裴晓林
- 作品数：29 被引量：21H指数：2
- 供职机构：杭州师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金杭州市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学化学工程农业科学更多>>
- 腈水合酶热稳定性与其结构特征关系的研究
- 王加跑郭为甄晓婷裴晓林
- 分子伴侣GroEL/ES和DnaK/J-GrpE促进重组钴型腈水合酶的功能表达
- ＜正＞腈水合酶（Nitrile hydratase,EC 4.2.1.84）是微生物细胞降解腈类物质的关键酶,可以催化水合反应生产高附加值的酰胺。该生物转化反应条件温和、效率高和副产物少,已被应用于工业中丙烯酰胺、烟酰胺...
- 裴晓林吴坚平
- 文献传递
- 拟南芥醇腈酶基因在大肠杆菌中的表达优化及酶学性质分析
- 2017年
- [目的]优化重组醇腈酶在大肠杆菌(Escherichia coli)中的表达工艺,考察其酶学性质。[方法]基于密码子的偏好性,对拟南芥(Arabidopsis thaliana)醇腈酶基因进行密码子优化,克隆该基因到表达载体p ET-28a(+)上,构建重组质粒p ET-28a(+)-HNL-At。采用单因素法优化表达工艺,Ni柱亲和层析纯化目的蛋白,紫外荧光光度法考察酶学性质。[结果]通过IPTG诱导成功实现来源于拟南芥醇腈酶基因在大肠杆菌中的重组表达,对诱导条件优化后,发酵液中重组酶活力达到29.3U·mL^(-1),较未优化前提高68%。通过Ni柱亲和层析对目的蛋白进行纯化,经SDS-PAGE分析重组醇腈酶相对分子质量约为30kDa。通过酶学性质分析,最适反应pH为5,最适反应温度为30℃,比酶活为213.9U·mg^(-1)。[结论]实现重组醇腈酶在大肠杆菌中的高效表达,优化工艺简单可行,酶学性质表征正确,为进一步的酶法制备手性氰醇类化合物奠定基础。
- 缪江林静洪裴晓林俞冰
- 关键词：拟南芥大肠杆菌酶学性质
- 一种重组耐热醛缩酶基因工程菌及其应用
- 本发明提供了一种耐热醛缩酶的基因工程菌株及其构建方法，并优化其高密度培养生产方法，所述重组耐热醛缩酶基因工程菌，由如下方法获得：构建含有醛缩酶基因(Dera)序列的重组质粒，将重组质粒转化至宿主细胞中，筛选阳性克隆，获得...
- 谢恬裴晓林王秋岩黄黎锋李诚璐谢开林
- 文献传递
- 短链脱氢酶CPE基因、编码酶、载体、重组工程菌及应用
- 本发明公开了一种短链脱氢酶CPE基因、基因编码酶、载体、重组工程菌及基因编码酶在不对称还原羰基化合物中的应用，本发明短链脱氢酶CPE的转化率和e.e.值都较高，同时Km值比较低的还原酶，可以在底物浓度较低的情况下保持较长...
- 殷晓浦谢恬王秋岩谌容裴晓林曹丹赵淑娟
- 文献传递
- 一种腈水合酶基因、编码酶、载体、工程菌及其制备酰胺化合物的应用
- 本发明公开了一种腈水合酶基因、编码酶、载体、工程菌及其制备酰胺化合物的应用，所述重组腈水合酶基因由SEQ ID NO.2所示α亚基、SEQ ID NO.3所示β亚基和SEQ ID NO.4所示活化元件依次连接构成；本发明...
- 裴晓林王秋岩杨立荣吴坚平
- 文献传递
- 酮还原酶LEK、编码基因、突变体及应用
- 本发明公开了一种酮还原酶LEK、编码基因、突变体及在生物催化制备（R）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用，所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列95%以上同源性，酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK...
- 殷晓浦谢恬叶婷婷沈凌宏曹丹王秋岩谌容裴晓林
- 文献传递
- 一种金属有机框架-腈水合酶复合物及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种金属有机框架‑腈水合酶复合物及其制备方法和应用，属于生物催化技术领域。所述制备方法包括：将六水合硝酸钴溶于钴依赖型腈水合酶溶液中，再与2‑甲基咪唑水溶液混合，反应制得所述金属有机框架‑腈水合酶复合物。利用...
- 裴晓林吴益锋王加跑
- 文献传递
- 酮还原酶LEK突变体及应用
- 本发明公开了一种酮还原酶LEK突变体及在生物催化制备（R）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用，所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列，酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK氨基酸位点第209位的S突变...
- 谢恬殷晓浦叶婷婷沈凌宏曹丹王秋岩谌容裴晓林
- 文献传递
- 嗜热微生物中获取耐乙醛变性醛缩酶被引量：2
- 2010年
- 在催化他汀药物中间体合成中,对高浓度乙醛底物的耐受是醛缩酶的重要应用性质.通过克隆并在大肠杆菌中过表达了来源于嗜热微生物Geobacillusthermodenitrificans的耐热醛缩酶(DERAGth),该蛋白质序列长度为223aa,对应的分子量为25.0kD.初步酶学性质表征结果表明,该酶对天然底物2-脱氧核酸-5-磷酸的活力19.3U/mg,最适pH为7.5,最适温度为60℃.在40—100℃保温10min的结果表明,DERAGth具有较好的热稳定性,在60℃下10min活力仍保持100%.对乙醛耐受的实验表明,该酶在300mmol乙醛中25℃保温2h,剩余活力高于40%.连续醛缩活力对比实验结果表明,该酶的连续醛缩活力远大于来源于常温微生物的大肠杆菌醛缩酶.
- 李铖璐杜鹏飞裴晓林吴慧丽谢开林王秋岩
- 关键词：嗜热酶
