何良梅 作品数:6 被引量:25 H指数:4 供职机构: 扬州大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
鹅源腺病毒Y21G4株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析 对鹅源腺病毒株Y81G4基因组二侧末端序列测定和比较,鉴定出其ITR区。Y81G4株ITR全长为125bp,远长于其它禽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群腺病毒ITR长度。在Y81G4株ITR中有一些腺病毒ITR序列特征:①5′-C(A/T)... 刘岳龙 崔治中 徐福洲 段玉友 孙怀昌 秦爱建 何良梅文献传递 鹅源腺病毒全基因组DNA酶切片段的克隆 被引量:5 2001年 利用 1株鹅源腺病毒 Y81G4 株 ,经鹅胚增殖后收获尿囊液 ,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组 DNA.病毒 DNA经 H ind 酶切后共产生 1 0个片段 ,分别回收各酶切片段 ,与经 H ind 单酶切的p UC1 8连接 ,获得 8个不同的重组质粒 .对于未克隆到的两末端片段 ,经碱处理去除末端蛋白后 ,以平端和 H ind 粘端与经 Sma 和 H ind 双酶切的 p UC1 8连接 ,获得了重组质粒 p GAHC和 p GAHI.克隆的各酶切片段 ,通过酶切电泳和 Southern blotting结果鉴定 ,证明已分别克隆到该病毒基因组 DNA H ind 酶切片段 ,且各酶切片段大小之和约为 3 2 . 徐福洲 崔治中 段玉友 刘岳龙 孙怀昌 何良梅关键词:基因组 克隆 鹅源腺病毒Y21G4株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析 刘岳龙 崔治中 徐福洲 段玉友 孙怀昌 秦爱建 何良梅特超强毒型马立克病病毒囊膜糖蛋白I基因序列及与其它致病型毒株的比较 被引量:11 2000年 特超强毒型 6 48A株马立克病病毒 (MDV)的囊膜糖蛋白I(gI)基因经PCR扩增后克隆进pUC18质粒载体 ,并对其ORF完成了DNA测序。与已发表的其它致病型毒株的糖蛋白I的DNA和氨基酸序列比较表明 ,6 48A株的 gI基因序列与超强毒RBIB株已发表的ORF 5′端 76 1个碱基完全相同。但是在该基因中完整ORF的 10 6 8个碱基中 ,6 48A株与强毒GA株间有 8个碱基变异并导致 7个氨基酸的变化 ,且这一变化主要发生在该基因的 5′端 ,其 崔治中 何良梅关键词:马立克病毒 鹅源腺病毒Y_(81)G_(4)株基因组末端倒置重复序列(ITR)的核酸鉴定和结构分析 被引量:6 2000年 对鹅源腺病毒株Y81G4 基因组两侧末端序列测定和比较 ,鉴定出其ITR区。Y81G4 株ITR全长为 12 5bp ,远长于其它禽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群腺病毒ITR长度。在Y81G4 株ITR中有一些腺病毒ITR序列特征 :① 5 _C(A/T) (A/T)NTCAT_腺病毒典型起始序列 ;② 9~ 13bp存在腺病毒科共有的 (A/T)T(A/T)ATA保守序列 ;③在ITR区 37~ 42bp出现的GNGGCG保守序列 ;④在ITR 45~ 5 0bp出现TGACGT保守序列。此外 ,哺乳动物腺病毒ITR中被转录因子SP1所识别的序列和以增强DNA复制启动的两个宿主核蛋白NFⅠ和NFⅢ的结合序列在Y81G4 株TIR中并没有出现。经DNASTAR软件“Clustal”方法对禽腺病毒Y81G4 株ITR与其它腺病毒ITR的同源性进行比较 ,其同源性由高到低依次为 :禽Ⅲ群减蛋综合征病毒 (EDSV ,10 0 % ) >羊腺病毒 (OAV ,43 .5 % ) >禽Ⅱ群火鸡出血性肠炎病毒 (HEV ,30 .8% )和禽Ⅰ群鸡胚致死孤儿病毒 (CELO株 ,2 8.2 % ) >人腺病毒 12型 (HAd12 ,2 6 .4% )和牛腺病毒 1型 (BAd1,2 6 .4% )。通常在腺病毒科同一亚属或亚群中ITR是很保守的 ,因而推测Y81G4 刘岳龙 崔治中 徐福洲 段玉友 孙怀昌 秦爱建 何良梅关键词:同源性分析 特超强毒648株马立克氏病病毒的囊膜糖蛋白gE基因的克隆和序列比较 被引量:6 2001年 鸡马立克氏病毒特超强毒 (vv+MDV) 648株的囊膜糖蛋白 gE基因经PCR扩增并克隆入pUC1 8载体。 648株gE基因经核酸序列分析测定 ,全长为 1 494碱基。所编码的蛋白具有跨膜糖蛋白的一些特征。它含有 8个潜在的糖基化位点、N端有一段疏水区 (1~ 1 9aa)所构成的信号肽、C端有一段疏水区 (391~ 41 9aa)所构成的膜锚着序列。经 648株 (vv+MDV)和马立克氏病毒强毒 (vMDV)GA株的 gE相比较 ,在MDV血清 1型中 gE是较为保守的 ,二者仅有 2个核苷酸的差异 (第 51 2位、第 1 472位 ) ,并导致了有二个相应的氨基酸的改变 (第1 71位Leu/Pro、第 491位Arg/Lys)。 刘岳龙 崔治中 何良梅 朱素娟 秦爱建关键词:克隆 鸡马立克氏病病毒 囊膜