏并殖吸虫成虫的特异性诊断抗原被引量：1
- 2003年
- 目的 :寻找诊断并殖吸虫病的特异性抗原。方法 :应用SDS PAGE和Westernblot对卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析。结果 :卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS PAGE后显示 14条蛋白带 ,其中相对分子质量为 5 30 0 0、310 0 0、2 5 0 0 0、16 0 0 0、110 0 0是主带 ;相对分子质量为 5 30 0 0和 340 0 0的条带可与华支睾吸虫病患者血清反应 ;10 80 0 0、94 0 0 0、6 5 0 0 0的条带可与血吸虫病患者血清反应 ;5 80 0 0、5 30 0 0、4 30 0 0的条带可与旋毛虫感染的大鼠血清、小鼠血清及旋毛虫病患者血清反应。 370 0 0的蛋白带只能被斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和并殖吸虫病患者血清所识别 ,而不与华支睾吸虫病、血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清、旋毛虫病患者血清、正常大鼠、小鼠血清及正常人血清发生交叉反应。结论 :卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为 370 0 0的蛋白组分为卫氏并殖吸虫成虫的特异性抗原 。
- 张灯王中全崔晶范清堂毛福荣晋雪香
- 关键词：并殖吸虫病成虫抗原免疫印迹
- 幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB的表达和免疫学活性被引量：4
- 2004年
- 目的:构建表达幽门螺杆菌(H pylori)融合蛋白HspA-UreB 的重组表达质粒,并研究其免疫学活性. 方法:定向克隆方法将郑州分离Hp菌株MEL-HP27的hspA 和ureB基因融合连接入原核表达载体pET30(a),构建重组表达质粒pET-HU27.该质粒转化大肠杆菌BL21后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析融合蛋白HspA-UreB表达情况.Ni2+柱亲和层析纯化融合蛋白,与小鼠免疫血清进行Western blot分析,检测融合蛋白的免疫反应性. 结果:特异PCR法与质粒酶切鉴定证实重组表达质粒pET- HU27构建成功.SDS-PAGE分析显示在82.1 KDa处出现特异蛋白带,占菌体总蛋白的21%,亲和层析法获得纯度为91%的纯化融合蛋白,经免疫小鼠制备的血清可以识别该融合蛋白. 结论:成功构建表达H pylori HspA-UreB融合蛋白的重组表达质粒,表达的融合蛋白具有良好的免疫反应性.
- 代丽萍段广才范清堂郗园林张荣光
- 关键词：融合蛋白幽门螺杆菌免疫反应性免疫学活性SDS-PAGE分析IPTG
