刘玲
- 作品数：25 被引量：46H指数：3
- 供职机构：泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金四川省卫生厅科研基金四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 真核表达质粒EX-Y2069-M 29的构建及LRP16基因在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的构建LRP16基因真核表达质粒EX-Y2069-M29,检测LRP16基因在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的表达。方法体外培养人子宫内膜癌HEC-1-B细胞,提取总RNA,应用PCR技术,扩增获得LRP16基因编码序列片段,克隆入真核表达载体EX-Y2069-M29,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将LRP16真核表达载体EX-Y2069-M29和EX-NEG-M29空质粒转染细胞,利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法分析LRP16基因的表达情况。结果经LRP16基因真核表达质粒EX-Y2069-M29转染的HEC-1-B细胞中检测到LRP16基因的表达。结论构建的LRP16基因重组真核表达质粒EX-Y2069-M29转染HEC-1-B细胞后,可在HEC-1-B细胞中稳定表达,为进一步研究LRP16基因奠定了基础。
- 伍宗惠詹平邹倩张宇骄刘玲
- 关键词：LRP16基因真核表达质粒
- 真核表达质粒EX-Y2069-M29的构建与LRP16在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的表达及作用
- 2013年
- 目的构建真核表达质粒EX-Y2069-M29,检测其在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的表达,并观察LRP16对细胞增殖的影响。方法从HEC-1-B细胞中提取总RNA,应用PCR技术,扩增获得LRP16基因编码序列片段,克隆入真核表达载体EX-Y2069-M29,对重组质粒进行酶切和测序鉴定后,以脂质体介导法转染至HEC-1-B细胞,采用Westernblot法检测LRP16蛋白的表达,用WST-1法检测细胞增殖情况。结果酶切和测序结果证明真核表达质粒EX-Y2069-M29的DNA序列完全正确,将其转染HEC-1-B细胞后,LRP16蛋白表达明显增加;转染后HEC-1-B细胞在体外能继续增殖,但增殖能力明显下降。结论 LRP16基因重组真核表达质粒EX-Y2069-M29构建成功,并能在HEC-1-B细胞中表达,为进一步研究LRP16基因奠定了基础;转染LRP16后并没有促进HEC-1-B细胞体外增殖,LRP16基因用于子宫内膜癌基因治疗可能具有潜在价值。
- 张宇骄刘玲刘蔚詹平何雯
- 关键词：LRP16基因真核表达质粒
- 人宫颈鳞状上皮细胞癌组织中钙激活性中电导钾离子通道的表达被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人宫颈鳞状上皮细胞癌（简称鳞癌）组织中电导钾离子通道（IKCal）mRNA及其蛋白产物与正常宫颈上皮组织中钙激活性的差异。方法采用免疫组织化学法及RT-PCR法分别检测30例不同分化程度的宫颈鳞癌组织和18例正常宫颈上皮组织中IKCalmRNA及其蛋白产物的表达情况。结果（1）IKCalmRNA阳性表达率15例子宫颈鳞癌组织中分别为73．3％，表达水平为（1．2±n5），18例正常宫颈上皮组织中分别为11．1％，表达水平为（0．9±0．2），差异均有统计学意义；（2）30例宫颈鳞癌组织细胞核及细胞膜上IKCal蛋白产物均呈阳性表达；正常宫颈上皮组织中仅1例在鳞状上皮部位细胞膜部位有较弱表达，差异有统计学意义；（3）宫颈鳞癌组织中IKCal蛋白产物的表达与癌细胞分化程度呈正相关。结论IKCal的高表扶与宫颈鳞痛的发牛和发展密切相关．
- 林海蕤毛熙光付晓东刘玲
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应
- 人子宫内膜样腺癌组织和正常子宫内膜组织中LRP16表达分析
- 2015年
- 目的检测子宫内膜样腺癌组织中LRP16的表达,探讨其与人子宫内膜样腺癌的关联及其与E-cadherin的调控关系。方法 RT-PCR法检测子宫内膜样腺癌组织中LRP16 mRNA的表达;免疫组化方法检测子宫内膜样腺癌组织中LRP16和E-cadherin表达部位及表达水平,分析两者之间的关系。结果子宫内膜样腺癌组织中LRP16mRNA的阳性表达率及表达水平均高于正常子宫内膜组织(P<0.05)。子宫内膜样腺癌组织中,LRP16核表达程度与病理学分级相关(P<0.05),而LRP16浆表达与病理学分级无相关性(P>0.05);LRP16浆表达与手术病理分期呈负相关(P<0.05),而LRP16核表达与手术病理分期无相关性(P>0.05);LRP16和E-cadherin的表达无相关性(P>0.05)。结论子宫内膜样腺癌组织中LRP16 mRNA的表达明显高于正常子宫内膜组织;且LRP16蛋白产物核表达水平与癌细胞的分化程度呈负相关;LRP16的过表达与子宫内膜样腺癌的发生和发展可能存在重要联系;而LRP16蛋白的表达水平与E-cadherin的表达可能无相关性。
- 刘玲张宇骄汪春燕詹平伍宗惠毛熙光
- 关键词：LRP16子宫内膜样腺癌LRP16
- 大蒜素通过Wnt信号途径阻遏人宫颈癌细胞周期进展被引量：2
- 2016年
- 目的探讨大蒜素对宫颈癌He La细胞周期的影响及其相关分子机制。方法不同浓度大蒜素及不同时间作用于体外培养的He La细胞,采用WST-8法测定大蒜素对He La细胞增殖的影响;流式细胞术测定大蒜素对He La细胞周期的影响;不同浓度大蒜素处理He La细胞24h后,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)法分别检测β-catenin mRNA及蛋白表达。结果大蒜素以浓度和时间依赖的方式抑制He La细胞的增殖,阻遏细胞周期进展,下调关键蛋白β-catenin在胞质的表达。结论大蒜素抑制Wnt信号的活化,下调关键蛋白β-catenin在胞质的表达,从而阻遏细胞周期进展,抑制He La细胞增殖,为宫颈癌防治新药的开发提供理论依据。
- 汪春燕刘玲聂丹詹平陈建琼钱燕萍毛熙光
- 关键词：大蒜素宫颈癌WNTΒ-CATENIN
- 血清蛋白质谱结合人工神经网络在宫颈癌诊断中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的:采用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测宫颈癌病人血清蛋白指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物。方法:应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集58例宫颈癌患者和57例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白质组。将115例血清随机分为两组:以训练组30例宫颈癌患者和30例健康人建立人工神经网络(ANN)模型,以验证组28例宫颈癌患者和27例健康人血清标本用于模型的双盲法验证。结果:宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有145个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出质荷比(M/Z)分别为5912、5642、8702、4320、6432的标志蛋白(P<10-6),建立人工神经网络模型,其对宫颈癌的诊断敏感性为92.86%,特异性为88.89%,阳性预测值为89.66%,阴性预测值为92.31%。结论:特征蛋白在宫颈癌患者较正常人血清明显的高表达或低表达,可能对宫颈癌的早期诊断和治疗后随访具有重要的指导意义。
- 刘玲毛熙光詹平姜伟王开正林海蕤任黔川傅晓冬
- 关键词：宫颈癌蛋白标志物人工神经网络蛋白质组学
- 钙激活性中电导钾离子通道在宫颈癌组织中的表达及其在细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的观察钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)在宫颈癌组织中的表达变化及其在宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法用RT-PCR检测18例正常宫颈组织及15例宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的表达;用IKCa1通道的阻断剂克霉唑处理宫颈癌HeLa细胞,用RT-PCR检测细胞IKCa1 mRNA的表达变化,MTT法观察细胞增殖抑制的变化。结果宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的阳性表达率(73.33%)及表达水平(1.14±0.45)明显高于正常宫颈组织(11.11%和0.86±0.23)(P<0.05)。克霉唑以浓度和时间依赖的方式抑制HeLa细胞的增殖,下调IKCa1 mRNA的表达水平,诱导细胞凋亡。结论 IKCa1的异常表达可能与宫颈癌相关,降低其表达可能通过诱导细胞凋亡而抑制宫颈癌细胞的增殖。
- 刘玲林海蕤陈倩詹平任黔川傅晓冬毛熙光
- 关键词：钾离子通道钙激活宫颈癌
- 钙激活性中电导钾离子通道在人子宫颈癌组织中的表达及其在细胞增殖中的作用被引量：1
- 2010年
- 目的:研究钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)在宫颈癌组织中的表达变化及其在宫颈癌HeLa细胞增殖中的作用。方法:应用RT-PCR技术检测18例正常宫颈组织及15例宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的表达;利用IKCa1通道的阻断剂(克霉唑)处理宫颈癌HeLa细胞,MTT法观察细胞增殖的变化。结果:宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的阳性表达率及表达水平(分别为73.33%、1.14±0.45)明显高于正常宫颈组织(分别为11.11%、0.86±0.23),P<0.05。克霉唑以浓度和时间依赖的方式阻滞HeLa细胞增殖,抑制HeLa细胞的生长,降低IKCa1 mRNA的表达水平。结论:IKCa1的异常表达可能与宫颈癌的发生、发展密切相关,降低其表达可能抑制宫颈癌细胞的增殖和生长。
- 刘玲林海蕤姜隽詹平任黔川傅晓冬聂丹毛熙光
- 关键词：钾通道钙激活宫颈癌
- 宫颈鳞癌组织中整合素β_1的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的讨论整合素β1蛋白在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法酶联免疫ELISA法和蛋白印迹Western blot法测定106例宫颈鳞癌组织和32例正常宫颈组织中整合素β1蛋白,同时免疫组化SP法检测两组标本中整合素β1蛋白的表达,分析其与宫颈鳞癌临床参数之间的关系。结果 (1)ELISA法:106例宫颈鳞癌组织和32例正常宫颈组织中整合素β1蛋白的浓度分别为(29.03±1.74)ng/m L和(17.36±1.41)ng/m L,两者比较差异有统计学意义(P=0.037)。(2)Western blot法:整合素β1蛋白在106例宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为87%,32例正常宫颈组织中其表达率为19%,表达水平分别为0.96±0.17和0.47±0.11,两者蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P=0.031)。(3)SP法:宫颈鳞癌ⅡA期整合素β1的阳性表达与Ⅰ期比较、组织学分级G3与G1比较、有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较,差异均有统计学意义(P值分别为0.045、0.041、0.035)。结论整合素β1蛋白在宫颈鳞癌中的表达明显高于正常宫颈组织,随临床期别和恶性程度增加,整合素β1蛋白的表达也增强。
- 詹平刘尧芳刘玲毛熙光
- 关键词：整合素Β1宫颈鳞癌肿瘤转移
- 靶向ANGPTL4基因shRNA慢病毒载体抑制SiHa细胞迁移与侵袭
- 2016年
- 目的探讨慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)沉默血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)基因对人宫颈癌细胞系Si Ha细胞迁移与侵袭的影响。方法实验分为3组,即空白对照组、阴性对照组及LV3/ANGPTL4组。用ANGPTL4shRNA慢病毒干扰载体感染Si Ha细胞,Western blot检测Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达,划痕实验检测Si Ha细胞迁移能力,Transwell实验检测Si Ha细胞迁移与侵袭能力。结果重组慢病毒载体成功感染Si Ha细胞,与空白对照组及阴性对照组比较,LV3/ANGPTL4组Si Ha细胞Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达水平降低(P<0.01),细胞迁移与侵袭能力减弱(P<0.05)。结论靶向ANGPTL4基因shRNA慢病毒载体可降低Si Ha细胞Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达水平,抑制Si Ha细胞迁移与侵袭能力。
- 聂丹范凌晔刘玲詹平郑茜文毛熙光
- 关键词：慢病毒迁移
