陈于红
- 作品数：27 被引量：82H指数：6
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- T7启动子促发下的人尿激酶原在大肠杆菌中的高效表达
- 1995年
- 将人工全化学合成的尿激酶原（ｐｒｏ－ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＥＴ３ｄ中，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＬｙｓＳ，经ＩＰＴＧ诱导，获得了占菌体总蛋白１８％的高表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅａｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定，表达产物主要为单链尿激酶，并且在菌体内基本以无活性的包涵体形式存在。经体外交复性，从１Ｌ培养基中可获得３０００００单位的活性原激酶原。
- 董晨陈晓春马忠陈于红夏焱华子春
- 关键词：尿激酶原聚合酶启动子大肠杆菌
- rpoH基因在大肠杆菌中的表达纯化及性质研究
- 陈于红
- 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的药效学研究
- 2004年
- 犬静脉给予重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)1×106IU/kg、5×105IU/kg、2.5×105IU/kg对冠脉血栓产生显著的溶栓效果,栓塞冠脉血管很快出现再通,高、中、低剂量组残存血栓较溶剂对照组分别减少了72.7%、55.6%、42.5%;心肌梗死范围明显缩小.血纤维蛋白原明显降解,凝血酶原时间、凝血酶时间及陶土激活部分凝血酶时间明显延长,但抗凝血酶活性无显著改变.伤口出血量增加,出血时间延长.以上指标与等剂量(5×105IU/kg)的德国BoehringerMannheimGmbH产品Retavase作用相似.离体家兔血小板凝集实验结果表明:重组人K2tPA对家兔血小板聚集功能具有明显的抑制作用.
- 赵专友刘厚孝张菁陈于红张巍朱镇华王石泉刘建宁
- 关键词：药效学溶栓纤维蛋白原血小板聚集心脑血管病
- 一种具有抗肿瘤活性的新型尿激酶原Kringle结构域变体蛋白的研究被引量：1
- 2004年
- 利用PCR技术获得人尿激酶原Kringle结构域基因,将其克隆至具有T7启动子的表达质粒pET29a中,并进而插入plasminogenKringle5一段16肽片段构建了其变体,重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达,其产物以包涵体形式存在.通过体外复性,得到可溶性的prourokinaseKringle及其变体.所得蛋白质经过动物肿瘤模型测活,确定变体蛋白具有抑制肿瘤生长作用.
- 曹中炜丁楅森陈新园周颖江王石泉张菁朱镇华陈于红刘建宁
- 关键词：抗肿瘤活性抑制疗法
- σ^(32)(sigma-32)及其对热应激蛋白的调控
- 1995年
- σ^(32)是由 E.coli rPoH基因编码的分子量为32 kD的热应激蛋白转录调控因子。当热应激或其它应激反应发生时,它迅速激活热应激基因的启动子,大量转录其mRNA,合成热应激蛋白。本文综述了σ^(32)在细胞内的表达及其对热应激基因转录的调控。
- 陈于红华子春
- 关键词：热应激蛋白基因表达调控
- 重组蛋白质纯化技术被引量：21
- 2002年
- 90年代以来 ,基因重组技术得到很大的发展 ,基因工程产品的分离纯化的成本约占其全部成本的 6 0 %～ 80 %,因此重组蛋白的分离纯化技术越来越重要。着重介绍了扩张柱床吸附层析技术 ,径向膜层析技术 ,灌注层析技术 ,液液萃取技术 ,置换层析技术和金属螯合亲和层析技术近年来进展情况以及它们的优缺点和应用范围。
- 陈浩陈于红朱德煦刘建宁
- 关键词：重组蛋白质纯化技术层析色谱
- 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体基因的克隆及工程菌的构建与鉴定被引量：3
- 2004年
- 利用RT PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性.
- 陈于红朱镇华刘蓓钫张菁傅一工王石泉张巍杨庆刘建宁
- 关键词：工程菌质粒稳定性克隆
- 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究被引量：2
- 2004年
- 将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20%,表达产物经体外变复性、TI Sepharose亲和层析、SP Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95%以上,比活大于500000IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准.其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符.同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究.
- 朱镇华孙自勇陈于红张菁王石泉杨庆刘莉莉丁楅森陈新园刘建宁
- 关键词：发酵活化纯化蛋白
- 重组人尿激酶原（pro—UK）的长期毒性
- 2001年
- 方泰惠陈于红等
- 关键词：重组人尿激酶原长期毒性
- T7 启动子作用下人尿激酶原 cDNA 在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化被引量：6
- 1997年
- 化学合成的人尿激酶原ｃＤＮＡ克隆在表达质粒ｐＥＴ１１ｄ中，在Ｔ７启动子的作用下，经０１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中获得表达。其表达量占菌体总蛋白的１５％，表达产物以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，Ｚｎ２＋选择性沉淀，抗体亲和柱层析，及Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ亲和吸附，所表达的人尿激酶原被纯化为单一条带，其比活约１１００００ＩＵ／ｍｇ。
- 彭贵洪马忠薛宇鸣陈于红朱德煦
- 关键词：人尿激酶原T7启动子
