张敏静
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:广东省科技攻关计划温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 抗菌肽Cecropin AD在毕赤酵母中的组成型表达及中试发酵研究被引量:4
- 2011年
- 构建表达抗菌肽Cecropin AD蛋白的真核重组表达质粒pGAPZα-A-CAD,并转化酵母菌Pichia pastoris X-33,Zeocin抗性筛选阳性重组子,通过PCR鉴定、Tricine-SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得抗菌肽CAD组成型表达菌株,并采用pH-溶氧监控策略进行工程菌Pichia pastoris X-33/pGAPZα-A-CAD的50 L中试发酵研究。结果表明,本实验成功实现了抗菌肽CAD在毕赤酵母Pichiapastoris X-33中的组成型表达pGAPZα-A,Tricine-SDS-PAGE分析显示在4.0 kDa处有明显的目的条带,工程菌经50 L发酵罐培养48 h后收获的上清液,100℃热处理10 min后,对金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922等均有明显的抑杀作用。抗菌肽的组成型表达方法在本研究中得到了成功应用,中试研究为以后的规模化生产和应用奠定了基础。
- 江学斌张敏静林健聪梁世中
- 关键词:抗菌肽CECROPINAD毕赤酵母发酵