马晓君
- 作品数:18 被引量:50H指数:4
- 供职机构:潍坊医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学化学工程更多>>
- 人caspase-1真核表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的构建人caspase-1真核表达载体,观察其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法分离人外周血淋巴细胞,LPS刺激提取细胞总RNA,RT-PCR方法分别扩增caspase-1两片段S_1、S_2,利用重叠延伸PCR方法(SOE)获得caspase-1全长序列,将其克隆入pIRES_2-EGFP载体,进行茵落PCR、限制性酶谱分析、DNA序列测定。通过jetPEI方法转染HepG2肝癌细胞,倒置相差荧光显微镜下观察其表达情况,RT-PCR分析caspase-1的表达水平。结果从外周淋巴细胞中经RT-PCR分别扩增出365bp和883bp片段,纯化后的PCR产物通过SOE扩增得到一1234bp的条带,与预期序列长度一致。SOE产物与pIRES_2-EGFP经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后连接,茵落PCR鉴定获得数个阳性克隆,质粒经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ限制性酶谱分析酶解出1234bp条带,DNA序列分析证实重组载体中的DNA序列与GeneBank中人caspase-1序列完全一致。将该载体转染至HepG2细胞中,经RT-PCR证实,与转染pIRES_2-EGFP空载体的对照组细胞相比,caspase-1水平明显升高。结论本研究成功构建人caspase-1表达载体pIRES_2-EGFP-caspase-1,该载体能够在人肝癌细胞中高效表达外源基因。
- 李青春张素华马晓君肖伟玲梁淑娟
- 关键词:肝肿瘤真核表达载体CASPASE-1
- 显微数码互动系统在组胚实验教学中的应用被引量:6
- 2010年
- 显微数码互动系统是现代显微形态学教学模式的一次飞跃,使组织胚胎学的实验教学发生了巨大变化。它具有多种功能模式适合组织胚胎学实验教学灵活选择应用,使组胚实验教学方法、教学形式多样化,在提高教学质量方面具有独特优势。
- 马晓君张玉梅汤淑红
- 关键词:显微数码互动系统组织胚胎学实验教学
- 克氏针内固定治疗移位锁骨骨折
- 2008年
- 目的探讨移位锁骨骨折采用切开复位克氏针内固定治疗的方法,总结其临床经验。方法自1998年3月-2005年6月,对68例移位锁骨骨折采用切开复位克氏针内固定治疗,随访61例,占89.9%,随访时间为6-12个月,平均8个月。结果随访的61例中全部骨折愈合。锁骨及肩关节功能恢复情况:优59例,良2例,差0例。结论克氏针内固定治疗移位锁骨骨折创伤小、操作简便、取针方便、手术费用低、愈合率高,是行之有效的治疗手段,值得在临床工作中推广应用。
- 庄宝祥尹友国王丽娜王慧马晓君
- 关键词:内固定移位锁骨骨折
- AKT-糖原合成激酶-3β信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的保护作用被引量:1
- 2016年
- 目的探讨AKT-糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路对SOD1G93A突变N2a细胞的作用及机制。方法选取小鼠成神经瘤细胞系N2a,分别转染p EGFP-WT-SOD1和p EGFP-G93A-SOD1质粒,应用Western blotting和免疫荧光染色方法检测AKT、GSK-3β和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在细胞模型中的表达变化。应用RT-PCR和Western blotting技术检测siRNA沉默AKT后GSK-3β和cyclin D1在SOD1突变N2a细胞中的表达变化,通过MTS方法,检测细胞增殖和存活的改变。结果与p EGFP-WT-SOD1转染的N2a细胞比较,p EGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中AKT及GSK-3β总蛋白在转染后24 h和48 h表达均无明显变化,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1表达均升高。免疫荧光染色结果显示,转染后24 h和48 h,p-AKT(Ser473)、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1在p EGFP-G93A-SOD1转染的N2a细胞中表达均升高。应用siRNA沉默AKT后与对照组相比,在转染后48 h和72h,AKT、p-AKT(Ser473)、GSK-3β、p-GSK-3β(Ser9)和cyclin D1蛋白均降低。MTS实验结果显示,在AKT沉默后72h、96 h、120 h,N2a细胞增殖和活力降低。结论 SOD1G93A突变影响N2a细胞中AKT、GSK-3β翻译后磷酸化修饰及cyclin D1的表达,AKT可能通过调控GSK-3β和cyclin D1影响SOD1G93A突变N2a细胞的增殖和存活。
- 陈燕春管英俊刘永新周风华刘焕彩王巧真马晓君赵春艳
- 关键词:肌萎缩侧索硬化症AKT细胞周期蛋白D1免疫印迹法
- 一种制冰机
- 一种制冰机,包括箱体、制冷机、电机、制冰板和储水槽,箱体内部设有制冷腔和储冰腔,制冷腔内设有制冷机,储冰腔内设置有储冰桶。制冷腔的上方设置有储水槽,制冷腔和储水槽之间设置有电机放置槽;电机设于电机放置槽内。储冰腔的上方设...
- 马晓君
- 文献传递
- 生物技术专业免疫学实验课教学改革的初步实践被引量:2
- 2009年
- 实验课是医学免疫学的重要部分,为了提高生物技术专业实验课的教学质量,适应社会需求,我们结合近几年来的实践教学经验,对免疫学实验课程体系进行了尝试性的改革,取得了较好的教学效果。
- 孙萍马晓君牟东珍梁淑娟
- 关键词:免疫学实验课教学改革
- 一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法
- 本发明公开了一种皮肤间充质干细胞的分离及培养方法,包括以下步骤:1)皮肤组织的获得;2)消化皮肤组织:向PBS溶剂中加入含有0.02%EDTA的0.05%胰蛋白酶溶液,在37℃消化10‑20min,最后,加入含有10%F...
- 马晓君
- 文献传递
- 环磷酰胺对发育中大鼠神经上皮细胞增殖和凋亡的影响被引量:5
- 2009年
- 目的:研究环磷酰胺对发育中大鼠神经上皮细胞增殖和凋亡的影响,进一步探讨其致畸作用的分子机制,为预防人类神经管畸形(NTDs)的发生提供理论依据。方法:将孕鼠随机分实验组和对照组,应用免疫组织化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3在NTDs发生中的表达变化。结果:(1)PCNA免疫组织化学结果,给药后4、8h,实验组神经上皮细胞增殖指数与对照组相比,无显著差异;给药后12、24、48h,实验组与对照组相比,神经上皮细胞增殖指数显著降低。(2)Caspase-3免疫组织化学结果,给药后4、8h,实验组神经上皮细胞凋亡指数与对照组相比,差异均无统计学意义;给药后12、24、48h,实验组与对照组相比,神经上皮细胞凋亡指数显著增高。结论:环磷酰胺可抑制神经上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,导致增殖凋亡比例失衡是神经管畸形发生的重要途径之一。
- 陈燕春管英俊刘焕彩庄宝祥马晓君于丽赵春艳
- 关键词:环磷酰胺神经管畸形凋亡
- 一种超净工作台
- 一种超净工作台,包括工作台、箱体、废液储存箱、抽真空泵和消毒液箱,工作台上方设有背板、侧板和顶板。箱体位于工作台的下方,箱体内设有工具箱、废液储存箱、废液处理箱和消毒液箱,消毒液箱和废液处理箱通过感应阀门相连,消毒液箱的...
- 马晓君
- 文献传递
- 数字切片在组织胚胎学实验教学中的应用被引量:27
- 2010年
- 传统的组织胚胎学实验课以观察玻璃切片为主,玻璃切片在实验教学使用中存在易褪色、不易永久保存和使用时受时间和空间限制等缺陷,利用全自动显微镜扫描系统将玻璃切片制作为数字切片,结合显微数码互动系统和校园网络系统应用于组织胚胎学实验教学,不仅能有效解决优质典型玻璃切片片源不足带来的教学问题,也有利于教师的备课讲解、学生的复习与讨论以及师生间的互动,推动了组织胚胎学实验教学和考试模式的改革。该文主要介绍组织胚胎学数字切片的特点、应用及发展前景。
- 庄宝祥王岱君张圣明马晓君吴洪娟王金平
- 关键词:数字切片组织胚胎学实验教学