- 氨基糖甙类药物对无义突变的HERG通道的药物拯救研究
- 目的：检测无义突变HERG通道的表达水平;探讨氨基糖甙类抗生素G—418和庆大霉素在异源表达系统中对导致LQT2的无义突变的纯合的HERG通道的作用，分析同一种氨基糖甙类药物对不同突变体作用差异性的原因;阐明HERG基因...
- 姚艳
- 关键词：长QT综合征氨基糖甙临床药理
- 文献传递
- 不同浓度药物PTC124和G418对HERG通道无义突变体的作用
- 2014年
- 目的:通过对HERG基因无义突变体应用不同剂量PTC124和G418来观察其通道功能的恢复情况,并探讨药物的作用机制。方法:制备HERG基因R1014X突变体,将野生型(WT)HERG及R1014X分别瞬时转染至HEK293细胞,转染24 h后将其置入含不同浓度的PTC124和G418的培养液中孵育24 h。逆转录聚合酶链反应法检测各组细胞HERG信使核糖核酸(mRNA)的表达,蛋白印迹法检测野生型和R1014X给药前后通道蛋白的表达,全细胞膜片钳技术记录通道电流以评价HERG基因编码通道的功能性表达。结果:与野生型相比,R1014X突变体编码的通道蛋白的蛋白条带变短,蛋白量及mRNA水平无明显差异(P>0.05)。药物PTC124和G418均能恢复R1014X完整蛋白的表达,并呈剂量依赖性变化(P<0.05),PTC124的作用弱于G418(P<0.05)。药物干预后,R1014X突变体HERG通道的功能得到不同程度的恢复,其最大尾电流密度由(4.75±0.88)pA/pF分别增加至(9.62±0.73)pA/pF(PTC124,P<0.05)和(22.57±2.26)pA/pF(G418,P<0.05),G418作用使通道的半激活电压得到恢复(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:药物PTC124和G418能不同程度恢复HERG基因无义突变的结构和功能性表达,其恢复HERG基因的蛋白表达呈剂量依赖性变化。
- 于海云姚艳张银辉龚菁黄健浦介麟
- 关键词：HERG无义突变遗传性心律失常
