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丙型肝炎病毒功能基因在CHO细胞中的表达研究: 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点。近期研究已经证实 HCV 的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响。为了进一步研究 HCV 中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起; 郭佳鄢然徐国东郑从义; 文献传递

酿酒酵母Bud3p轴向出芽功能域的鉴定: 单倍体酿酒酵母的出芽方式为轴向出芽,它总是在前一次完成细胞质分裂部位的旁侧产生新的芽体。酵母的轴向出芽过程由多个蛋白质控制,它们相互作用组织成空间地标,通过信号传递途径最终激活负责细胞极性建立的关键分子Cdc42p GT...; 郭佳张晨仪龚婷高向东; 关键词：酿酒酵母; 文献传递

丙肝病毒全基因组cDNA克隆侵染细胞培养体系的建立被引量：8: 2004年; 以含有丙肝病毒全基因组cDNA的重组质粒(pHCV)为材料,通过基因转染、重组痘病毒辅助使之在HeLa细胞中表达HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养系统.采用RT-PCR,荧光定量RT-PCR,链特异性RT-PCR,免疫印迹,免疫电子显微镜和电子显微镜负染技术跟踪检测HCV的增殖效率,结果显示,该培养体系中有HCV正链RNA的合成和HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达,并组装成直径约47nm的HCV病毒体,病毒体可被偶联有胶体金的抗HCV结构蛋白E2的单抗标记;该体系产生的HCV病毒体滴度达107基因拷贝/mL,远远高于病人血清中的HCV基因拷贝数,也高于迄今报道的任何一种HCV细胞培养体系的病毒滴度.检测结果证明,转染细胞裂解上清中的HCV病毒体可以感染肝癌细胞系Huh7,并在感染细胞中增殖和合成负链RNA中间体,病毒滴度达106基因拷贝/mL.; 姚相杰郭佳郑从义方呈祥屈三甫陈震球李中红李信墙李卫云; 关键词：丙型肝炎病毒全基因组

酿酒酵母Bud4的C端anillin同源区是其控制septin细胞骨架组织和出芽位点选择的主要功能区: 酿酒酵母Bud4在出芽位点选择中有重要作用,负责将轴向出芽地标与septin细胞骨架联系起来,近期研究发现Bud4在细胞周期晚期的细胞质分裂时期能够调控septin组织,然而,Bud4在细胞周期的早期是否也能够调控sep...; 邬欢郭佳周亚婷高向东

丙型肝炎病毒功能基因在CHO细胞中的表达研究: 2007年; 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点。近期研究已经证实HCV的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响。为了进一步研究究竟是HCV中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起主导作用,构建了分别含有HCV Core、E1、E2、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B基因的真核表达质粒,分别转入宿主细胞CHO-K1中,在G418的选择压力下筛选获得稳定表达HCV单个蛋白的细胞系(10株)。PCR和RT-PCR可分别从稳定细胞系中检测到相应的HCV基因的DNA和mRNA,冻存和复苏不会造成HCV基因的丢失。Western-blot检测到稳定细胞系中表达E1,E2和NS5B蛋白,说明HCV基因在CHO-K1中已经形成稳定表达。薄层层析(TLC)结果显示,含有不同HCV基因的稳定传代细胞系中,UDP-葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)活性均发生了不同程度的变化,其中E2和p7的表达使胞内UGCG的活性提高了约1倍,NS2和NS5A则使UGCG的酶活提高了约0.6倍。该稳定细胞系的建立为研究病毒与宿主因子的相互作用及药物筛选奠定了基础。; 郭佳鄢然徐国东郑从义; 关键词：丙型肝炎病毒真核表达稳定细胞系

丙肝病毒全基因组克隆转染细胞体系的初步研究: 2004年; 采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系。RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示:pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm。这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础。; 郭佳姚相杰郑从义方呈祥屈三甫李信墙李卫云; 关键词：丙型肝炎病毒 HCV 全基因组克隆

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郭佳