周忠实 作品数:123 被引量:322 H指数:12 供职机构: 中国农业科学院植物保护研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
中国亚热带两种恶性入侵杂草持续治理关键技术研究与应用 万方浩 王韧 郭建英 罗源华 周忠实 傅建炜 张国良 李保平 卢新民 赵家永 聂亚锋 马瑞燕 陈志谊 丁建清 马骏 关广清 黄水金 刘雨芳 刘万学 许方程 孟玲 李彦宁 陈红松 史梦竹 彭兆普 蔡笃程 马明勇 付卫东 赵中华 石润圭 何晓红 豚草和空心莲子草是世界十大恶性入侵杂草,在中国亚热带地区蔓延为害面积达70﹪、并呈现交替与重叠发生的争夺状态,导致巨大的经济损失,并破坏生物多样性,严重威胁人畜健康.项目组经20多年系统研究,在阐明两种杂草入侵机理的基础...关键词:关键词:生物防治 微生物制剂 莲草直胸跳甲Halloween基因家族鉴定及表达分析 被引量:3 2020年 [背景]莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)是世界恶性入侵杂草空心莲子草(Alternanthera philoxeroides)的专一性生防天敌;莲草直胸跳甲种群动态呈季节性波动趋势,在我国湖南地区其夏季种群数量骤减,导致对空心莲子草的防控效果大大降低.而Halloween基因家族参与昆虫蜕皮激素的合成,影响昆虫生长和繁殖,进而对昆虫种群动态具有一定影响.[目的]揭示Halloween基因家族在莲草直胸跳甲不同发育时期和不同组织中的表达模式,为进一步探究Halloween基因家族在莲草直胸跳甲中的功能打下基础,进而为生防天敌的扩繁提供新思路.[方法]通过筛选莲草直胸跳甲卵巢转录组数据并结合生物信息学分析,找到并克隆其体内Halloween基因家族成员;使用NCBI在线分析其保守结构域,利用MEGA6.0对Halloween家族基因进行多序列比对并构建系统发育树;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测各基因在莲草直胸跳甲不同发育时期(卵、幼虫、蛹、雌成虫)和雌成虫不同组织(头、胸、中肠、卵巢、脂肪体)中的表达水平.[结果]莲草直胸跳甲中存在6个Halloween基因家族成员,分别为AhCYP302A1、AhCYP306A1、AhCYP307A1、AhCYP307A2、AhCYP314A1和AhCYP315A1;分析发现其均属于P450超家族且具有一定保守性,其中AhCYP306A1、AhCYP307A1、AhCYP307A2聚为一支,属于P450超家族中CYP2集团,AhCYP302A1、AhCYP314A1、AhCYP315A1聚为一支,属于线粒体集团;同时,AhCYP306A1、AhCYP314A1、AhCYP315A1在5′端存在跨膜区域.6个Halloween基因在莲草直胸跳甲整个生活史及各个组织中均有不同程度的表达.其中,AhCYP302A1在蛹期第6、7天表达量最高,成虫期表达量整体较低;AhCYP306A1在整个生活史中波动表达,以幼虫期第10天表达量最高;AhCYP307A2在末龄幼虫和化蛹初期的表达量较高;以上3个基因在幼虫期和蛹期的表达量较高.AhCYP307A1在卵期高表达,此后各个时期呈波动下降;AhCYP314A1� 刘亦然 张虹 靳继苏 周忠实 郭建英关键词:莲草直胸跳甲 空心莲子草 蜕皮激素 实时荧光定量PCR 我国甘蔗外来有害生物现状及对策 甘蔗Saccharum officenarum L.是我国最重要的糖料作物,种植面积约150万公顷,广西、云南、广东和海南为主要产区,其中广西是仅次于巴西圣保罗州的世界第二大产糖省(州、自治区),种植面积和产糖量约为全国... 覃振强 周忠实 韦金菊 潘雪红 宋修鹏关键词:甘蔗 外来有害生物 桔小实蝇规模化饲养方法 本发明涉及植物保护领域,具体涉及桔小实蝇规模化饲养方法。所述方法包括步骤:成虫的饲养,改进的人工饲料包括质量比1:8酵母膏和蔗糖;卵的收集;幼虫的饲养,人工饲料饲养幼虫,其中,玉米粉和酵母粉的质量比为19:7;以及蛹的管... 刘桂清 武强 李建伟 周忠实 万方浩 张桂芬文献传递 烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED BtTrp及其应用 本发明涉及基因工程领域,具体涉及烟粉虱MED隐种瞬时感受器离子通道基因MED BtTrp及其应用,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明从烟粉虱MED隐种中克隆到瞬时感受器离子通道TRP(MED BtTrp)基... 吕志创 李倩 万方浩 周忠实 郭建英文献传递 不同苹果品种抗苹果绵蚜的漆酶基因表达模式及其原核表达载体筛选 2023年 【目的】明确不同苹果品种漆酶基因在抗苹果绵蚜过程中的差异表达模式,探索原核表达苹果漆酶蛋白的方法与条件。【方法】基于转录组测序分析抗蚜品种新红星(Starkrimson)、小国光(Ralls Genet)与感蚜品种红富士(Red Fuji)3个苹果品种被苹果绵蚜为害0 h、12 h、5 d后漆酶基因的表达模式,筛选抗蚜候选漆酶基因;选择pET-28a(+)、pET-32a(+)、pGEX-TEV、pHAT24种载体,对4个漆酶基因MdLac23、MdLac6、MdLac7、MdLac2进行原核表达,对表达产物进行Western-Blot验证,镍柱亲和层析纯化,以ABTS为底物分析其酶活性。【结果】与对照相比,不同苹果品种被害12 h、5 d后,苹果枝条中漆酶差异表达基因数量为27个。不同苹果品种的漆酶基因表达模式存在差异,抗蚜品种新红星及小国光漆酶差异表达基因上调表达居多,感蚜品种红富士下调表达居多,新红星12个基因上调表达,无下调表达基因;小国光9个基因上调表达,3个基因下调表达;红富士10个基因下调表达,4个基因上调表达。其中新红星特有的上调表达基因数量为6个,小国光特有的上调表达基因为5个,红富士特有的下调表达基因为9个。在16℃、0.5 mmol·L-1IPTG,220 r·min-1诱导24 h的条件下,MdLac23、MdLac2漆酶基因在pET-28a(+)载体上清液中成功表达蛋白,WesternBlot检测到清晰目的蛋白条带,与对照相比均未发现其催化活性。利用pET-32a(+)、pGEX-TEV、pHAT2载体均未在上清液中诱导出目的重组蛋白。【结论】明确了不同苹果品种漆酶基因的表达模式以及原核表达所需表达载体与条件,为进一步探索不同苹果品种漆酶抗蚜基因及其蛋白功能奠定理论与实践基础。 李慧芳 滕子文 范银君 李津洋 万方浩 周忠实 周洪旭关键词:苹果绵蚜 苹果品种 漆酶 原核表达 一种养虫器 本实用新型公开了一种养虫器,涉及昆虫养殖设备技术领域。本养殖装置包括:废液仓、可拆卸地卡接于所述废液仓内的养虫仓、与所述废液仓相连的臭气处理仓,以及仓盖;所述废液仓和所述养虫仓的顶部均具有开口,所述养虫仓的底部设有贯穿的... 周忠实 田震亚 刘亚男 张清璐 朱丽珊 陈红松 高旭渊 杨景芳RPL19基因作为广聚萤叶甲内参基因的应用 本发明属于农业生物技术领域,具体涉及RPL19基因作为广聚萤叶甲内参基因的应用。本发明筛选了12个广聚萤叶甲候选内参基因,获得候选内参基因的基因序列,设计简并引物,克隆得到广聚萤叶甲中上述候选基因的部分核苷酸序列,并基于... 周忠实 张燕 马超 陈广梅 高旭渊 崔少伟 田镇齐 田震亚文献传递 扶桑绵粉蚧在广西的发生为害情况调查 被引量:5 2019年 [目的]明确扶桑绵粉蚧在广西的发生为害现状,为扶桑绵粉蚧的有效治理提供科学依据。[方法]根据广西壮族自治区市级地图,从各市区及其主要区(县)随机选取5个有朱槿绿化带的调查点,在每个调查点的朱槿绿化带中采用等距取样法选取5个1m×10 m的样方,以目测法调查每个样方中朱槿上扶桑绵粉蚧的数量及为害程度。[结果]广西境内14个市215个调查点中有117个调查点未发现扶桑绵粉蚧,为害等级为1、2、3和4级的调查点分别有25、35、27和11个。14个市中,除桂林市未发现扶桑绵粉蚧外,其余13个城市均有分布,崇左、防城港、梧州和北海市受害最严重,其中崇左市朱槿受侵染率高达92.9%,平均虫口量达2534.6头/株;防城港市朱槿受侵染率为83.5%,平均虫口量为2976.2头/株;河池市是除桂林市外侵染率最低的城市,侵染率为5.6%,平均虫口量为27.6头/株。在所有的调查点中,虫量较多、为害严重的发生地大多为菜市场和住宅小区附近的朱槿绿化带。[结论]扶桑绵粉蚧已在广西多个城市成功定殖、扩散蔓延,并在崇左和防城港市呈暴发成灾的趋势。为避免扶桑绵粉蚧进一步传播和为害,应加强朱槿苗木管理,切断传染源,并加强疫区监测,及时防控,避免暴发成灾。 孟醒 李金峰 黄立飞 姜建军 杨朗 周忠实 桂富荣 陈斌 陈红松关键词:扶桑绵粉蚧 为害 广聚萤叶甲在北京市郊豚草发生区成功建立种群 2020年 广聚萤叶甲Ophraella communa LeSage属鞘翅目Coleoptera、叶甲科Chrysomelidae、萤叶甲亚科Galercinae,是恶性入侵杂草——豚草Ambrosia artemisiifolia的专一性天敌(Guo et al.,2011;Zhou et al.,2014)。广聚萤叶甲卵粒呈梨形,淡黄色至橘黄色,卵壳表面具多角形刻纹,聚集排列;幼虫共3龄,初孵幼虫体色较暗,蜕皮后颜色较淡,3龄幼虫体色偏淡褐色,幼虫在3龄末期开始结茧,茧淡褐色。成虫体色黄褐色,头部背面中央具一条黑色纵带,前胸背板有3个常连在一起的黑褐色斑,鞘翅背面具多条黑色纵条纹,其中2条特别明显(张丽杰等,2005)。幼虫或成虫聚集在豚草幼嫩叶片上取食,老熟幼虫在叶片上或分叉处结茧化蛹(孟玲和李保平,2005;周忠实等,2015)。在秋季末期,成虫体内积聚脂肪、甘油等耐寒性物质,交配后在豚草枯枝落叶下的浅土层中越冬(Zhao et al.,2019)。 田镇齐 马超 崔少伟 周忠实关键词:广聚萤叶甲 初孵幼虫 豚草 卵粒