南松剑
- 作品数：22 被引量：52H指数：6
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金山东省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 大肠杆菌菌毛抗原K99与耐热肠毒素STⅠ融合基因的克隆与核苷酸序列测定
- 2007年
- 采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCm-T载体上,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序。选择目的基因片段插入方向正确的重组质粒经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamHⅠ和SalⅠ双酶切合成的耐热肠毒素STⅠ核苷酸序列连接,通过PCR方法鉴定分析和核苷酸序列测序分析,证明插入的K99-STⅠ融合基因片段具有正确的核苷酸序列。
- 李书光沈志强单虎管宇肖跃强王金良南松剑刘吉山
- 关键词：融合基因
- 广西部分地区犬蝙蝠和野鼠狂犬病病毒的流行病学调查
- 本实验从广西南宁市、百色、柳州市集贸市场采集了犬脑组织268份,从南宁市、博白县捕获蝙蝠120只,以及从南宁市郊捕获野鼠65只。应用RT-PCR技术对犬脑、蝙蝠和野鼠脑组织进行检测。并将阳性材料进行小白鼠脑内接种试验。检...
- 李开鹏罗廷荣刘芳冯励潘艳南松剑余克伦
- 文献传递
- 猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性重组质粒转化进Rosetta^TM主菌中，通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定最佳诱导条件为：IPTG终浓度1．0amol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3—4h。经SDS—PAGE和Western—blotting分析表明该重组蛋白相对分子量约为68ku，具有良好的免疫学活性。
- 王金良沈志强谢金文南松剑管宇郝静庄金秋刘吉山
- 关键词：猪细小病毒VP2基因基因克隆原核表达
- 广西狂犬病野毒株N基因的测序与分析被引量：7
- 2007年
- 目的对广西狂犬病野毒株N基因进行测序和分析,了解其遗传特点和进化规律。方法2003至2004年从广西各地采集595份动物脑材料,经RT-PCR法确定16份为阳性。对此16株狂犬病野毒株N基因全序列进行RT-PCR扩增、克隆和测序分析。结果广西狂犬病病毒株属于Ⅰ型,可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA、GXHX和GXSL株的同源性在97.6%～99.8%,为Ⅰ群,它们与其他毒株的同源性为89.0%～89.7%;GX219、GX074、GX304、GXBM和GXPX株的核苷酸同源性在98.4%～99.9%,为Ⅱ群,它们与其他各株的同源性为88.6%～89.7%;GXN119株为Ⅲ群,与泰国的8738THA株核苷酸同源性为95.3%。遗传进化分析表明,389位磷酸化位点、主要的4个抗原区及Th细胞表位区非常保守。N蛋白上的氨基酸变异主要集中在42、90、110、128、135、332、379和397位氨基酸上,这些氨基酸的变异与同源性分群结果一致。结论根据基因同源性、遗传进化树及氨基酸变异分析,广西狂犬病野毒株分3群,呈地区性分布。
- 熊毅罗廷荣刘棋李华明南松剑颜健华郭建钢邓朝阳
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白类逆转录聚合酶链反应基因扩增
- 广西狂犬病野毒株N和G基因的克隆与序列分析被引量：11
- 2005年
- 从广西南宁、隆安和巴马分离到三株狂犬病病毒野毒株,分别编号为GXN119、GXLA和GXBM。对三株的N基因和GXN119、GXBM株的G基因进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。将测序所得结果和收集到的国内外已发表毒株相应基因进行了核苷酸和推定氨基酸的序列进行比较分析。三株野毒之间N基因的核苷酸同源性分别为:89.1%(GXN119/GXBM)、89.7%(GXN119/GXLA)和89.4%(GXLA/GXBM),G基因的核苷酸同源性为86.7%(GXN119/GXBM)。比较N基因推导氨基酸序列同源性,分别为:97.8%(GXN119/GXBM)、97.8%(GXN119/GXLA)和99.1%(GXLA/GXBM),表明N基因同义变异较多。将两株野毒株GXN119、GXBM与人用疫苗3aG株和兽用疫苗ERA株的G基因进行了核苷酸序列比较,同源性介于82.7%～84.0%之间,推定氨基酸同源性在88.0%～91.6%之间。N蛋白的第40位Ser和106位Asp显示了广西狂犬病流行病学的区域特异性。
- 罗廷荣南松剑余克伦
- 关键词：狂犬病病毒N基因G基因
- 微酸性电生功能水在奶牛场的消毒效果研究被引量：10
- 2009年
- 微酸性电生功能水（Slightly Acidic Electrolyzed Functional Water,SAEFW）是在无隔膜电解槽内将一定比例的低浓度氯化钠和稀盐酸电解生成。其pH介于4.5-6.5之间,有效氯以HClO形态存在,杀菌力强,作用后可迅速分解且无化学污染。本研究在自行设计的微酸性电生功能水装置的基础上,对SAEFW在奶牛场奶牛乳头药浴、挤奶杯、人员和毛巾等环节消毒效果进行了研究。结果表明,随着有效氯浓度的增加,SAEFW杀菌率逐渐提高,当有效氯为40mg/L时,杀菌率达到91.21%,与乳浴常用消毒剂“滴宝”的杀菌率91.97%相当;结果还表明奶牛乳房药浴必须有一定的停留时间。用低浓度有效氯20mg/L的SAEFW直接冲洗乳房皮肤,除菌率达93.59%,不低于用有效氯40mg/L的SAEFW和“滴宝”浸泡药浴效果,且综合了清水冲洗和乳房药浴两个步骤,简化了生产程序。SAEFW在挤奶杯、污染毛巾和挤奶员手消毒方面均有明显效果,优于相同有效氯的NaClO的杀菌率。SAEFW杀菌作用受有机物等环境因素影响,连续乳房药浴和挤奶杯消毒最好制备有效氯浓度稍高的SAEFW,或在事先充分清洗基础上再行消毒。本试验结果为SAEFW在奶牛场的消毒应用提供了一定的参考。
- 南松剑王朝元曹薇马启军王树华李保明侯占清
- 关键词：奶牛消毒乳房炎
- 猪繁殖与呼吸道综合征病毒RT-PCR检测方法研究被引量：1
- 2010年
- 为建立一种能够快速、确切诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的方法,根据Gen-Bank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核苷酸序列设计并合成了一对能特异性扩增PRRSV基因片段的引物,经过条件优化后,建立了检测PRRSV的RT-PCR方法,扩增病毒核酸片段长432bp。试验证明,该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,简便、快速、高效,为PRRSV的快速准确诊断及进一步的PRRSV的流行病学研究提供了重要的技术手段。
- 谢金文王金良管宇肖跃强南松剑沈志强
- 关键词：猪繁殖与呼吸道综合征RT-PCR
- 广西12株狂犬病野毒株的g基因序列测定与分析被引量：13
- 2006年
- 对广西12株狂犬病病毒株g基因全序列进行测序分析,结果显示:广西毒株属于I型,可分为3个群,即Ⅰ群、Ⅱ群和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA8株为Ⅰ群,GX219、GX074、GXBM3株为Ⅱ群,GXN119株为Ⅲ群。Ⅰ群的广西毒株g基因核苷酸的同源性为97.6%～99.9%,氨基酸同源性在97.7%～100%之间;Ⅱ群的核苷酸的同源性为98.2%～99.0%,氨基酸的同源性在98.5%～99.2%之间。糖蛋白在主要的抗原位点GI、GⅡ区以及与中和抗原有关的36、263、367位氨基酸没有变异,GⅢ区上只有Ⅱ群在332位缬氨酸变异为异亮氨酸,G蛋白上的氨基酸主要在-2、-5、-13、-14、-15、-16、90、96、132、140、156、168、170、204、241、249、253、264、289、332、382、427、436、445、463、474位共26个氨基酸发生了变异,这些氨基酸的变异具有群的特异性。
- 熊毅罗廷荣刘棋李华明南松剑郭建钢邓朝阳兰斌
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白基因测序
- 中性电解水用于温室土壤消毒的研究被引量：2
- 2014年
- 本文主要从使用中性电解水（pH6.0-7.5）浇灌温室土地消毒方面的效果进行探究。本文以日光温室大棚的土壤为研究对象。考察不同理化特性的中性电解水对土壤消毒的效果。本文主要进行了2个相关实验。使用不同处理时间的中性电解水直接浇灌土壤消毒处理效果研究分析。不同处理时间的中性电解水对土壤浸出液消毒杀菌处理的效果研究分析。实验中的处理方式的杀菌率都可以达到99%以上,可见中性电解水在温室土壤消毒方面还是很有前景的。
- 吕云谢丽娜南松剑
- 关键词：杀菌效果
- 一例猪瘟与猪蓝耳病混合感染的诊断
- 猪瘟和蓝耳病都是猪场较为常见的疾病,特别是仔猪混合感染后死亡率高,对养猪业的危害较大。某猪场保育猪出现急性死亡,通过临床症状观察、病理剖检和RT-PCR试验等方法诊断为猪瘟病毒与猪繁殖与呼吸综合征病毒的混合感染,并给予了...
- 谢金文韩玲南松剑苗立中任艳玲沈志强
- 关键词：猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录-聚合酶链式反应病理剖检
- 文献传递
