- 一种新型小鼠B淋巴细胞多克隆激活剂及其免疫效应-甘草多糖(GPS)
- 史勇
- 甜味蛋白Brazzein真核表达系统的建立
- 当今,糖类已成为食品行业广泛、大量采用的风味添加剂,其缺失会严重影响食品风味。然而,大量摄入糖类后会引起血糖浓度升高,诱发龋齿、肥胖症和糖尿病等病症,严重影响人类健康。于是,寻找一类安全、有效的甜味剂就成为了人们日益关注...
- 史勇
- 关键词：BRAZZEIN真核表达COS-7细胞
- 文献传递
- 甜味蛋白Brazzein基因酵母表达系统的建立被引量：5
- 2010年
- 根据甜味蛋白Brazzein基因成熟区的氨基酸序列,结合毕赤酵母的密码子偏爱性以及Brazzein蛋白质结构的相关研究,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,使表达的目的蛋白中包含3个突变氨基酸(29Asp→Lys,31His→Ala,41Glu→Lys)。采用重叠PCR(SOE-PCR)合成目的基因并克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定,序列正确的质粒用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切。将回收得到的目的基因连接到经同样双酶切处理的pGAPZαA载体上,经PCR、酶切和测序鉴定,证明已成功构建pGAPZαA-Bra真核表达载体。将构建好的重组载体pGAPZαA-Bra用AvrⅡ线性化,电转进入巴斯德毕赤酵母中。筛选ZeocinTM阳性克隆菌,进行蛋白表达,SDS-PAGE结果表明蛋白表达成功。
- 史勇张明军张英李莉汤丹刘松财
- 关键词：甜味蛋白BRAZZEIN基因巴斯德毕赤酵母
