陈西钊
- 作品数：146 被引量：328H指数：9
- 供职机构：北京世纪元亨动物防疫技术有限公司更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家科技支撑计划国家社会公益研究专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 北京地区猪圆环病毒3型感染的检测及基因组遗传变异分析被引量：9
- 2018年
- 旨在了解北京地区猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律,为PCV3的防控提供参考依据。采集北京地区规模化养殖场73份临床表现为繁殖障碍和呼吸系统疾病的组织样品,对其中的PCV3进行检测和测序。根据PCV3全基因组序列设计3对特异性引物,从患PDNS的断奶仔猪内脏组织中扩增PCV3全基因序列片段,克隆到pMD19-T载体中,经测序、拼接获得PCV3全长cDNA序列,利用DNAStar和DNAMAN生物软件对全基因组进行遗传变异分析。结果:北京地区PCV3感染率为30.1%(22/73),PCV3全基因组长2 000bp,GenBank序列登录号为MG546667,将该病毒命名为PCV3/CN/BJ-YH2016。其基因组有3个开放阅读框(ORF),其中两个ORF编码的蛋白与圆环病毒的复制相关蛋白(replication-associated protein,Rep)和衣壳蛋白(capsid protein,Cap)同源。PCV3/CN/BJ-YH2016与NCBI上30株PCV3基因组序列相似性为98.6%~99.3%,Rep蛋白氨基酸序列与美国毒株PCV3-US/MO2015(KX778720)的相似性最高(为100%),与中国毒株PCV3/CN/Guangdong-SG1/2016(MF589105)相似性最低(为95%),有16个氨基酸变异,全部集中在5-23位氨基酸。Cap蛋白氨基酸序列与美国毒株2164(KX458235)的相似性为100%,与其他毒株均有1~4个氨基酸发生变异,其中与PCV3-US/MO2015毒株相比变异位点分别位于24、26、56、100aa。以上试验结果表明,成功从患断奶仔猪多系统衰竭综合征仔猪体内克隆了PCV3全基因,并完成了序列分析,这些数据将为研究这种新型病毒——PCV3的遗传变异和流行病学特征提供分子生物学依据。
- 孙明马君乔明明刘巧荣田新生杨欣艳孙胜永陈西钊
- 关键词：全基因
- 犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究。方法采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35 kD蛋白。Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性。结论在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别。
- 张云霞丁银巧赵铁柱杨璐孙明曹振王传彬陈西钊田克恭
- 关键词：毕赤酵母真核表达
- PRRSV经典株与高致病性变异株双重实时荧光RT－PCR鉴别检测方法
- 本发明公开了一种鉴别检测PRRSV经典株与高致病性变异株的双重实时荧光RT－PCR方法，以及用于该方法的针对PRRSV经典株与高致病性变异株的RT－PCR扩增引物和探针。本发明的方法与现有技术相比，具有快速简便、特异性强...
- 田克恭陈南华陈西钊遇秀玲王传彬曹振
- 文献传递
- 日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验方法
- 本标准规定了日本乙型脑炎病毒反转录聚合酶链反应试验的技术要求。本标准适用于动物脑组织中日本乙型脑炎病毒核酸的检测。
- 王宏伟孙明王传彬陈西钊田克恭
- 关键词：畜牧业家畜疾病检疫
- 文献传递
- 猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价被引量：1
- 2021年
- 以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。
- 周景云刘百红刘雪微杨欣艳李宝春陈西钊
- 关键词：猪瘟净化
- 一种犬免疫球蛋白的分离纯化方法及其应用
- 本发明涉及一种犬免疫球蛋白的分离纯化方法及其应用，所述分离纯化方法包括：将犬血浆的离心上清液依次进行阳离子交换层析和疏水层析，得到犬免疫球蛋白。本发明所涉及的犬免疫球蛋白的分离纯化方法创造性地将预处理后的健康犬血浆仅通过...
- 罗坚陈西钊黄永东冯雪刘巧荣马君
- 文献传递
- 一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用
- 本发明公开一种O型口蹄疫病毒人工重组抗原及其制备与应用，属于生物制剂领域。所述人工重组抗原的氨基酸序列包含如Seq ID No.4所示的肽段。所述人工重组抗原的氨基酸序列具体如Seq ID No.5所示。本发明还请求保护...
- 孙明田克恭王宏伟王传彬遇秀玲陈西钊曹振刘巧荣
- 文献传递
- H7N2禽流感病毒分离株研究:Ⅰ.两株鸡源H7N2禽流感病毒分离鉴定
- 采用鸡胚培养法,从病鸡组织中获得了两株分离物,均可凝集鸡红细胞;经纯化后负染作电镜观察,可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约90～100nm;经血凝抑制试验和神经氨酸酶试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒,分别命名为A/Ch...
- 王传彬田克恭王宏伟孙明遇秀玲金萍陈西钊
- 关键词：禽流感病毒HA1基因
- 文献传递
- 北京地区犬、猫SARS病毒及其常见病毒检测报告
- 自2003年4月初北京进入“非典”高发期以来,为了搞清犬、猫等宠物是否携带SARS病毒,找出造成宠物发热、咳嗽的真正病因,同时检测犬、猫等宠物疫苗免疫的效果,我们先后对从北京各大宠物医院采集的有发烧、咳嗽等症状的犬、猫病...
- 田克恭孙明赵铁柱李纯玲陈西钊王宏伟
- 文献传递
- 牛γ干扰素在CHO细胞中的表达和鉴定
- 2013年
- 为获得高活性的牛γ干扰素(BoIFN-γ),依据GenBank中已发表的BoIFN-γ基因序列(M29867)进行人工合成,应用PCR方法扩增该基因,将其插入pIRESneo构建真核表达质粒,转染到CHO细胞中,用SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白的表达,并用牛γ干扰素检测试剂盒鉴定其反应原性。结果:成功的构建了pIRES-BoIFN-γ真核表达载体,实现了其在CHO细胞上的表达。表达产物经γ-干扰素检测试剂盒检测具有良好的反应原性,为研究BoIFN-γ结构与生物学功能以及建立牛结核BoIFN-γ检测法奠定了基础。
- 冯向辉李文合孙明刘巧荣乔明明申屠芬琴杨璐陈西钊
- 关键词：CHO细胞
