- 人巨细胞病毒cDNA文库的构建、鉴定及pp65阳性克隆筛选被引量：3
- 2004年
- 为进一步进行人巨细胞病毒 (HCMV)后基因组功能的研究 ,以及为疫苗分子和早期诊断试剂的研制提供有效工具 ,从HCMVAD1 69株感染 96h的HF细胞中提取HCMV的mRNA ,逆转录合成cDNA片段 ,重组入λgt1 1EcoRI酶切位点之间 ,包装蛋白包装 ,构建HCMVAD1 69株基因组cDNA表达文库。结果表明 ,初始HCMVcDNA文库容量为 3 6× 1 0 6,重组率为 96% ;HCMV鼠多克隆抗血清筛选出 1 68个HCMV阳性克隆 ;地高辛标记pp65特异性寡核苷酸探针原位噬斑杂交筛选出 3 4个pp65阳性克隆 ,再经PCR扩增 ,筛选出 2个pp65阳性克隆 ;pp65PCR扩增产物进一步被Southernblotting证实 ;3 端测序比较 ,同源性为 98%。为进一步克隆。
- 韩俊李艳秋姜永中余莉王明丽
- 关键词：人巨细胞病毒PP65CDNA表达文库
- HCMV AD169株感染复数(MOI)的确定被引量：2
- 2001年
- 目的 通过蚀斑形成试验测定人巨细胞病毒(HCMV)AD16 9株的蚀斑 (PFU)确定其感染复数 (MOI)并纯化病毒。方法 HCMVAD16 9株接种 7～ 8代HF细胞单层 ,37℃吸附 ,0 0 0 7琼脂糖覆盖层 ,1周后加第 2层覆盖 ,2周后用 0 0 0 0 5结晶紫染色 5min ,记数 ,计算PFU及MOI;染色前 ,镜下挑取蚀斑保藏并鉴定。结果 蚀斑经 0 0 0 0 5结晶紫染色在HF细胞单层上呈紫色 ,很易识别 ,散在均匀分布 ,着色深 ,与周围区域界限明显 ,MOI =3 41× 10 4 。结论 探索出HCMVAD16 9株感染复数 (MOI)
- 韩俊王明丽姜永忠詹以森李艳秋余莉
- 关键词：巨细胞病毒属提纯HCMV
- 人巨细胞病毒cDNA表达文库的构建及pp65阳性克隆的筛选
- 目的：构建人巨细胞病毒（HCMV）AD169株及地方株基因组cDNA表达文库，
为进一步研究其基因组的结构特点及功能创立基本条件。方法：从MOI=10人巨
细胞病毒（HCMV）...
- 韩俊
- 文献传递
- 胶原海绵与兔软骨细胞体外三维培养的实验研究被引量：8
- 2002年
- 目的 观察用人胎盘Ⅰ型胶原海绵作为兔软骨细胞体外三维培养支架时 ,软骨细胞形态学特征和功能及该支架的吸附性和组织相容性。方法 将新生兔原代和传代软骨细胞接种于人胎盘Ⅰ型胶原海绵进行体外培养 ,用光镜和扫描电镜观察细胞形态和结构及支架的吸附性和组织相容性 ,用免疫组化观察细胞Ⅱ型胶原合成。结果 以胶原海绵作为支架的传代软骨细胞能维持其形态学特征及细胞功能 ,该支架有较好的吸附性和组织相容性。
- 朱如里高学纯王明丽董英海卢晓林韩俊胡勇
- 关键词：细胞培养软骨细胞细胞支架胶原海绵
