莫春妍 作品数:67 被引量:214 H指数:10 供职机构: 广州血液中心 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广东省医学科学技术研究基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
红细胞疑难与稀有血型检测技术的建立及临床应用 姬艳丽 罗广平 付涌水 骆宏 魏玲 王贞 赵阳 叶欣 夏文杰 莫春妍 温机智 汪传喜 贝春花 戎霞 张润青 该项目属于生物医药高新技术领域。其主要技术内容:在广州血液中心临床输血研究所建立了一系列的血型血清学及分子生物学技术,包括凝胶血型检测卡及不完全抗体快速反应介质试剂的研发、红细胞血型抗原高通量的多重连接依赖式探针扩增(M...关键词:关键词:血型检测 红细胞血型 广州地区类孟买型个体FUT1和FUT2基因的分子遗传学研究 姬艳丽 魏玲 王贞 骆宏 赵阳 张润青 莫春妍 罗广平红细胞血型系统IgG型不规则抗体固相凝集法检测试剂盒的研发 2021年 目的研发基于固相凝集技术的红细胞血型系统IgG型不规则抗体检测试剂盒并评估其性能。方法采用单克隆抗人-RBC抗体包被96孔微板,按100μL/孔加入红细胞悬液形成细胞单层,经过裂解后形成红细胞膜抗原分子单层,加入保护液冷冻干燥后制备成检测用的反应微板;用梯度倍比稀释的多克隆羊抗球蛋白试剂(IgG+C3d/4)与IgG抗-D致敏的O型红细胞反应,筛选构建最佳指示系统;用不同批次的试剂盒检测低效价的IgG抗-D和抗-E,评估试剂盒在保存期内的抗原稳定性;与微柱凝胶抗球蛋白卡、进口同类试剂盒检测不同效价的抗体以测试3者的灵敏度;与进口同类试剂盒对350例血样标本进行检测,以明确2者的检测效能是否一致。结果 20μg/mL的抗人-RBC抗体溶液能够很好的固定红细胞膜抗原分子单层;稀释16倍的多克隆羊抗球蛋白试剂与致敏红细胞构建的指示系统指示效果最佳;试剂盒中冻干的红细胞膜抗原在6个月的保存期内保持稳定;本研究的试剂盒检测灵敏度高于Capture-R Ready Screen试剂盒和抗球蛋白卡;试剂盒与Capture-R Ready Screen对血样标本检测的阳性一致性百分率为98.0%,阴性一致性百分率为99.66%,总一致性百分率为99.43%。结论成功研发了基于固相凝集技术的用于红细胞IgG型同种免疫性不规则抗体检测的试剂盒,该试剂盒具有灵敏度好、保存期长、性能稳定等优势,与进口同类试剂盒等效。 骆宏 罗广平 廖志坚 王贞 王嘉励 张润青 莫春妍关键词:不规则抗体 试剂盒 疑难配血中混合抗体鉴定1例 被引量:5 2012年 目的探讨疑难配血过程中混合抗体的鉴定方法。方法首先鉴定红细胞血型,并对血清进行抗体筛查及鉴定,再利用特定细胞对患者血清进行吸收放散实验分离抗体,最后分别对分离后的抗体进行鉴定。结果患者血型为O型,Jka+b-,CCDee;用O型CCDee,Jkb+的细胞与患者血清进行吸收放散,分离抗体后鉴定结果为抗-cE、抗-Jkb的混合抗体。结论选择合适的细胞进行吸收放散实验分离抗体,可以实现对混合抗体的鉴定,为患者选择相应抗原阴性的血液,保证临床输血安全。 魏玲 罗广平 赵阳 骆宏 姬艳丽 莫春妍 张润青关键词:放散 交叉配血 红细胞不规则抗体致新生儿溶血病血清学特征分析 被引量:10 2021年 目的探讨由红细胞血型不规则抗体引起新生儿溶血病中各类抗体的分布特点及血清学特征。方法对2016—2019年送至广州血液中心红细胞血型参比实验室进行新生儿溶血病检测的标本进行回顾性分析,应用Excel软件对其进行计数、分类及统计。结果在3 465例临床怀疑新生儿溶血病的病例中,实验室结果支持新生儿溶血病2 523例(72.8%),其中ABO溶血2 321例(67.0%),不规则抗体引起的新生儿溶血病202例(5.8%)。在不规则抗体导致的新生儿溶血病中,Rh血型系统抗体185例(91.6%),MNS血型系统抗体14例(6.9%),Diego血型系统1例(0.5%),多个血型系统混合抗体2例(1.0%)。抗体筛查阴性RhD阴性孕妇因注射抗-D免疫球蛋白所致的新生儿放散实验阳性33例。Rh及Diego血型系统新生儿溶血病溶血三项实验均为阳性;MNS血型系统中,由抗-M和抗-Mi(a)引起的新生儿溶血病溶血三项检查存在不同特点;RhD阴性孕妇注射外源性抗-D免疫球蛋白后分娩的RhD阳性新生儿,其直接抗人球蛋白实验可为弱阳性或阴性。结论由红细胞血型不规则抗体所致的新生儿溶血病以Rh和MNS血型抗体不合为主;应重视对不良孕产史孕妇进行不规则抗体筛查,抗体筛查应囊括Dia及Mi(a)抗原,警惕抗-M抗体所致的严重胎儿新生儿溶血病。 莫春妍 廖志坚 张润青 王贞 骆宏 魏玲 罗广平 姬艳丽关键词:新生儿溶血病 不规则抗体 血清学特征 Jr(a-)稀有血型ABCG2^(*) 376T等位基因高分辨熔解曲线检测方法的建立及分布频率研究 被引量:1 2022年 目的 建立针对Jr(a-)稀有血型ABCG2^(*)376T等位基因的高通量分子检测方法,并将其应用于中国人群该等位基因的分布频率研究。方法 设计针对ABCG2基因376位点的特异性引物,利用前期已获得的携带ABCG2^(*)376T等位基因的纯合子和杂合子标本作为阳性对照,不携带该突变的野生型标本作为阴性对照,建立该等位基因的高分辨熔解曲线(HRM)检测方法。应用建立的方法对广州地区献血人群的DNA标本进行筛查,对筛查出携带ABCG2^(*)376T等位基因的标本进行测序确证,以验证HRM方法的准确性。结果 成功建立可检测ABCG2^(*)376T等位基因,并可同时对纯合子及杂合子进行准确分型的HRM方法,在1 560例广州地区献血者中筛查出携带杂合型等位基因个体15例,尚未筛查出携带纯合型等位基因的个体。结论 HRM方法可用于准确筛查ABCG2^(*)376T等位基因并进行分型,该等位基因在中国人群的分布频率约为0.48%(15/3120)。 王贞 贾双双 廖志坚 莫春妍 魏玲 张润青 罗广平 姬艳丽混合抗体型自身免疫性溶血性贫血的输血前试验研究 骆宏 张润青 罗广平 赵阳 魏玲 莫春妍 姬艳丽 王贞Junior血型基因检测技术的建立与1例部分DVI.3型且Jr(a-)稀有血型的鉴定 2024年 目的建立Junior血型基因分型技术,用于Jr(a-)稀有血型的鉴定和筛查。方法选取2021年1月至2021年5月于深圳市血液中心无偿献血的O型RhD+健康受试者(n=1568)和1个疑难交叉配血家系(n=3),共1571例,为研究对象。用血清学检测技术进行先证者血型鉴定、意外抗体鉴定以及抗体效价测定。用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术进行先证者RHD基因分型。建立ABCG2基因编码区测序和PCR-SSP基因分型技术,对先证者及其家系成员进行基因型检测,并在深圳地区无偿献血者人群(n=1568)中开展Jra抗原阴性的稀有血型献血者筛查。结果先证者ABO血型为B型,RhD血型为部分D(RHD*DVI.3/RHD*01N.01),Junior血型Jra抗原为阴性,血浆存在抗-D合并抗-Jra。ABCG2基因测序发现先证者等位基因型为ABGG2*01N.01/ABGG2*01N.01[c.376C>T(p.Gln126X)纯合变异],为亚洲人群中最常见的Jr(a-)血型等位基因。在深圳地区无偿献血者人群中进行筛查,无Jr(a-)稀有血型献血者检出。通过杂合子的统计分析,发现ABCG2*01N.01(c.376T)的等位基因型频率约为0.45%,这一分子背景的Jr(a-)稀有血型在深圳地区的出现频率约为0.2‰。结论本研究发现国内首例部分DVI.3型且Jr(a-)稀有血型,并成功建立Junior血型ABCG2基因编码区测序以及PCR-SSP基因分型技术。 梁爽 莫春妍 刘笑阳 姬艳丽 梁延连 吴凡 罗广平 苏宇清关键词:血型 基因分型 Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断及特殊反应分析 被引量:10 2012年 目的探讨Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断和特殊试验结果分析。方法收集Rh系统新生儿溶血病标本12例,母血标本12例,测定其ABO和Rh血型。新生儿标本行溶血病3项实验,新生儿血清、放散液、母血清行不规则抗体筛选和鉴定实验,并测定相应抗体的效价。结果有1例患儿标本RhD血型放散前定型为阴性,放散后为阳性;患儿标本溶血病3项实验均阳性;引起溶血病的抗体中,IgG抗-D 9例,IgG抗-E检出2例,IgG抗-c合并抗-D1例;母血清中的IgG抗-D效价介于128~2048,IgG抗-E效价介于64~256;患儿血清中游离的IgG抗-D效价介于2~512,IgG抗-E效价介于4~32。结论直接抗人球蛋白实验和放散实验对于诊断Rh系统溶血病具有重要意义;特殊反应要综合分析处理,获取真实结果;临床输血或换血治疗时,要根据患儿体内的抗体情况进行血液选择。 骆宏 莫春妍 张润青 赵阳 姬艳丽 魏玲 罗广平关键词:新生儿溶血病 RH血型 直接抗人球蛋白试验 输血 罕见抗-Di^(b)致严重胎儿新生儿溶血病的实验室检测与相关研究 2024年 目的对1例高频抗体导致的胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)进行检测、鉴定及配血。方法对患儿进行新生儿溶血试验,对母亲进行血清学意外抗体鉴定,并对母亲红细胞进行常见高频抗原鉴定;对检出抗体进行IgG分型检测,并用流式细胞术进行单核细胞体外吞噬致敏红细胞试验,以检测抗体相关的吞噬率;对患儿母亲、父亲及舅舅进行相关红细胞血型基因测序;利用稀释的母亲血浆和抗人球卡法,在献血者中进行大规模相合血液的筛选。结果产妇鉴定为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Di b(效价512)并导致了严重的HDFN;抗-Di b亚型分型为IgG1和IgG2型,单核细胞体外吞噬效率为88.83%(74.7/84.09);产妇亲属中没有相合献血者,后续从5520名献血者中筛选到2例Di(b-)相合血液,患儿接收输血治疗后康复出院。后续在51334名献血者中筛查到17名Di(b-)献血者,该数据表明Di(b-)在广州地区献血者中的分布频率约为三千分之一(0.033%,17/51334)。结论综合利用血型血清学及分子生物学方法诊断了抗-Di b所致的严重HDFN,建立了1种有效大规模筛查Di(b-)稀有血型的方法并找到相合血液,为建立Di(b-)稀有血型库奠定了基础。 廖志坚 贾双双 温机智 莫春妍 邵媛 张润青 罗广平 姬艳丽