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香菇多糖口服液缓解小鼠体力疲劳的功能检测被引量：12: 2009年; 目的:检测香菇多糖口服液是否有缓解小鼠体力疲劳的功能.方法:通过热水抽提、乙醇沉淀等方法制备香菇多糖,用18%橙汁、4%砂糖、0.2%柠檬酸、0.15%稳定剂CMC溶剂配制不同计量口服液,给小鼠灌胃,对照组为生理盐水.30 d后比较各组小鼠体质量、负重游泳时间、血清尿素氮、血乳酸浓度及肝糖原水平的变化.结果:与对照组相比,2.25 g/kgBW剂量组香菇多糖口服液能显著延长小鼠的负重游泳时间(P<0.01),增加肝糖原的储备量(P<0.01),降低血乳酸水平(P<0.01),降低运动后血清尿素氮的增量(P<0.05),1.13 g/kg BW剂量组香菇多糖口服液能延长小鼠的负重游泳时间(P<0.05),降低血乳酸水平(P<0.05),降低运动后血尿素氮的增量(P<0.05).结论:香菇多糖口服液具有抗疲劳生理活性.; 李其久潘吉川崔剑侯潇贲松彬; 关键词：抗疲劳负重游泳血乳酸血清尿素

TAT-Apoptin原核表达载体的构建、可溶性表达及体外活性检测: 目的肿瘤是威胁人类生命的重大疾病，目前尚无有效的特效药物。传统的治疗方案如手术、放化疗等手段普遍地存在治疗效果差，治疗的靶向性不好，肿瘤复发率高等缺陷。来自鸡贫血病毒CAV（chicken anemia ...; 崔剑; 关键词：鸡贫血病毒凋亡素绿色荧光蛋白; 文献传递

PTD-Apoptin融合蛋白原核分泌表达的构建方法及其应用: 本发明涉及PTD-Apoptin融合蛋白的分泌表达载体的构建方法及其应用。将PTD-Apoptin序列连接到pET22b(+)分泌表达载体上，构建原核分泌表达载体pET22b(+)-PTD-Apoptin，经IPTG诱导...; 贲松彬刘雪梅崔剑陈长兰李其久

果蝇硒蛋白D-SelK原核表达及多克隆抗体制备被引量：1: 2012年; 目的:克隆编码果蝇硒蛋白D-SelK结构基因并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗D-SelK的抗体。方法:利用PCR从pGM-T-D-SelK质粒中扩增D-SelK基因,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-D-SelK,以重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,通过变性、电泳纯化D-SelK蛋白,SDS-PAGE和Westem blot方法鉴定目的蛋白的表达;以表达的D-SelK蛋白免疫家兔,制备抗D-SelK的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果:扩增了D-SelK基因,克隆于表达载体pGEX-6p-1中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出目的蛋白,纯化后免疫家兔,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶51 200以上,且具有良好的特异性。结论:已成功构建D-SelK基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗D-SelK抗体,效价及特异性均良好,这为进一步研究功能特异性的D-SelK提供了有效的手段。; 李其久崔剑孟宪军陈长兰贲松彬; 关键词：原核表达多克隆抗体

PTD-Apoptin原核表达载体构建及可溶性表达被引量：2: 2013年; 目的:可溶性表达PTD-Apoptin融合蛋白。方法:亚克隆Apoptin基因并人工合成PTD序列,构建原核表达载体pGEX-6p-1-PTD-Apoptin,使载体在E.coli BL21(DE3)中表达并优化。GST亲和纯化天然状态的融合蛋白,并通过MTT实验验证活性。结果:最佳表达条件是25℃、0.1mmol/mL IPTG过夜诱导表达,经GST亲和纯化得到天然状态的单一组分融合蛋白,与胃癌823细胞共孵育后细胞存活率为10.86%,与对照组相比具显著差异。结论:成功获得高生物活性的原核可溶性表达融合蛋白PTD-Apoptin,使胃癌823细胞存活率降至10.86%。; 贲松彬潘子瑶刘雪梅崔剑谷海峰李其久陈长兰; 关键词：APOPTIN 可溶性表达 BL21(DE3)MTT

PTD-Apoptin融合蛋白原核分泌表达的构建方法及其应用: 本发明涉及PTD-Apoptin融合蛋白的分泌表达载体的构建方法及其应用。将PTD-Apoptin序列连接到pET22b(+)分泌表达载体上，构建原核分泌表达载体pET22b(+)-PTD-Apoptin，经IPTG诱导...; 贲松彬刘雪梅崔剑陈长兰李其久; 文献传递

TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测被引量：9: 2013年; 目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。; 刘雪梅崔剑侯伟健李其久贲松彬; 关键词：凋亡素分泌表达凋亡

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崔剑