黄璐
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:首都师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:北京市教委科技计划面上项目国家自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 烟草丝束蛋白ABD2与微丝的体内体外相互作用
- 2014年
- 微丝骨架在细胞的生命活动中具有重要的功能,而其动态的解聚聚合特性是其实现功能的前提.丝束蛋白(fimbrin/plastin)做为微丝结合蛋白质,是微丝骨架的重要调控因子之一,含有2个肌动蛋白结合结构域,目前对其结合微丝的机制并不清楚.本文以烟草丝束蛋白的肌动蛋白结合结构域2(NtFAbd2)为研究对象,通过原核细胞表达纯化NtFAbd2,利用体外沉淀法分析发现,NtFAbd2能够与微丝结合;利用激光共聚焦扫描显微镜分析发现,在烟草BY-2悬浮细胞内,NtAbd2-GFP与微丝共分布,这些结果为深入分析植物丝束蛋白的作用机制提供了新的数据.
- 梁蒙韩利波孙海涛黄璐陈志玲
- 关键词:微丝
- 粗糙脉孢菌前纤维蛋白Y86和R88位点突变抑制菌丝生长被引量:1
- 2015年
- 微丝骨架在真菌的生长发育过程中发挥着重要的作用,而动力学特性是其实现功能的关键.前纤维蛋白(profilin)是肌动蛋白动态组装的主要调控因子,对其功能研究有助于阐明微丝骨架在真菌生长发育中的机制.本文以丝状真菌模式生物粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)为材料,利用定点突变技术和同源重组技术,分别将前纤维蛋白上肌动蛋白结合位点86位酪氨酸(Y86)和88位精氨酸(R88)进行了单突变和双突变,获得了Y86R、R88E和Y86RR86E前纤维蛋白点突变株.进一步利用平板培养和竞争性生长管培养对点突变株的表型进行分析后发现,与野生型相比,3个前纤维蛋白点突变株的菌丝生长均明显减慢.这些结果表明,前纤维蛋白与肌动蛋白的相互作用对于N.crassa的生长和发育至关重要.
- 孙海涛黄璐陈志玲
- 关键词:前纤维蛋白定点突变菌丝生长粗糙脉孢菌
- 粗糙脉孢菌丝切蛋白的纯化及微丝解聚活性分析被引量:1
- 2022年
- 为探讨粗糙脉孢菌丝切蛋白(NcCof)的生化功能,对其进行纯化和微丝解聚活性分析。序列比对结果表明,NcCof N端第4位丝氨酸(S4)高度保守,推测其是NcCof发挥活性的重要位点,三级结构预测结果表明,它含有5个α-螺旋和6个β-折叠,中间的4个β折叠片处于反平行状态,5个α-螺旋围绕在β折叠片周围,具有典型的丝切蛋白/肌动蛋白解聚因子家族结构特征。利用点突变、亲和层析纯化得到蛋白NcCof、NcCof(S4A)和NcCof(S4D),进一步通过高速共沉淀等技术对其微丝解聚活性进行研究,结果表明,NcCof具有经典的微丝解聚活性,并具有剂量效应,突变蛋白NcCof(S4A)和NcCof(S4D)也具有解聚微丝的能力,但是NcCof(S4D)的解聚活性明显减弱。结果为进一步探讨NcCof调控肌动蛋白动态特性的分子机制奠定基础。
- 黄璐陈菁秋孙海涛李艳红陈志玲
- 关键词:粗糙脉孢菌丝切蛋白肌动蛋白