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正常和视神经损伤后Nogo(N-18)在金黄地鼠视网膜的表达被引量：5: 2003年; 目的　观察Nogo A蛋白在金黄地鼠视神经受损后不同时间点视网膜各层的表达 ,探讨Nogo A蛋白的分布。　方法　采用眶内眼球后 2mm视神经切断术 ,动物分别存活 3d、5d、7d后 ,取眼球固定、冰冻后做水平切片 ,分别进行Nogo(N 18)抗体的免疫组织化学染色 ,显微镜观察Nogo A蛋白的表达。　结果　在视网膜各层均有不同程度的Nogo A蛋白表达 ;存活 3d、5d、7d后在节细胞层表达强烈 ,其中 3d的反应最明显 ;随着存活时间的延长 ,Nogo A蛋白表达的节细胞层细胞数量逐渐下降。　结论　Nogo A蛋白并非神经胶质所特有的分泌物质 ;视网膜Nogo A蛋白表达的分布范围和表达程度与视神经受损后的时间相关。; 雷季良杨磊赵君朋刘斯魏泽峰于恩华; 关键词：视神经损伤 NOGO蛋白视网膜节细胞

荧光共振能量转移技术阳性参照质粒的构建及应用被引量：2: 2015年; 目的构建青色荧光蛋白(CFP)基因和黄色荧光蛋白(YFP)基因相连接的真核表达载体pYFP-CFP,并检测融合蛋白CFP-YFP的FRET转移效率,为FRET技术提供阳性参照物。方法利用基因重组法,以带有CFP基因序列的质粒(p CFP)为模板,扩增CFP基因并插入黄色荧光蛋白载体(pYFP)的多克隆位点中,构建真核表达质粒pYFP-CFP。经细胞转染后,使其表达CFP和YFP相连的融合蛋白。在激光共聚焦显微镜下采集FRET信号图和FRET转移效率(EFRET)的计算,并比较和分析表达CFP-YFP的阳性细胞与CFP和YFP共表达的阴性细胞。结果真核表达质粒pYFP-CFP构建成功,并在细胞质中表达,这与p CFP和pYFP共转染的细胞中荧光蛋白的分布略有不同,后者在细胞胞质和细胞核中均有表达。统计结果显示表达融合蛋白的阳性组EFRET明显高于共表达的阴性组,差异有统计学意义。结论融合荧光蛋白分子的青色和黄色蛋白之间具有10个氨基酸残基相连,符合FRET现象发生的条件,能够采集到很强的FRET信号,可作为FRET研究的稳定阳性实验参照。; 金艳燕邓君金良韵肖忠新徐志卿张进禄赵君朋薛冰; 关键词：质粒构建荧光共振能量转移

激光共聚焦扫描显微镜和透射电镜观察大鼠纹状体内谷氨酸能突触连接的对比观察被引量：1: 2011年; 目的探讨使用激光共聚焦扫描显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)观察大鼠纹状体内谷氨酸能突触连接的方法的可行性。方法 12只正常大鼠分为两组,6只大鼠进行纹状体中等棘刺神经元的CM-DiI单细胞标记,然后Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporter 1,VGluT1)免疫荧光标记,LSCM层扫后三维重建,观察VGluT1阳性位点在中等棘刺神经元树突上的分布。另外6只大鼠用TEM观察不对称性突触在纹状体神经元树突上的分布。对两种方法的结果进行比较。结果用LSCM和TEM方法观察到的纹状体神经元上谷氨酸能突触连接分布情况一致,没有统计学差异。但LSCM更具优越性的是,可以对图像进行三维重构,从而有利于对神经元之间突触连接的空间分布观察和定量分析。结论神经细胞荧光标记技术结合LSCM观察是考察纹状体神经元上谷氨酸能突触连接的有效方法。; 蔡青姬曼张进禄赵君朋; 关键词：透射电镜免疫荧光染色突触

生物医学大型仪器分析教学改革的探讨被引量：7: 2010年; 提高生物医学专业学生对大型仪器的掌握和应用能力是培养具有创新能力的高素质人才的需要。本文通过分析生物医学大型仪器分析教学当前存在的问题,提出整合教学内容、改革实验教学、建立专业的教师队伍和引进先进的教学方法等教学改革设想。; 薛冰赵媛媛赵君朋张进禄王晓民; 关键词：教学改革

大型仪器设备信息管理系统的分析与设计被引量：5: 2012年; 为了建立一个适合我校情况的大型仪器设备共享网络管理系统,本文在充分调研和分析我校大型仪器设备使用和管理现状的情况下,设计了大型仪器设备共享网络管理系统的实现方案,以指导系统的开发。使系统使用方便、便于维护和管理并能可持续发展正是本文所研究的。; 赵媛媛张进禄薛冰赵君朋邓帅焦汝娟; 关键词：大型仪器共享管理网络

基因结构分析软件对实时定量PCR引物进行设计和筛选: 2015年; 目的:以人丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)基因结构为例,利用不同生物相关软件分析、设计和筛选合适的定量PCR引物。方法:利用NCBI的Gene数据库查找人MAPK3基因的参考序列、Uni Gene数据库查找标准参考序列;并用在线软件如Spidey,UCSC,Ensembl等分析基因结构;利用Primer3,Oligo6,IDT等软件进行引物设计;用MFOLD程序分析基因二级结构后,选择引物可定位的外显子位置;利用电子PCR进行引物扩增特异性的检验;最后通过实验检验引物的扩增效果。结果:从程序软件推荐的引物列表中筛选出一对能特异扩增人MAPK3基因的引物。结论:基因结构分析软件有助于定量PCR引物的设计。; 赵焕英赵君朋方霄杨颖张进禄; 关键词：基因结构引物实时定量PCR

介绍一种外泌体负染色的改良方法被引量：1: 2020年; 目的为在透射电镜下观察研究外泌体结构形态提供负染色方法.透射电镜是观察鉴定外泌体结构形态的重要研究手段.因常用负染色方法有很多种,包括醋酸双氧铀、磷钨酸、钼酸铵等染色对其外泌体负染色,且技术步骤也均有不同.方法本文介绍的方法是以传统醋酸双氧铀染色方法作为对比,介绍一种针对外泌体改良后的负染色方法并与之进行比较.结果与结论改良后的负染色方法外泌体的双层膜结构清晰,其杯托状结构清晰可见,且背景干净,反查效果佳.; 金良韵姬曼孙竹林杨慧陈大兴赵君朋; 关键词：负染色外泌体

GAP-43高表达转基因小鼠的建立被引量：1: 2013年; 目的构建GAP-43(growth associated protein-43)高表达转基因小鼠,为进一步研究GAP-43对神经发生及损伤修复的作用机制提供基础。方法构建pCEP4-PDGF-GAP-43转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pCEP4-PDGF-GAP-43注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过Western blotting法检测GAP-43基因表达,并通过免疫荧光的方法对GAP-43表达位置进行定位。结果经PCR方法检测得到转基因阳性鼠,Western blotting结果显示GAP-43蛋白的表达量高于同胞对照组的小鼠且差异有统计学意义,免疫荧光染色结果显示GAP-43阳性反应物弥散分布于大脑皮质和海马中,且特异性存在于神经元中。结论外源基因GAP-43在小鼠基因组中得到整合并稳定遗传,为神经损伤修复及神经发育的相关研究提供了有价值的动物模型。; 黄蕊赵君朋文玉军徐群渊; 关键词：GAP-43 转基因小鼠

一种适用于蚊类扫描电镜样品简便快速的制备方法被引量：3: 2017年; 本文介绍一种适合蚊类研究的扫描电镜样品制备方法。以库蚊为样品,用四氧化锇直接单固定处理,适当缩短脱水时间,改进临界点干燥前的制样程序。此方法观察效果良好,提高了样品制备质量,为蚊类扫描电镜样品制备提供了一种简易而快速的方法。; 姬曼赵君朋; 关键词：库蚊扫描电镜

人乳牙牙髓干细胞全蛋白质非胶分级分离电泳分析被引量：2: 2016年; 目的对人乳牙牙髓干细胞全蛋白质进行非胶分级分离电泳,并用液质联用质谱分析所得蛋白质组分。方法对人乳牙牙髓干细胞进行裂解,将所得的细胞全蛋白质均分到12孔样品槽里进行非胶分级分离电泳,液相回收电泳后的12个组分,对各组分进行SDS-PAGE分离,并对各组分进行溶液酶切后再进行液质联用质谱分析。结果 SDS-PAGE图谱显示人乳牙牙髓干细胞全蛋白质经非胶分级分离电泳分成了12个不同的蛋白质组分,液质联用对各组分进行分析均成功鉴定到一定数目蛋白质。结论非胶分级分离电泳能将复杂蛋白质样品进行预分离,液相回收分离后样品便于进行液质联用分析。; 胡家李蕾王劲松赵君朋; 关键词：蛋白质组

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赵君朋

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