乔媛媛
- 作品数:73 被引量:226H指数:9
- 供职机构:中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种抗蓖麻毒蛋白的抗体
- 本发明公开了一种抗蓖麻毒蛋白的抗体。本发明所提供的抗蓖麻毒蛋白的抗体,包括轻链可变区和重链可变区,所述重链可变区的氨基酸序列为序列表中序列1的自氨基末端第134-259位氨基酸残基,所述轻链可变区的氨基酸序列为序列表中序...
- 周丽君王欲晓乔媛媛王玉霞王琰贾蓓媛
- 文献传递
- 抗p185单抗5E12Fab段基因的克隆及表达被引量:1
- 2005年
- 目的克隆抗p185单抗5E12的Fab段基因并在原核细胞进行表达。方法用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),以可变区第一骨架区的通用引物从分泌抗p185单抗的杂交瘤细胞系5E12中克隆Fd段和κ链的基因,重组到Fab表达载体中,在大肠杆菌中表达噬菌体抗体和可溶性Fab;根据前导肽序列设计引物,通过PCR介导的定点突变将V区基因氨基端序列恢复为5E12的原始序列;以NIH3T3/erbB-2细胞ELISA法、免疫组化法等进行特异性鉴定。结果以第一骨架区的通用引物从小鼠杂交瘤细胞5E12中克隆到Fd段和κ链的基因,在大肠杆菌中表达出Fab段抗体但无特异性抗原结合活性,分别将Fd段和κ链V区基因的氨基端序列矫正为亲本单抗的原始序列后,恢复了Fab段的抗原结合活性。单独恢复Fd段可变区氨基端序列可恢复抗原结合活性。但同时恢复κ链后活性却有所下降。结论成功构建了抗p185小分子抗体Fab并进行功能性表达,为进一步构建抗p185鼠单抗其他小分子抗体及其人源化改造打下基础;进一步证实抗体氨基端序列对抗体活性的重要性,为今后以PCR方法构建小分子抗体的工作提供了有益的借鉴。
- 张国民陈宇萍王琰乔媛媛安云庆
- 关键词:FAB可变区基因
- 从大容量抗体库中筛选抗蓖麻毒蛋白抗体被引量:3
- 2007年
- 目的:从天然的单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗蓖麻毒蛋白的人源抗体。方法:将蓖麻毒蛋白固定在抗原管上,通过5轮"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量抗体库中筛选到特异性抗体,并转染到HB2151菌中,经IPTG诱导,制备抗蓖麻毒蛋白的可溶性单链抗体。结果:经过5轮筛选,获得40个与蓖麻毒蛋白结合的阳性克隆,其中12个特异性结合的克隆,指纹分析有7种不同的可变区片段;经过基因测序,分析了可变区基因的亚群。并将其制备成可溶性的抗体。结论:利用单链大容量抗体库获得抗蓖麻毒蛋白的噬菌体抗体并且成功制备成可溶性抗体,为今后的研究和应用奠定基础。
- 乔媛媛王欲晓周丽君赵宇王玉霞赵晓航王琰
- 关键词:噬菌体抗体
- 冠状动脉慢血流者血浆同型半胱氨酸水平与血小板一氧化氮及其合酶变化的临床研究被引量:6
- 2008年
- 目的通过测定冠状动脉慢血流(CSF)者血浆同型半胱氨酸(Hcy)、血小板一氧化氮(NO)及其合酶(NOS)的变化,探讨它们与CSF发生机制的关系。方法选择经冠状动脉造影(CAG)检查诊断为CSF者20例(CSF组),CAG示无管腔狭窄及无慢血流者20例作为对照(NCF组),采用校正的TIMI血流分级(CTFC)方法评价冠状动脉血流速度,并测定其血浆Hcy、血小板NO含量、NOS活性、血小板计数(Plt)、血小板体积分布宽度(MPV)、平均血小板体积(PDW)。结果两组患者Plt、MPV、PDW比较无显著性差异(P﹥0.05);CSF组血浆Hcy水平[(17.92±5.86)μmol/L]明显高于NCF组[(11.42±4.28)μmol/L](P﹤0.001);血小板NO含量、NOS活性[(0.40±0.33)μmol/gprot,(1.69±0.15)U/mgprot]较NCF组[(1.27±0.8)μmol/gprot,(2.17±0.21)U/mgprot]明显减低(P﹤0.05)。结论增高的血浆Hcy水平使冠状动脉内皮功能受损,导致血小板功能受损,可能与CSF现象发生有关。
- 何疆春杨晔朱智明乔媛媛张宁坤陈宇李贤峰费宇行
- 关键词:冠状动脉慢血流内皮功能受损同型半胱氨酸一氧化氮
- BPI N端优势抗原表位的模拟合成及其人源抗体的筛选
- 2007年
- 杀菌/渗透增强蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI)是存在于人及哺乳动物多形核白细胞中的一种阳离子抗菌蛋白。研究证实BPI功能性氨基端片段(rBPl2。/rBPl23)具有与天然BPI55,相同的生物学活性,它们不仅能广谱杀伤G^-菌还能有效中和内毒素。
- 张国民陈宇萍乔媛媛王琰赵晓航安云庆
- 关键词:BPI人源抗体抗原表位PROTEINN端多形核白细胞
- 抗银环蛇毒素人源单链抗体的筛选及鉴定被引量:3
- 2010年
- 目的从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗银环蛇毒素的人源单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法以银环蛇毒素为靶抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"过程从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性抗体,采用ELISA法检测其结合活性;与抗蛇毒素马血清进行竞争抑制ELISA,检测其中和活性;DNA指纹图谱分析和序列测定确定其抗体类型。结果经4轮筛选,获得了5株对银环蛇毒素具有结合活性的阳性克隆;其中1株结合活性高的单克隆抗体中和活性抑制率可达8.5%;DNA指纹图谱显示为3个不同的ScFv基因,序列分析表明其重链可变区均属于VHⅠ型,轻链可变区分别为VκⅡ、VκⅢ和VλⅡ。结论利用噬菌体抗体库技术获得了具有中和活性的抗银环蛇毒素人源单链抗体。
- 王欲晓周丽君张海荣曲佳乔媛媛赵晓航高荣凯
- 关键词:细菌噬菌体抗体
- 抗腐败西瓦菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定
- 2012年
- 目的制备和鉴定抗腐败西瓦菌单克隆抗体(mAbs),为建立重要海洋细菌快速ELISA检测试剂盒奠定基础。方法用灭活腐败西瓦菌免疫小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术,制备出抗腐败西瓦菌杂交瘤细胞株,用Giemsa染色对其进行染色体鉴定,并用间接ELISA方法筛选、鉴定其与腐败西瓦菌及其他重要海洋细菌的交叉反应性和效价。结果共获得4株抗腐败西瓦菌的杂交瘤细胞株(02D6、02H12、03G4、03A7),均符合杂交瘤细胞染色体特点,其培养上清效价为10-1~10-2,具有良好的特异性和免疫反应性。结论研究制备、筛选出抗腐败西瓦菌的特异性抗体,有助于进一步建立重要海洋细菌快速检测试剂盒。
- 付凯飞马骢郭建巍乔媛媛王大鹏
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤技术
- 从噬菌体抗体库筛选人源性抗白细胞介素8抗体被引量:9
- 2005年
- 目的: 从噬菌体抗体库中筛选人源性抗IL- 8单链抗体(scFV)。方法: 采用原核表达载体pRSET- IL- 8在大肠杆菌BL21(DE3)中表达IL- 8 His融合蛋白, 并通过亲和层析纯化。以该融合蛋白为固相抗原, 对噬菌体抗体库进行 3轮淘筛, 并对所获阳性克隆进行抗原结合活性测定和DNA序列测定。结果: 获得 2株特异性抗IL- 8噬菌体抗体。对其DNA序列测定结果表明, 其VH基因均属于人IgGVH3亚群, Vλ基因分别属于人VλDPL5和VλDPL2亚群。结论: 利用噬菌体抗体库技术可不经免疫制备人源性抗IL- 8抗体, 为银屑病及相关疾病的临床应用提供了条件。
- 王雷乔媛媛王刚陈宇萍杨军王琰刘玉峰
- 关键词:噬菌体抗体库白细胞介素8
- 长航对人体外周血细胞因子表达水平的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨执行海上编队长航任务对舰员外周血细胞因子表达水平的影响。方法采用多抗体芯片化学发光法定量比较海上任务人员(实验组)和岸基人员(对照组)外周血120种细胞因子的表达差异。结果与岸基人员相比,执行海上长航任务舰员外周血34.17%(41/120)人体细胞因子表达水平改变,其中13种细胞因子表达升高,涉及Janus激酶-信号转导及转录活化因子、有丝分裂原活化蛋白激酶等细胞信号通路,参与细胞趋化、免疫调节(尤其是细胞免疫调节)、炎症反应和细胞凋亡等重要生物学过程。结论执行海上编队长航任务124 d,部分舰员外周血多种细胞因子表达水平改变,提示海上综合作业环境在一定程度上影响长远航任务人员机体免疫功能。
- 熊鸣赵晓航朱智明解鹏乔媛媛安怀杰曲佳何立东
- 关键词:细胞因子抗体芯片免疫调节长航
- 外泌体在中枢神经系统疾病中的功能与应用被引量:3
- 2019年
- 外泌体是由多种类型的细胞经过一系列调控形成并可分泌到细胞外基质的膜性囊泡,直径约40~200 nm,通过运送mRNAs、miRNAs和蛋白质等物质到靶细胞的方式发挥传递物质和交流信息的作用,从而影响靶细胞的生命过程。作为一种新型的细胞间交流方式,外泌体易透过血脑屏障。因此,在阿尔茨海默病、帕金森病等多种神经系统疾病进展中发挥重要作用。有关外泌体的研究有助于加深人们对中枢神经疾病发生和发展机制的认识,并可为中枢神经系统疾病的治疗提供新的方向。现对外泌体的一般特性、功能以及其作为神经系统疾病诊断标志物和治疗靶点的潜在价值进行综述。
- 李丹丹孙春霞乔媛媛张达矜
- 关键词:外泌体中枢神经系统