徐锋
- 作品数:11 被引量:45H指数:3
- 供职机构:长江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种促进植物生长和提高植物抗病性蛋白的应用
- 本发明涉及一种促进植物生长和提高植物抗病性的蛋白及其人工合成基因。本发明从稻瘟菌中分离出一种植物激活蛋白,具有促进植物生长和提高植物抗病性的功能。本发明还涉及依据此蛋白的氨基酸序列设计的人工合成基因,以及包含此人工合成基...
- 邱德文刘峥杨秀芬徐锋袁京京
- 文献传递
- 促进植物生长和提高植物抗病性的蛋白及其人工合成基因
- 本发明涉及一种促进植物生长和提高植物抗病性的蛋白及其人工合成基因。本发明从稻瘟菌中分离出一种植物激活蛋白,具有促进植物生长和提高植物抗病性的功能。本发明还涉及依据此蛋白的氨基酸序列设计的人工合成基因,以及包含此人工合成基...
- 邱德文刘峥杨秀芬徐锋袁京京
- 文献传递
- 根瘤农杆菌介导的大白菜aiiA基因的遗传转化
- 以大白菜‘鲁白六号’5 d 苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,采用 L(5)正交设计试验探讨了4种植物生长调节剂(a-NAA、6-BA、TDZ、ABA)和 AgNO对不同外植体不定芽诱导的影响。分析结果表明:a-NAA ...
- 田志宏钟燕华何勇许本波徐锋
- 简易快速高效制备T载体被引量:2
- 2008年
- [目的]制备成本廉价、使用方便、效率高的T载体。[方法]用PstI充分酶切纯化的质粒pUC19,再用T4DNA聚合酶消化15min,电泳得到T载体,进行质量检测,并与商品化的T载体pMD18-T进行对比。[结果]自制的T载体自连检测只发现2个菌落与PCR扩增片段连接。经转化大肠杆菌JM109,pMD18-T的平均白斑率为99.4%,转化菌落为3.55万个/μg,自制T载体的平均白斑率为99.7%,转化菌落为3.38万个/μg,完全可以与商品出售的T载体媲美。[结论]该研究自制的T载体自连率低,假阳性率低,克隆效率高,可替代商品化的T载体用于TA连接,而且制备时间短,成本低廉,技术简单,值得推广。
- 徐锋武晓丽
- 关键词:T载体PCR克隆载体
- 稻瘟菌激活蛋白对植物生长及其生理活性的影响被引量:22
- 2006年
- 本研究发现,稻瘟菌激活蛋白可明显提高丝瓜、番茄等发芽率,促进种子发芽整齐,同时对促进植物幼苗生长、健壮也有明显的作用。处理水稻后,控制稻瘟菌效果达50.68%;抗旱综合指数也从55提高到92。经激活蛋白处理后,植物的纤维素酶和醇脱氢酶活性增强,过氧化氢和脯氨酸的含量提高,这些酶和活性物质在促进植物生长抗逆方面能发挥重要作用。
- 徐锋杨勇谢馥交刘铮邱德文杨秀芬
- 关键词:激活蛋白发芽率抗逆性稻瘟菌
- 利用磁珠构建稻瘟菌cDNA文库被引量:3
- 2008年
- 本文以稻瘟菌菌丝体为材料提取RNA,【目的】改进张学敏等人的方法,通过磁珠构建稻瘟菌cDNA文库,并用于下一步研究稻瘟菌与水稻之间的互作关系。【方法】通过共价键连接的寡聚oligo(dT)磁珠纯化mRNA,并以磁珠上的oligo(dT)为引物引导第一链cDNA的合成,再利用末端转移酶加尾法合成第二链cDNA。构建过程中避免使用限制酶和连接接头。【结果】用此方法构建的文库容量为8.9×107cfu,滴度为8.9×106cfu/mL,随机挑取的25个克隆插入片断平均大小达到1380bp。【结论】实验结果表明用改进的方法可构建高质量的cDNA文库,并且方便快捷,所用材料少,构建时间短,利于大规模的功能基因分析。
- 徐锋武晓丽邱德文
- 关键词:稻瘟菌CDNA文库磁珠
- 用RGA和RAPD标记分析冷季型草坪草品种的遗传基础
- 随着城市绿化事业的不断发展,草坪种植面积迅速扩大,草坪管理的难度也越来越大, 并且草坪病虫危害日趋严重,草坪病害的发生面积逐年扩大。实践证明,培育和种植抗病品种是防治病害最经济有效的途径。本文通过用抗病基因保守序列(RG...
- 田志宏望飞勇许本波徐锋何勇严寒赵福永邱永福
- 文献传递
- 草坪植物RNA提取方法的比较研究被引量:12
- 2007年
- 用CTAB法、SDS法、快速SDS法、异硫氰酸胍法、Tris-硼酸法和Trizol一步法等6种方法,分别从草坪植物草地早熟禾(Poa pratensisL.)、高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)以及马蹄金(Dichondra re-pensForst.)叶片中提取总RNA,并比较各种方法提取RNA的质量。结果表明,由异硫氰酸胍法、SDS法和Tris-硼酸法3种方法获得的RNA纯度较低,存在降解和弥散现象,或混杂的DNA、蛋白质较多,效果均不理想;而用CTAB法、快速SDS法和Trizol试剂盒提取的RNA很少有降解,所得的28SrRNA和18SrRNA条带十分清晰,且D260/D280在1.871至2.021之间。快速SDS法是一种从草坪植物中有效提取高质量RNA的方法,在完整性、纯度、产率上均优于其他几种方法。
- 望飞勇何勇许本波徐锋田志宏
- 关键词:CTAB法SDS法RNA提取草坪草
- 稻瘟菌激活蛋白基因克隆及功能解析
- 激活蛋白(Activator Protein)是从多种病原真菌中分离出的具有诱导植物抗病性、增强抗逆能力、促进植物生长等生物活性的蛋白激发子。目前对激活蛋白其理化性质、作用机理、活性测定等理论研究方面还比较薄弱。本研究以...
- 徐锋邱德文
- 关键词:稻瘟菌激活蛋白基因克隆
- 文献传递
- 拟南芥转录因子CBF1基因的克隆与原核表达被引量:2
- 2008年
- CBF1转录激活因子与植物的抗逆密切相关,根据GenBank中拟南芥(Arabidopsis thaliana)CBF1(C-repeat/dre binding factor 1)基因的编码区设计1对特异引物,通过RT-PCR扩增出拟南芥CBF1基因,随后亚克隆到pMD18-T载体,测序、序列分析表明与拟南芥CBF1对应区域相似性为100%。将该片段亚克隆到原核表达载体pET22b(+)中构建原核表达质粒,转化大肠杆菌ER2566,在IPTG诱导下产生CBF1蛋白,SDS-PAGE结果表明表达的蛋白约24ku,与预期一致。
- 赵世盈徐锋何勇许本波田志宏
- 关键词:原核表达