杨凤
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院感染性疾病分子生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HepG2细胞膜上乙型肝炎病毒前S1蛋白(preS1)结合蛋白的研究被引量：4
- 2009年
- 采用pull down技术研究preS1在HepG2细胞膜上的结合蛋白。以原核表达的GST-preS1融合蛋白为探针蛋白,与生物素标记的HepG2细胞裂解液进行pull down试验分离与preS1结合的膜蛋白。Western blot结果显示HepG2细胞膜上有一大小约110kDa蛋白(p110)与preS1结合。通过对比实验证明该蛋白具有较好的组织特异性和种属特异性。研究结果显示该蛋白是HepG2细胞膜上与preS1结合的蛋白,可能与HBV的早期感染过程有关。
- 丁岗强张君杨凤杨键向光明唐霓黄爱龙
- 关键词：乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白PULL
- 反向斑点杂交法快速检测HBV基因型反应条件的优化和建立被引量：3
- 2009年
- 利用反向斑点杂交技术,设计出特异性基因分型探针,并将探针固定在带正电荷的尼龙膜上,与PCR扩增带有地高辛标记的临床血清样本进行杂交。通过优化杂交反应条件,建立起简单、快速、特异地检测HBV基因型的方法。利用该方法对重庆地区临床样本进行分型检测,并与直接测序结果比较。结果表明新建的HBV基因分型方法可对拷贝数在103以上的血清样本准确分型,特异性达到96.67%。重庆地区感染HBV主要以B型为主。
- 赵丽张文露胡源刘彦辰赖国旗杨凤黄爱龙
- 关键词：反向斑点杂交HBV基因型
- HBV前S1蛋白与HepG2细胞膜蛋白结合位点鉴定被引量：2
- 2009年
- 为鉴定HepG2细胞膜蛋白识别HBV包膜蛋白preS1区的位点。通过删除突变的方法构建preS1的不同区域片段与GST融合的重组表达质粒,将表达质粒转入E.coli BL21菌株中原核表达,以生物素标记HepG2细胞膜蛋白,pull down试验分析HepG2细胞膜蛋白识别preS1的位点。结果表明,21～33位氨基酸是HepG2细胞膜蛋白识别preS1的主要位点。通过对HepG2细胞膜蛋白与preS1结合的位点的分析,为进一步研究preS1在HBV早期感染中的作用和HBV包膜蛋白受体打下基础。
- 丁岗强张君杨凤杨健唐霓黄爱龙
- 关键词：包膜蛋白前S1蛋白
- GRP78在HepG2细胞的亚细胞定位及真核表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建GRP78的真核表达载体以检测GRP78在HEK293细胞中的表达和定位。方法采用激光共聚焦显微镜观察GRP78在HepG2细胞中的定位,用RT-PCR方法从HepG2细胞中扩增GRP78cDNA序列,构建真核表达载体pcDNA3.1-GRP78,转染HEK293细胞,分别用Western blotting和激光共聚焦显微镜检测GRP78在HEK293细胞中的表达和定位。结果GRP78在HepG2细胞的胞膜和胞质均有表达,GRP78在细胞膜上均匀分布。双酶切鉴定和核酸序列分析证实pcDNA3.1-GRP78真核表达质粒构建成功,该表达质粒转染HEK293细胞后可以瞬时表达GRP78蛋白。结论正常状态下,GRP78在HepG2细胞胞膜和胞质均有表达。pcDNA3.1-GRP78转染HEK293细胞后能瞬时表达GRP78蛋白,为进一步研究GRP78的功能提供了重要工具。
- 杨凤丁岗强唐霓赵丽刘彦辰黄爱龙
- 关键词：葡萄糖调节蛋白78
