本研究旨在评价十枣汤(SZD)对KM小鼠的急性毒性及抗肿瘤活性,为安全用药提供参考,并对抗肿瘤效应进行初步评价。试验中,SPF级KM小鼠分别ig给予一定量的生理盐水(空白对照)和SZD,测定其半数致死量(LD_(50)),评价其对小鼠的毒性。另选取SPF级SD大鼠,ig给予SZD,制备SZD含药学清(MS);MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)活力检测,甲基纤维素克隆形成实验,流式细胞术等检测SZD-MS对肿瘤细胞增殖抑制及诱导凋亡情况。毒性测试结果显示,小鼠无死亡,无法得出SZD的LD_(50)。与空白对照组比较,血液的生化学指标显示,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);H&E检测结果显示,SZD对小鼠的肝、肾功能有一定的损伤。抗肿瘤作用结果显示:与溶剂对照组比较,SZD-MS对5种肿瘤细胞的增殖均有一定的抑制作用(P<0.05,P<0.01);SZD-MS对H22细胞LDH释放增加(P<0.05);细胞克隆的形成力度下降(P<0.05,P<0.01);细胞的凋亡率增加(P<0.01)。研究表明,SZD经口最大给药量为每只小鼠0.8 m L/d,约相当于成人日剂量的120倍,毒性较小,安全性良好;且有较好的抗腹水瘤活性。
目的探讨狼毒大戟配伍大枣水煎液(decoction of Euphorbia fischeriana Steud.and jujuba,DEFSJ)体外抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡的可能分子机制。方法通过血清药理学方法制备DEFSJ载药血清(containing serum,CS);光镜及电镜下观察细胞形态学变化;DEFSJ-CS联合LY294002(PI3k信号通路抑制剂)作用后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡情况,流式细胞仪结合免疫染色检测PI3k/Akt转导途径及Bcl-2家族相关蛋白的表达变化。结果光镜及电镜下可见细胞形态学变化及典型的细胞凋亡形态学特征;与阴性对照组比较,DEFSJ-CS对MCF-7细胞的增殖有明显的抑制作用,联合LY294002后抑制作用更加显著(P<0.01);Annexin V-FITC/PI染色结果显示,与阴性对照组比较,随着DEFSJ-CS含量的增加,细胞凋亡率明显增加,联合LY294002后凋亡作用更加显著(P<0.05,P<0.01);免疫染色检测结果显示,PI3k、p-Akt、p-FoxO3a、Bcl-2蛋白表达下调,Bax、Bim蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01),联合LY294002后p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达下调更加显著。结论PI3k/Akt转导途径参与了DEFSJ-CS抑制MCF-7细胞的增殖并诱导其凋亡作用的调控。
