成亮
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧微环境对TSST-1诱导的抗CEA^+结肠癌LoVo细胞免疫治疗的调控被引量：3
- 2011年
- 目的:研究缺氧微环境对靶向性表达的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1)激活人外周血淋巴细胞(peripheral bloodlymphocyte,PBL)对CEA^+结肠癌LoVo细胞杀伤作用的调控。方法:包装、收集前期构建的缺氧反应元件(hypoxia-response elements,HRE)和癌胚抗原启动子CEAp联合调控的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp-TSST-1-1inker-CD80TM(简称pLEGFP-N1-5HCTC),感染CEA^+LoVo细胞及CEA^-宫颈癌HeLa细胞,获取稳定表达跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM蛋白(TC融合蛋白)的肿瘤细胞。用缺氧模拟试剂CoC1_2模拟缺氧微环境,RT-PCR和WesterRblotting分别检测缺氧调控下TSST-1的表达水平。将健康人PBL与pLEGFP-N1-SHCTC感染后的肿瘤细胞共培养,~3H-TdR掺入法检测缺氧调控下PBL的增殖能力,MTT法检测缺氧调控下PBL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果:pLEGFP-N1-5HCTC病毒成功感染CEA^+LoVo细胞(5HCTC/LoVo),RT-PCR和Western blotting证实,缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞中TSST-1mRNA和蛋白的表达,CEA^-HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TSST-1的表达。缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞诱导的人PBL的增殖(7.3×10~3 vs 3.1×10~3cpm,P<0.05),缺氧环境下PBL对5HCTC/LoVo细胞的杀伤率明显高于常氧环境(82.69%vs53.50%,P<0.01);CEA^-HeLa细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用。结论:缺氧微环境可显著上调靶向性表达的超抗原TSST-1诱导的对CEA^+LoVo细胞的杀伤作用。
- 王炜孙学军王伟田勇郑见宝成亮张超
- 关键词：缺氧微环境LOVO细胞
- 过表达CDX2抑制裸鼠结肠癌移植瘤的生长被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨过表达CDX2对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据。方法:脂质体法介导pEGFP-C1-CDX2真核表达载体转染入结肠癌LoVo细胞,G418筛选出稳定表达CDX2的LoVo细胞(LoVo-CDX2细胞);接种LoVo-CDX2细胞制备裸鼠皮下移植瘤模型,观察CDX2过表达对LoVo细胞移植瘤生长的影响。结果:West-ern blotting结果显示,转染pEGFP-C1-CDX2组LoVo细胞中CDX2蛋白表达量高于pEGFP-C1组及未转染组。LoVo-CDX2、LoVo-C1和LoVo细胞接种裸鼠的第20天,LoVo-CDX2组移植瘤质量较LoVo组和LoVo-C1组移植瘤质量显著减轻[(0.62±0.22)vs(2.10±0.78)、(2.56±0.76)g,分别P<0.05和P<0.01〗。结论:CDX2过表达可以抑制结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的生长。
- 任海亮孙学军郑见宝王炜王伟成亮
- 关键词：CDX2基因结肠癌移植瘤
- 双靶向诱导超抗原TSST-1基因重组逆转录病毒的包装及鉴定
- 2011年
- 目的包装出携5拷贝缺氧反应元件(5 HRE)增强子和癌胚抗原启动子(CEAp)联合调控的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)基因的逆转录病毒,并建立稳定表达TSST-1的人结肠癌Lovo细胞株。方法应用已构建好的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5 HRE-CEAp-TSST-1-linker-CD80TM,与辅助质粒pMB-MLV、pMB-G共转染入293T细胞,LaSRT法检测病毒滴度。包装出的逆转录病毒感染CEA阳性的人结肠癌细胞株Lovo和CEA阴性的人宫颈癌细胞株Hela。应用RT-PCR和免疫组化方法鉴定TSST-1的表达。结果获得重组逆转录病毒滴度约为1×106CFU/mL。RT-PCR及免疫组化证实经病毒感染的Lovo细胞在mRNA和蛋白水平均有TSST-1表达,缺氧环境中的mRNA表达量更高,且细胞传代20次后依然有TSST-1 mRNA表达;经病毒感染的Hela细胞在常氧或缺氧状态下均无TSST-1 mRNA及蛋白表达。结论包装出较高滴度重组逆转录病毒,并能靶向性在CEA阳性肿瘤内稳定表达TSST-1,为后续检验TSST-1对肿瘤的杀伤效应奠定了基础。
- 王伟孙学军王炜郑见宝禄韶英任海亮成亮
- 关键词：逆转录病毒超抗原缺氧诱导CEA阳性肿瘤免疫基因治疗
- Pleiotroph在结直肠癌组织的表达及与临床病理因素的关系
- 目的：探讨Pleiotrophin(PTN)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。 方法：运用原位杂交和免疫组化的方法，研究结直肠癌组织及其对应的正常结直肠组织中PTNmRNA及其蛋白的表达情况。 结果：PTN mRN...
- 陈南征孙学军郑见宝张仕运成亮石景森
- 关键词：结直肠癌基因表达临床病理
- 文献传递
- 胆胰转流术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机制的研究
- 2012年
- 目的探讨胆胰转流术（BPD）对GK大鼠2型糖尿病的治疗作用及其机制。方法将16只GK大鼠随机分为2组，BPD组10只，假手术（sham-BPD）组6只。检测术前1周及术后1、4、10、26周2组大鼠空腹血糖、血清胰岛素、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）和抑胃肽（GIP）浓度；术后10周检测2组大鼠糖耐量及胰岛素敏感性。结果术前2组空腹血糖、血清胰岛素、GLP-1和GIP差异均无统计学意义；与sham—BPD组相比，BPD组空腹血糖水平显著降低（P〈0．05）、血清胰岛素水平差异无统计学意义、糖耐量明显提高、胰岛素敏感性增强；BPD组较术前及sham-BPD组血清GLP-1水平显著上升（较术前，术后1周P=0．0337，术后4周P=0．0002，术后10周P〈0．0001，术后26周P〈0．0001，较sham—BPD组，术后1周P=0．0354，术后4周P=0．0032，术后10周P=0．0001，术后26周P〈0．0001）、GIP水平显著下降（较术前，术后1周P=0．0189，术后4周P=0．0007，术后10周P=0．0003，术后26周P〈0．0001；较sham-BPD组，术后1周P=0．0089，术后4周P=0．0002，术后10周t9=0．0006，术后26周P〈0．0001），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论BPD手术对GK大鼠具有降低血糖、改善糖耐量及增强胰岛素敏感性的作用；GLP．1和GIP可能是BPD降低GK大鼠血糖、改善糖尿病相关代谢综合征的原因。
- 成亮孙学军张仕运王奇龙
- 关键词：2型糖尿病胆胰转流术GK大鼠血糖胃肠道激素
- BP1基因在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义
- 2013年
- 目的检测BP1在甲状腺癌组织中的表达，探讨其与甲状腺癌临床病理因素的关系。方法运用原位杂交及免疫组化方法检测60例甲状腺癌组织（研究组）和20例正常甲状腺组织（对照组）中的BP1表达。结果原位杂交方法检测BP1mRNA阳性率在研究组中为78．3％（47／60），对照组中为20％（4／20），BP1基因在2组的表达差异有统计学意义（x。=22．09，P〈0．05）；甲状腺癌各病理类型的阳性表达率分别为乳头状癌81．7％（40／49）、滤泡状癌85．7％（6／7）、髓样癌25．0％（1／4）；髓样癌分别与乳头状癌、滤泡状癌之间BP1mRNA的表达差异有统计学意义（，=4．21，P〈0．05）；免疫组化检测研究组中BP1蛋白阳性率为93．3％（56／60），对照组中BP1蛋白阳性率为10．0％（2／20），2组间BP1的表达差异有统计学意义（χ2=52．25，P〈0．05）。国际抗癌联盟（UICC）Ⅰ～Ⅱ期BP1mRNA阳性率90．9％（40／44），Ⅲ～Ⅳ期43．8％（7／16），差异有统计学意义（χ2=12．72，P〈0．05）。但BP1mRNA表达与性别、年龄及淋巴结转移无相关性。结论BP1在甲状腺癌组织中的表达显著上调；BP1基因的表达与其UICC分期、病理学类型有关，而与年龄、性别及淋巴转移无关。
- 王奇龙孙学军王林古张仕运成亮
- 关键词：甲状腺癌BP1基因原位杂交免疫组化
- 胃肠道重建手术治疗2型糖尿病的实验研究进展被引量：2
- 2013年
- 糖尿病中90％以上患者是2型糖尿病（type2diabetesmellitus，T2DM）。目前T2DM以饮食控制、运动与生活方式干预、口服各种降糖药物及注射胰岛素等内科治疗为主，但效果不理想，晚期并发症频发，易致生活质量下降。
- 张仕运孙学军成亮
- 关键词：2型糖尿病胃肠道重建手术治疗生活方式干预注射胰岛素晚期并发症
