韩俊萍 作品数:28 被引量:53 H指数:4 供职机构: 公安部物证鉴定中心 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 政治法律 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
15重快速STR复合扩增体系的构建 被引量:2 2016年 目的建立一套15重快速STR复合扩增体系。方法选择14个常染色体基因座以及1个性别基因座,采用Fast Start Taq DNA聚合酶系统,以DNA标准品9947A为模板,通过筛选扩增条件、选择热启动酶用量、调整引物平衡、优化快速扩增程序、筛选反应缓冲液、选择反应体系以及筛选添加剂等一系列复合扩增实验,比较各条件下等位基因丢失和非特异性扩增情况。结果在以1 ng DNA为模板、0.4μL聚合酶及10×Fast Start高保真反应缓冲液构成10μL快速体系的条件下,32 min即可获得标准DNA全部15个STR基因座的完整分型,无等位基因丢失和非特异性扩增现象,等位基因均衡性良好。同时,5%甘油、0.01%明胶、0.05%明胶和5 mmol/L硫酸铵可作为PCR扩增过程中拟加入的反应添加剂。结论本研究建立的15重快速STR复合扩增体系可以明显缩短反应时间,提高样品检测效率。 韩俊萍 孙敬 欧元 刘鹏 叶健 赵雯雯 王雪倩 张译文 刘耀 李彩霞关键词:法医遗传学 短串联重复序列 聚合酶链反应 一种用于全集成微流控芯片的STR快速个体识别扩增试剂及其应用 本发明公开了一种用于全集成微流控芯片的STR快速个体识别扩增试剂及其应用。本发明基于国内首台自主研发的全集成式DNA现场快速检验仪器Quick TargSeq构建了一套包含20个CODIS STR基因座和1个Amelog... 李彩霞 韩俊萍 叶健微流控芯片电泳及其法医学应用 2015年 在光学性能良好的Brofloat玻璃电泳芯片上,利用自行搭建的共聚焦激光诱导荧光检测系统,通过对芯片管道表面修饰、筛分介质、分离电场强度、进样方式、电泳温度、进样时间等条件的优化,对含15个STR基因座的法医DNA样品进行电泳分离测试实验.通过对芯片电泳条件优化获得了本电泳系统的最佳条件,成功实现8 min内完成DNA样品片段的分离,表明该微流控芯片电泳系统在法医DNA快速分析方面具有良好的应用前景. 韩俊萍 孙敬 庄斌 刘鹏 赵兴春 李万水 季安全 叶健 刘耀 李彩霞关键词:微流控芯片电泳 云南白族、佤族人群18个STR基因座遗传多态性 被引量:1 2015年 本文分别对中国云南地区白族98个、佤族203个健康无关个体进行18个STR基因座遗传多态性调查。采用QIAamp DNA Blood Midi试剂盒提取样本DNA,用DNA Typer19^(TM)试剂盒进行扩增及检测。结果云南白族、佤族人群在18个STR基因座分别检出168和187个等位基因,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。所调查的云南白族、佤族人群18个STR基因座具有较好识别能力。 韩俊萍 谢晓繁 李秀江 魏丽 赵兴春 李彩霞关键词:法医物证学 STR基因座 遗传多态性 白族 佤族 3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响 被引量:1 2011年 目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进行标识。参照龙胆紫染色法,比较0.5、1、2、5、8μl苏木素染液及2、5、8、10、15μl亚甲基蓝染液的染色效果,优化染色条件;并比较优化后的细胞核标识效果。显微操作仪捕获3种染液染色后的细胞进行DNA检验,比较检测结果;并捕获染色10、30、60 min口腔上皮细胞,比较染色时间对DNA检测结果的影响。结果:100μl口腔上皮细胞悬液加入2μl苏木素、0.5μl龙胆紫或5μl亚甲基蓝染液,细胞核均着色明显,与胞浆对比清晰。5个细胞的分离检验结果示有效分型率分别为90%、100%、66.7%,成功分型率为20%、100%、11.1%;龙胆紫、苏木素染色时间(≤60 min)对DNA检测结果无明显影响,而亚甲基蓝染色时间延长导致等位基因丢失等现象加重,影响检测结果。结论:3种染液均可清晰标识细胞核;而龙胆紫染液对LVPCR技术抑制最弱,为三者中较优的细胞核标记物。 朱典 万立华 胡兰 李彩霞 韩俊萍 郝建文关键词:法医物证学 碱性染料 两种DNA族群推断技术在一组家系样本中的比较 2021年 目的使用课题组构建的27-plex SNPs和38-plex InDels两套族群推断体系,检测一组维族与回族通婚家系样本,通过两种体系间的相互印证,以获得更可靠的种族分析结果。方法分别利用两套检测体系,对来自一维族—回族通婚家系的三代成员共16份样本进行检测,推断其族源信息。结果 16份样本在两种体系下的推断结果与样本的实际来源信息基本一致,该家族成员的遗传成分呈现出欧亚混合特征。结论本实验室构建的两种不同遗传标记的族群推断体系可以有效区分洲际人群的祖先来源,通过两种体系的相互印证,可为案件的侦查提供更为准确的科学线索和依据,同时38-plex InDels体系具有操作步骤简单,检测时间短,可以直接扩增等优势。 王庆国 江丽 王文平 张涛 谢何鑫 李唐松 马原 孙文平 韩俊萍关键词:法医遗传学 一种对未知来源个体进行非、东亚、欧洲群体来源分析的方法和系统 本发明提供一种对未知来源个体进行非、东亚、欧洲群体来源分析的方法和系统,所述方法包括提取未知来源个体的DNA;获得所述DNA的42个位点的基因型,所述42个位点包括40个非、东亚、欧洲群体常染色体InDel位点以及DYS... 李彩霞 韩俊萍 赵蕾 江丽文献传递 不同保存时间和不同精子数量精斑样本DNA分型比较 被引量:2 2013年 目的比较不同保存时间和不同精子数量精斑样本DNA分型的效果。方法制备精斑样本,保存10d的样本采用激光显微捕获30、20、15、10、5、1个精子,用于不同数量精子分型比较;保存10d、214d、375d的样本分别捕获30、20、10个精子,用于不同保存时间分型比较。比较各组检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增率,采用χ2检验进行差异比较。结果①不同精子数量分型:捕获10个精子即可得到完整的DNA分型,且随着精子数增多,检出率逐渐提高而等位基因丢失率逐渐降低,30个精子等位基因丢失率为0%,1个精子则可达58.89%;②不同保存时间分型:总趋势是保存时间越短,捕获精子越多检出率越高,10个精子与20、30个精子组比较,均有显著性差异(P<0.05);等位基因丢失率及非特异性扩增率则随保存时间的延长而增加,相同保存时间的不同精子数量组之间和相同的精子数量的不同保存时间组之间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论激光显微捕获精子数目和检材保存时间对DNA分型结果有直接影响。 韩俊萍 胡兰 朱典 杨帆 李艮平 李彩霞关键词:法医物证学 精斑 一种对未知检材进行个体识别和亲权鉴定的方法和系统 本发明提供一种对未知检材进行个体识别和亲权鉴定的方法和系统,该方法包括提取未知检材DNA,获得所述DNA包括14个常染色体STR基因座、2个Y染色体基因座,以及性别决定基因座Amelogenin在内共17个基因座的分型结... 李彩霞 孙敬 韩俊萍 赵兴春 刘鹏文献传递 微流控技术在法医DNA快速检验方面的应用 被引量:15 2016年 微流控芯片技术因其微型化、自动化、高通量、集成化、快速等优势使得实验室研究产生革命性的变化,并在生物化学、医学等诸多领域得到广泛应用,但目前还没有基于微流控芯片技术的国产全集成自动化DNA分析仪。该文总结微流控技术在DNA提取、PCR扩增、电泳分离等DNA检验流程方面的研究现状与进展,尤其是在法医DNA快速检验方面的研究进展,同时介绍国内外全集成式DNA分析的研究状况。全集成与功能化是目前微流控技术研究的主流方向。未来,以微流控芯片为主导的全自动、便携式、集成化的DNA分析系统,将使得法医DNA检验从实验室走进案件现场甚至日常生活,实现真正的快速即时检验。 韩俊萍 孙敬 欧元 叶健 刘耀 李彩霞关键词:全集成