陈忠坚
- 作品数：6 被引量：27H指数：2
- 供职机构：浙江大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建及应用
- 本发明提供一种表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建方法及应用，从肝组织中获得hOCT1的野生型基因片段，定点突变获得P341L，M420del两个突变体基因片段，并与质粒载体连接，染入MDCK细胞，经G418抗性筛选，...
- 涂美娟陈忠坚石爱琴孙思源李丽萍曾苏蒋惠娣
- 稳定表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建被引量：2
- 2011年
- 目的建立能稳定表达人有机阳离子转运体1(human organic cation transporter1,hOCT1)野生型及两个突变体的马丁达比狗肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞模型。方法从人肝组织中提取hOCT1野生型基因,经定点突变获得hOCT1P341L,hOCT1M420del两个突变型基因,构建表达质粒pcDNA3.1(+)-hOCT1,pcDNA3.1(+)-hOCT1P341L,pcDNA3.1(+)-hOCT1M420del。将质粒转染MDCK细胞,通过G418筛选获得抗性克隆,并通过hOCT1的荧光底物(4-二甲氨基苯乙烯基)-N-甲基吡啶(ASP+)筛选得到具有较高活性的MDCK-hOCT1细胞。经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及经典底物N-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)的摄取实验,鉴定筛选得到的单克隆细胞株hOCT1 mRNA的表达及功能。结果本实验获得的hOCT1野生型及2个突变体细胞模型与转染空载体的MDCK细胞相比,其hOCT1 mRNA表达量显著增高,对经典底物MPP+的摄取为转染空载体细胞的12.5,13.7,12.0倍,hOCT1抑制剂可显著抑制细胞对MPP+的摄取。结论建立的细胞模型可用于hOCT1抑制剂及底物的筛选。
- 涂美娟陈忠坚孙思源石爱琴李丽萍曾苏蒋惠娣
- 关键词：基因多态性细胞模型
- COMT在木犀草素处置中的作用及甲基化代谢区域选择性研究
- 儿茶酚氧位甲基转移酶(Catechol-O-methyltransferase，COMT;EC2.1.1.6)在体内代谢多种儿茶酚类神经递质和激素(如多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素、2-羟基雌二醇、4-羟基雌二醇等)。自...
- 陈忠坚
- 关键词：木犀草素儿茶酚氧位甲基转移酶甲基化动物模型
- 表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建及应用
- 本发明提供一种表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建方法及应用，从肝组织中获得hOCT1的野生型基因片段，定点突变获得P341L，M420del两个突变体基因片段，并与质粒载体连接，染入MDCK细胞，经G418抗性筛选，...
- 涂美娟陈忠坚石爱琴孙思源李丽萍曾苏蒋惠娣
- 文献传递
- 冰片促进药物透过血脑屏障作用的研究进展被引量：25
- 2019年
- 近年来大量研究表明,冰片具有促进药物透过血脑屏障的作用。本文对该方面研究进展进行综述,发现其特点包括作用药物广泛、存在剂量/浓度/区域依赖性、作用迅速、生理性促进且可逆、双向性等,作用机制包括对抗磷酸糖蛋白(P-gp)、开放血脑屏障上紧密连接、增强细胞膜流动性和胞饮作用、改变脑部神经递质水平,以及上调钙离子(Ca2+)和一氧化氮(NO)、eNOS水平、β平肾上腺素能受体表达等。由此可知,冰片存在多种途径和方式来促进临床药物透过血脑屏障,是具有巨大潜力的协同脑部吸收的药物。
- 陈忠坚陈忠坚章媛杨海燕杨海燕
- 关键词：冰片药物血脑屏障
- 与细胞色素P450酶共表达的细胞模型构建及应用
- 本发明提供一种与细胞色素P450酶共表达的细胞模型构建，将CYPA3A4的表达质粒pcDNA3.1-Hygro-CYP3A4转染MDCK-mock，MDCK-hOCT1细胞，经潮霉素及G418抗性筛选，获得具有稳定抗性的...
- 蒋惠娣涂美娟李丽萍郑世瑞陈忠坚孙思源周慧曾苏
- 文献传递
