杨琨
- 作品数：5 被引量：33H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 反义人IL-10和反义病毒性IL-10抗鼻咽癌细胞成瘤效应的研究被引量：1
- 2002年
- 目的:探讨反义人IL-10和反义病毒性IL-10抑制鼻咽癌细胞成瘤的效果。方法:扩增及克隆hIL-10 cDNA和 vIL-10基因,构建反义hIL-10和反义vIL-10双价真核表达载体pcDNA3/AS hIL-10+AS vIL-10,转染鼻咽癌细胞株SUNE。将转染阳性的SUNE细胞克隆和未转染的SUNE细胞接种SCID小鼠和经健康人外周血白细胞免疫重建的SCID小鼠（hu-PBL-SCID鼠）,观察成瘤效应。结果:ELISA法测得未转染SUNE细胞培养上清液中IL-10和vIL-10的总含量为242±23pg/ml,而转染阳性的SUNE细胞培养上清液中hIL-10和vIL-10的总含量仅为22±6pg/ml。在SCID鼠体内,vIL-10和hIL-10的表达与否,并不影响鼻咽癌细胞的成瘤活性,但在hu-PBL-SCID鼠体内,抑制vIL-10和hIL-10的表达则可明显抑制鼻咽癌细胞的成瘤作用。结论:反义人IL-10和反义病毒性IL-10可显著抑制鼻咽癌细胞在血hu-PBL-SCID鼠体内的成瘤作用,鼻咽癌组织表达vIL-10和hIL-10的确与鼻咽癌免疫耐受有关。
- 陶剑平杨琨朱振宇林学颜
- 关键词：鼻咽癌
- 体外培养重建角膜组织的技术探讨被引量：20
- 2001年
- 目的 :探讨体外重建角膜组织的三维培养技术。方法 :原代培养角膜上皮、基质和内皮细胞 ,利用硫酸软骨素、透明质酸钠、 型胶原蛋白和微孔材料 ,建立三维培养系统 ,体外重建角膜组织结构 ,观察非醛交联、醛交联和微孔材料等三类人工角膜的透明度 ,常规病理组织学检测细胞在三维培养系统中生长状态。结果 :非醛交联类重建人工角膜质地较软 ,透明度较低 ,光镜可见纤维结构。醛交联类重建人工角膜质地较韧 ,透明性较高 ,光镜可见均质结构。非吸收微孔材料类细胞长入较少 ,较难体外重建人工角膜。结论 :利用生物工程技术能够体外重建人工角膜 ,非醛交联类结构较规则 。
- 陈家祺张胜郭琳洁杨琨
- 关键词：人工角膜体外培养体外重建
- 人胚肺成纤维细胞饲养兔角膜上皮和内皮细胞的体外培养被引量：9
- 2001年
- 目的 研究人胚肺成纤维饲细胞体外培养兔角膜上皮和内皮细胞。方法 人胚肺成纤维细胞系细胞，经丝裂霉素Ｃ处理成饲细胞。兔角膜上皮和内皮细胞组织块原代培养，消化接种于人胚肺饲细胞瓶传代培养。体外培养的角膜上皮和内皮细胞行常规病理形态学检查，角膜上皮细胞行角蛋白、内皮细胞行神经烯醇化酶免疫组化染色检测。结果人胚肺成纤维细胞形态均一，易于分辨，经丝裂霉素处理后失去增殖能力。角膜上皮和内皮细胞原代培养５～７天，细胞密集，经人胚肺饲细胞共培养５代，细胞无衰老现象。检测角膜上皮细胞角蛋白、内皮细胞神经烯醇化酶表达阳性，人胚肺饲细胞表达阴性。结论 人胚肺饲细胞能够明显增强角膜上皮和内皮细胞的体外生存能力，提高细胞的增殖能力。
- 张胜陈家祺郭琳洁杨琨
- 关键词：角膜上皮细胞角膜内皮细胞人胚肺成纤维细胞
- 人内皮抑素在大肠杆菌中的高效表达及活性研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :表达人内皮抑素蛋白 ,制备多克隆抗体 ,检测其生物学活性。方法 :采用PCR法扩增人内皮抑素基因 ,构建pGEX -ES融合表达载体 ,IPTG(异丙基硫代 - β-D半乳糖苷 )诱导表达。初步纯化的内皮抑素包含体蛋白制备兔多克隆抗体 ,Western -blot检测其在小鼠肝、肾等的表达。亲和纯化的内皮抑素蛋白用内皮细胞抑制实验检测其生物学活性。结果 :诱导表达的人内皮抑素蛋白经凝血酶酶切后 ,分子量约为 2 0kD ,具有抑制内皮细胞生长的活性。制备的多克隆抗体检测出内皮抑素在小鼠肝、肾等组织的表达。结论
- 张革柯细松丁爱玲银巍杨琨朱振宇
- 关键词：内皮抑素大肠杆菌生物学活性实体瘤
- 硫化嵌合型LRP反义寡核苷酸逆转葡萄膜黑色素瘤多药耐药性被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨体外培养的葡萄膜黑色素瘤细胞对不同化疗药物敏感性 ,并通过硫化嵌合型反义寡核苷酸 (AS -ODN)特异阻断肺耐药基因 (LRP)的表达逆转肿瘤多药耐药性。方法 :通过原代培养葡萄膜黑色素瘤细胞 ,采用噻唑蓝 (MTT)法测定肿瘤细胞对氟脲嘧啶 ,噻替哌 ,顺铂 ,阿霉素 ,长春新碱 ,氮烯咪氨 6种药物体外敏感性。检测不同浓度药物作用 96小时后对肿瘤细胞的杀伤情况。利用RT -PCR ,Westernblot法测定肿瘤细胞LRP的表达 ,并通过阳离子脂质体导入LRPAS -ODN ,阻断LRP的表达 ,测定该基因对肿瘤细胞化疗药物敏感性的影响。结果 :葡萄膜黑色素瘤对不同的化疗药物均有抗药性。LRPAS -ODN可下调该基因的表达 ,且与剂量呈正相关。LRPAS -ODN在 15 0nM以下对葡萄膜黑色素瘤的增殖活性无明显影响 ,但可逆转肿瘤的多药耐药性。结论 :临床常用化疗药物及化疗剂量对葡萄膜黑色素瘤细胞杀伤作用较小 ,LRP的高表达与肿瘤的多药耐药性密切相关。
- 郭琳洁吴中耀张胜杨琨郑健樑郑湖玲
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤多药耐药反义寡核苷酸
