陈娟芳 作品数:9 被引量:39 H指数:4 供职机构: 湖南农业大学植物保护学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
稻曲病菌厚垣孢子壁多糖的提取方法优选 被引量:3 2011年 探究稻曲病菌Ustiloginoidea virens(Cooke)Takahashi厚垣孢子壁多糖的最佳提取方法,为孢壁多糖含量和组成的研究提供基础。采用5种方法提取该病菌黑色厚垣孢子壁多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量。经研究比较,最佳提取方法为复合酶-热水浸提-sevag法,最佳提取条件是复合酶量4%,pH 4,浸提温度70°C,浸提时间120 min,物料比1:75(V/V);在优选的方法和条件下,测定稻曲病菌黑色厚垣孢子壁粗多糖相对得率21.2%,多糖含量72.3%;黄色厚垣孢子壁粗多糖相对得率17.5%,多糖含量66.7%,前者明显高于后者。研究表明复合酶-热水浸提-sevag法的工艺简单、可行,适宜稻曲病菌厚垣孢子壁多糖的测定。 王娜 任佐华 邓林伟 毛莹 陈娟芳 刘二明关键词:水稻 稻曲病菌 厚垣孢子 多糖 稻曲病菌厚垣孢子中cAMP提取条件优选 被引量:1 2013年 探究稻曲病菌(Ustiloginoidea virens(Cooke.)Takahashi)黑色(休眠)与黄色(非休眠)厚垣孢子中的环磷酸腺苷(cAMP)最佳提取条件,为进一步的研究cAMP功能奠定基础。采用超声-水浴法对cAMP进行浸提,按3因素3水平正交设计,用高效液相色谱法检测cAMP含量;在设定V(甲醇)V(0.05 mol/L KH2PO4)=2080、流速为0.8 mL/min、检测波长为254 nm、进样量为20μL的条件下,以黄绿色厚垣孢子为提取样品,其提取cAMP效果最佳组合条件:超声破碎时间10 min(功率400 W、间歇时间2 s),水浴温度80℃,物料比为1100,提取的cAMP为6.827 6μg/mL。在此最佳条件下,测定出黄色厚垣孢子的cAMP为12.805 0±0.533 2μg/mL,黑色厚垣孢子的cAMP为4.171 7±0.097 1μg/mL。此结果表明,由黄色转换为黑色,其厚垣孢子的cAMP含量显著降低。 李媛 任佐华 刘敏捷 杨浪 陈娟芳 刘二明关键词:稻曲病菌 厚垣孢子 环磷酸腺苷 一株辣椒青枯病菌拮抗内生细菌的筛选鉴定与发酵条件优化 被引量:11 2014年 【目的】筛选对辣椒青枯病菌生防效果较好的内生细菌,丰富辣椒青枯病的生物防治菌种资源,为生防制剂的研发生产及进行大田生物防治提供理论依据。【方法】在湖南长沙青枯病发病区采集健康的辣椒植株样品,通过平板稀释分离和划线纯化方法获得内生细菌后采用琼脂扩散法进行拮抗作用测定,筛选出拮抗青枯病菌效果较好的内生细菌,然后通过菌体的形态结构观察、生理生化特性试验及16S r DNA序列同源性分析,对筛选出的细菌进行鉴定,采用正交试验对其发酵条件进行优化试验。【结果】筛选出一株对青枯病菌拮抗作用效果好的内生细菌L009,通过对其形态学、生理生化特性鉴定和16S r DNA序列的系统发育鉴定,该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过正交试验,确定该菌株的最佳发酵条件为:玉米淀粉8%、豆饼粉6%、Na Cl 0.5%、Ca CO30.5%、K2HPO40.08%、p H 7.0、72h、28℃、180 r/min转速。【结论】L009菌株对辣椒青枯病菌具有较好的拮抗作用,具有作为生防制剂的潜力。 王玲 刘二明 周鑫钰 任佐华 陈娟芳关键词:辣椒 青枯病菌 发酵条件优化 稻曲病菌休眠与非休眠厚垣孢子胞壁多糖结构与组分 被引量:1 2012年 为揭示稻曲病菌厚垣孢子壁与厚垣孢子内源性休眠的关系,以典型的休眠型(黑色)和非休眠型(黄色)稻曲病菌厚垣孢子为材料,用液氮研磨,超声破壁后,经复合酶-热水浸提-Sevag法提取胞壁多糖,采用紫外光谱、红外光谱、刚果红实验、气相色谱分析其多糖的结构和组分。结果表明,黑色、黄色厚垣孢子胞壁多糖均含β型吡喃糖苷键,具有三股螺旋构象,为主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖3种单糖组成的杂多糖,黄色厚垣孢子中含有少量的木糖;黑色厚垣孢子壁中葡萄糖、半乳糖和甘露糖的摩尔百分比为58.23∶25.32∶16.46,黄色厚垣孢子壁中葡萄糖、半乳糖、甘露糖和木糖的摩尔百分比为35.48∶30.58∶24.46∶9.45。这两种厚垣孢子壁多糖的组成和比例有明显差异,可能与厚垣孢子休眠有关。 王娜 任佐华 邓林伟 陈娟芳 刘二明关键词:稻曲病菌 休眠 多糖 湖南省稻瘟病菌无毒基因鉴定 被引量:8 2016年 【目的】了解湖南省稻瘟病菌无毒基因组成,为培育水稻新品种及合理布局抗稻瘟病品种提供参考依据。【方法】采用2014年分离自湖南桃江病圃丽江新团黑谷(LTH)上的120个稻瘟病菌单孢菌株室内离体针刺接种于24个已知抗瘟基因的水稻近等基因系(NILs)上,对供试菌株进行无毒基因鉴定。【结果】120个稻瘟病菌含有全部24个无毒基因,在24个无毒基因中,出现频率高于40.00%的有Avr-Pita和Avr-Pish;出现频率在30.00%-40.00%的无毒基因有Avr-Piz、Avr-Piz5、Avr-Pi3和Avr-Pi9;其余无毒基因出现频率均较低,特别是Avr-Piks、Avr-Pikp、Avr-Pib、Avr-Pi12和Avr-Pi11出现频率均低于10.00%。【结论】含抗性基因Pi-ta和Pi-sh的水稻品种可在湖南省推广利用;含抗性基因Pi-z、Pi-z5、Pi-3和Pi-9的水稻品种在湖南推广时应慎重考虑;含抗性基因Pi-ks、Pi-kp、Pi-b、Pi-12和Pi-11的水稻品种不宜在湖南省推广利用。 刘翔 任佐华 陈娟芳 毛锐 戴良英 刘二明关键词:稻瘟病菌 近等基因系 离体接种 无毒基因 水稻纹枯病病情指数预测模型研究 被引量:3 2016年 水稻纹枯病是水稻最重要的真菌性病害之一,准确预测该病的发生对纹枯病的防控具有重要的实践意义。本研究以衡阳地区1995—2013年纹帖病病情指数为基础,基于地统计学分析纹枯病时效性特性,提取时效自变量,并整合气象因子构建支持向量回归非线性预测模型。然后基于非线性多轮末尾汰选,从23个初始自变量中(气温、降水、日照等18个气象因子以及5个时效因子)获得了13个纹枯病诱发因子,并以此构建高精度非线性稻纹枯病发生预报模型。对1997—2013年早、晚稻纹枯病病情指数实施预报,其均方误差MSE为5.97,R^2达到0.831 8。预测结果表明,该模型能准确预报纹枯病的发生程度,可为及时制定纹枯病防治策略提供可靠的指导。 李颖丽 刘二明 任佐华 陈娟芳 刘翔 邹秋霞 黄珍龙 黄守行 李勇峰关键词:水稻纹枯病 地统计学 气象因子 吡唑醚菌酯和甲基硫菌灵对2种辣椒炭疽病菌的室内联合毒力测定 被引量:4 2016年 为了提高甲基硫菌灵的防效,延缓抗药性产生,采用菌丝生长速率法和孢子萌发速率法测定了新型杀菌剂吡唑醚菌酯与甲基硫菌灵不同质量比的混合物在室内对2种主要辣椒炭疽病菌的毒力,并对其联合毒力进行了评价。结果表明:吡唑醚菌酯与甲基硫菌灵质量比1︰2、1︰4、1︰16、1︰32的混合物表现出相加作用;其中质量比1︰8的混合物对红色辣椒炭疽病菌的菌丝和孢子增效系数(SR)分别为1.98和1.93,对黑点炭疽病菌的菌丝和孢子增效系数分别为1.95和2.11,表现为增效作用。 陈娟芳 任佐华 彭伟业 刘翔 邹茜 刘二明关键词:吡唑醚菌酯 甲基硫菌灵 辣椒炭疽病菌 联合毒力 吡唑醚菌酯和甲基硫菌灵复配对辣椒炭疽病的保护和治疗效果 被引量:4 2016年 采用胶孢炭疽病菌孢子悬浮液(1×105个·m L^(-1))针刺接种辣椒感病品种福湘5号的成熟果实,对吡唑醚菌酯与甲基硫菌灵两种单剂及其复配混合物(吡唑醚菌酯与甲基硫菌灵质量比为1︰2,1︰4,1︰8,1︰16和1︰32)的保护与治疗效果进行评价。结果表明:吡唑醚菌酯浓度≥3.00mg·L^(-1)时,它的保护和治疗效果在接种前和接种后施药的平均防治效果能达到81.82%以上;甲基硫菌灵浓度≥16.67mg·L^(-1)时,它的保护和治疗平均防治效果也在81.82%以上;在吡唑醚菌酯∶甲基硫菌灵的5个不同配比中,质量比为1∶8的混合物的保护和治疗作用平均防效最好,当浓度≥3.33mg·L^(-1)时,其平均保护效果达83.12%以上,平均治疗效果在77.92%以上。 陈娟芳 任佐华 刘翔 彭伟业 陈劲 刘二明关键词:吡唑醚菌酯 甲基硫菌灵 辣椒炭疽病 利用SSR分析湖南桃江病圃丽江新团黑谷上稻瘟病菌的遗传多样性 被引量:8 2015年 利用抗瘟水稻品种是防治稻瘟病最有效措施,了解稻瘟病菌遗传多样性是抗病品种合理布局的重要基础。本研究于2014年从湖南桃江水稻抗稻瘟病鉴定中心病圃中广谱高感品种丽江新团黑谷(LTH)上分离了120个稻瘟病菌单孢菌株,利用14对SSR引物对其进行遗传多样性分析。结果表明,在相似系数0.75时,120个菌株可分成32个遗传宗谱,其中L1和L7为优势宗谱,分别含有20和16个菌株,各占总菌株数的16.67%和13.33%;宗谱L03,L04,L02分别含菌株11,11,13个,分别占总菌株数的9.17%,9.17%和10.83%;另27个宗谱分别含菌株1~6个,共占总菌株数的40.83%。对比本课题组2012、2013年对湖南稻瘟病菌群体遗传结构的研究结果,在相同的SSR引物、聚类方法以及相似系数下,其湖南桃江病圃中丽江新团黑谷上的稻瘟病菌遗传宗谱数是有所增加的,表明了该病圃中的稻瘟病菌群体复杂的遗传多样性。 刘翔 任佐华 陈娟芳 倪兰凤 毛锐 戴良英 刘二明关键词:水稻 稻瘟病菌 SSR