陈婷
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：自动化与计算机技术经济管理生物学医药卫生更多>>
- 治疗用质粒DNACTAB纯化工艺的优化被引量：2
- 2013年
- 目的优化治疗用质粒DNA十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)纯化工艺,为其规模化生产奠定基础。方法采用碱裂解法裂解含质粒pEGFP的大肠埃希菌(E.coli)DH5α菌种,在碱裂解液中加入不同终浓度的CTAB及不同终浓度的NaCl、KAc、LiCl、CaCl2、MgCl2溶液,确定CTAB纯化质粒DNA的最佳浓度,并分析盐对质粒DNA选择性释放的影响。分别采用BCA蛋白浓度测定试剂盒、内毒素检测试剂盒和Real time-PCR法检测纯化的质粒DNA中宿主蛋白含量、内毒素含量和细菌基因组DNA含量;通过A549细胞及动物转染试验检测纯化质粒DNA的体外和体内生物活性。结果 CTAB纯化质粒DNA的最佳浓度为0.004%;用NaCl、KAc或LiCl提取的质粒DNA中,RNA均未完全去除,而用CaCl2或MgCl2提取的质粒DNA中,RNA含量(RNA/nucleic acid)均小于1%,CaCl2最佳终浓度范围为0.4～0.5 mol/L,MgCl2最佳浓度范围为0.3～0.4 mol/L;使用0.4 mol/L MgCl2的CTAB法纯化的质粒pEGFP的杂蛋白质、细菌基因组DNA、内毒素和RNA含量均符合FDA对治疗用质粒DNA的要求;纯化的质粒pEGFP DNA回收率达80%以上,且体外生物活性显著高于市售试剂盒纯化的质粒(P<0.05),而体内生物活性与试剂盒纯化的质粒相当(P>0.05)。结论优化了CTAB法纯化质粒DNA的工艺,该方法操作简便,经济高效,纯化得到的质粒DNA各项指标均符合FDA质量标准,且转染基因表达效率较高,质量可靠,适用于质粒DNA的大规模纯化生产。
- 陈婷刘嘉王晓刁勇
- 关键词：十六烷基三甲基溴化铵质粒纯化基因治疗
- rAAV生产及质控关键工艺的优化
- 腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）是一种小的单链无包膜病毒。由于AAV具有无明显致病性、低炎症反应、宿主范围广和转染效率高等特点，是最有希望的基因治疗的病毒载体。已逐步将重组腺相关病毒(r...
- 陈婷
- 关键词：腺相关病毒质粒DNA十六烷基三甲基溴化铵
- 文献传递
- 基于成组技术的石材栏杆柱参数化建模技术研究
- 随着石材行业的快速发展，在建筑安装和生活用具方面，石材异型制品以其高质量、多样化、艺术化的特点得到了广泛应用。其中，石材异型制品中的典型产品——石材栏杆柱，凭借着其古朴自然、雅致大方以及坚实耐用的特点受到了大众的青睐，被...
- 陈婷
- 关键词：成组技术刀具轨迹数控技术
- 文献传递
- 面向企业级的应用中间件InfoFrameAgent研究
- 该文主要研究和实现了一个面向企业级应用的中间件系统.从整体上看,该文可以划分为两大部份,即系统实现技术的介绍,包括中间件技术、XML技术、组件技术、工作流实现技术,以及系统框架的设计分析和具体的实现——InfoFrame...
- 陈婷
- 关键词：中间件工作流
- 文献传递
- 基于带时间窗的快递车辆路线安排问题研究
- 车辆路线安排问题（Vehicle Routing Problem，VRP）已成为近几十年来运筹学领域研究最活跃、成果最精彩的方向之一。由于国际高度重视电子商务的发展，快递行业得以获取广阔市场，进一步促进快递业务量的上升。...
- 陈婷
- 关键词：快递行业遗传算法时间窗
- 化学化工学科查新点的确定和撰写策略探讨
- 颖性、准确性、严密性角度对化学化工课题查新点的撰写进行研究.查新点可以从项目目标、技术方案和效果来把握,根据化工项目特点,结合实际案例,提出了查新点的通用表达模式和新颖特征的提取技巧,为快速提炼查新点提供新思路.
- 陈婷季叶克
- 关键词：查新点特征提取
